系統性紅斑狼瘡合并血栓形成患者狼瘡抗凝物水平分析

饒 繪 李智山 趙建忠 童允潔 潤袁敏，＊

系統性紅斑狼瘡（Systemic Lupus Erythematosus，SLE）患者存在血栓前狀態，許多臨床并發癥與血栓形成密切相關。血栓事件發生機制涉及除血管內皮損傷、凝血、抗凝、纖溶系統平衡失調等多個血栓形成因素外，最近研究發現狼瘡抗凝物（LA）在SLE患者的檢出率較高，而且與血栓事件發生率相關［1］。本文檢測分析合并血栓形成SLE患者的LA水平變化。

1 資料與方法

1.1 對象和分組

2012－06－2015－04在本院風濕免疫科住院的SLE患者78例（SLE組），其中男8例，女70例，年齡13－61歲，平均37±9歲，SLE診斷符合2010年中華醫學會風濕病學分會SLE診斷標準［2］。SLE組患者入院時病情均處于活動期，住院期間使用甲基強的松龍或聯合應用環磷酰胺沖擊治療。按是否合并血栓事件將SLE組分為SLE－血栓組（n＝8）和SLE－非血栓組（n＝70）兩個亞組。SLE－血栓組與SLE－非血栓組年齡、性別組間差異無統計學意義（P＞0.05）。其中SLE－血栓組8例（8／78）共發生11次血栓事件，血栓類型包括下肢深靜脈血栓（6／11）、上肢靜脈血栓（1／11）、缺血性腦卒中（2／11）、腦靜脈竇血栓形成（1／11）和胎盤血栓（1／11）。對照組為本院同期體檢健康者（n＝40），男6例，女34例，年齡14－60歲，平均36±8歲。對照組性別、年齡與SLE組相匹配，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 血樣采集和LA檢測

所有受檢者取血前一周均未使用抗凝藥物。清晨空腹取靜脈血2.7ml于枸櫞酸鈉抗凝管中，混勻后離心（1200g，10min）。為去除血小板，取離心后的上層血漿進行二次離心（1200g，10min）［3］。將上層乏血小板血漿于－80℃冰箱保存、批檢。LA檢測采用改良稀釋蝰蛇毒磷脂時間法，試劑和質控物購自美國沃芬醫療設備國際貿易（上海）有限公司（篩 選 試 劑 Lot：NO249101；確 診 試 劑 Lot：NO349312；陽性質控Lot：NO440025；陰性質控Lot：EO942625），按照試劑說明書，采用血凝分析儀（STAGO－Evolution，法國）檢測。篩選試驗：分別取患者和同批對照血漿100μl，37℃預熱240s，加100μl篩選試劑（試劑主要成分為蝰蛇蛇毒和鈣離子混合液），記錄血漿凝固時間，計算篩選試驗比值（＝患者凝固時間／對照凝固時間）；確診試驗：分別取患者和同批對照血漿100μl，37℃ 預熱240s，加100μl確診試劑（試劑主要成分為蝰蛇蛇毒、鈣離子混合液和血小板溶解液），記錄血漿凝固時間，計算確診試驗比值（＝患者凝固時間／對照凝固時間）。同批完成質控并計算LA比值（＝篩選試驗比值／確診試驗比值）。

1.3 臨床血栓事件的確定

深靜脈血栓形成經多普勒超聲掃描、血管造影證實；缺血性腦卒中經CT及臨床表現證實；腦靜脈竇血栓形成經頭顱磁共振成像聯合磁共振靜脈成像、全腦數字減影血管造影并結合臨床表現證實；胎盤血栓經病理證實。

1.4 統計學處理

采用SPSS 14.0統計學軟件。計量資料用均數±標準差（±s）表示，Shapiro－wilk檢驗判定符合正態分布。兩組間LA比值比較采用t檢驗；計數資料用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

與對照組比較，SLE組LA比值明顯升高，差異有統計學意義（1.04±0.07vs 1.30±0.36，t＝6.139，P＜0.01）。

與SLE－非血栓組比較，SLE－血栓組LA比值明顯升高，差異有統計學意義（1.25±0.30vs 1.80±0.44，t＝－4.659，P＜0.01）。

3 討 論

SLE是一種多系統、多器官組織損害的慢性、自身免疫性疾病，發病機制涉及體內免疫、激素和神經調節失衡。血栓形成是SLE患者的重要表現之一。除因廣泛血管損傷導致凝血增強外，LA水平升高對SLE血栓形成可能也有一定的作用［4，5］。本文結果不僅顯示SLE患者LA比值明顯高于健康對照組（P＜0.05），而且SLE－血栓組LA比值顯著高于SLE－非血栓組（P＜0.05），提示LA在SLE血栓事件中起重要作用。

作為抗磷脂抗體之一，LA在體外試驗中表現為延長磷脂依賴的凝血過程，但在體內，LA反而具有促血栓形成的作用。LA促進SLE患者發生血栓事件的可能機制包括：（1）LA與血管內皮細胞膜磷脂作用，干擾內皮細胞釋放纖溶酶原激活物而抑制纖溶；（2）LA與血小板膜磷脂作用，干擾花生四烯酸代謝，促進血小板活化；（3）LA可抑制與磷脂相關的內源性抗凝物質，使血液凝固性增強，如LA通過競爭磷脂酰乙醇胺，抑制蛋白C途徑，引起獲得性活化蛋白C抵抗，使之減少或喪失對FⅤa和FⅧa的快速水解作用。LA的上述多途徑促血栓作用的持續存在，有助于處于血栓前狀態SLE患者的血栓形成［6］。因此臨床有必要對SLE患者進行LA水平檢測，一方面用于評估患者血栓形成風險，另一方面還可對LA持續中、高滴度SLE患者使用羥氯喹的療效進行監測［7］，也能通過LA水平的升降變化預測治療后血栓的轉歸［8］，從而為SLE血栓事件的防治起到積極作用。