血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性與下肢深靜脈血栓形成的相關性

唐金鳳，陳先春，鐘磊，劉婷，肖九長

(贛州市人民醫院檢驗科,江西贛州341000)

血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性與下肢深靜脈血栓形成的相關性

唐金鳳，陳先春，鐘磊，劉婷，肖九長

(贛州市人民醫院檢驗科,江西贛州341000)

摘要：目的通過檢測下肢深靜脈血栓患者血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ(簡稱FⅤ、FⅧ或Ⅴ因子、Ⅷ因子)及蛋白C活性，探討其與患者下肢深靜脈血栓形成的相關性及其早期診斷價值。方法隨機選取在本院住院的下肢深靜脈血栓患者70例，以同期健康體檢者70例作為對照組，測定其血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性。結果采用Logistic回歸分析結果表明，凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性是患者發生下肢深靜脈血栓的危險性因素。下肢深靜脈血栓患者的血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ活性與健康對book=104,ebook=113照組相比均明顯增高，蛋白C活性與健康對照組相比均明顯減低，差異具有統計學意義(P<0.001)。結論血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ活性與患者下肢深靜脈血栓形成有顯著相關性，而且血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ、蛋白C活性水平與下肢深靜脈血栓形成危險性呈正相關，凝血因子Ⅷ活性異常增高、蛋白C活性降低是下肢深靜脈血栓形成的獨立危險因素。

關鍵詞：深靜脈血栓；凝血因子Ⅴ；凝血因子Ⅷ；蛋白C

下肢深靜脈血栓(deep venous thromboses，DVT)是臨床上常見的一種疾病，是指血液在下肢深靜脈不正常的凝結，可造成肢體功能不全，其危險性很高，一旦病情延誤，錯過溶栓的最佳時期，將預后不良，甚至危及生命，或需要截肢而致殘，給患者帶來極大的痛苦和負擔。該病發病機制是建立在高凝狀態的基礎上，約30%呈現隱匿發病模式，對下肢深靜脈血栓形成發病危險因素的合理評估，有助于預防下肢深靜脈血栓的發生，并選擇有效的指標進行監測，可及時發現DVT,減低因病情延誤導致的病殘率[1]。

1　資料與方法

1.1一般資料選取我院2013年1月至2014年9月資料齊全的明確診斷為下肢深靜脈血栓患者為研究對象，共70例，年齡35~70歲，平均57歲。選取本院同期健康體檢者70例作為對照組，年齡35~66歲，平均56歲。

1.2標本采集靜脈采血，凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性測定采取0.109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml+靜脈血1.8ml混勻，避免產生氣泡，1h內以1500×g離心，離心10min分離出乏血小板血漿，并及時檢測。

1.3檢驗方法凝血因子Ⅴ、Ⅷ活性檢測采用凝固法，蛋白C活性檢測采用發射底物法，利用日本Sysmex Ca-7000全自動凝血分析儀和儀器配套試劑進行檢測。

1.4采用統計軟件SPSS16進行分析統計學分析，計量資料采用均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，危險度評估采用Logistic回歸分析，P< 0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1下肢深靜脈血栓的危險性評估采用Logistic回歸分析對凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性對患者發生下肢深靜脈血栓的危險性進行評估。通過回歸分析得出，凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性是患者發生下肢深靜脈血栓的危險因素，如表1所示，FⅤ、FⅧ活性增高對FⅤ、FⅧ活性正常的人發生下肢DVT的比數比(OR值)為3.241和2.057，蛋白C活性減低對活性正常的人發生DVT的比數比為21.134。

表1　凝血因子Ⅴ、Ⅷ、蛋白C活性與患者發生下肢深靜脈血栓的危險性評估表

2.2血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性比較分析下肢DVT患者中血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性與健康對照組比較，血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ明顯增高，蛋白C活性明顯降低，而健康對照組均正常，兩者相比有顯著差異(P<0.001)，如表2所示。

表2　DVT組凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性與健康對照組結果比較

3　討論

下肢深靜脈血栓(DVT)已嚴重威脅著人類健康，若治療不及時，將會給患者帶來嚴重的身心傷害，并且早期下肢DVT的臨床表現并不明顯，特別是繼發性或合并其他疾病的情況下，更難于鑒別診斷。所以提高DVT的早期診斷率是極為重要的。本文擬檢測下肢DVT患者的血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ、蛋白C活性，分析三個指標與下肢深靜脈血栓形成的相關性，同時評估其危險性，初步探討三個指標在下肢深靜脈血栓中的的應用價值，為臨床提供下肢DVT的早期診斷依據，以便更好地進行早期治療，降低病殘率。

凝血因子V(FV)是血漿中一種單鏈糖蛋白，其分子量為330KD。FVa本身不具有酶促活性，它是活化凝血因子X的重要輔助因子，其與Ca2+、PF3及F I一起形成凝血酶原酶復合物，該復合物可加快凝血酶原轉化為凝血酶，促進凝血。研究發現凝血因子V活性升高是靜脈血栓栓塞的危險因素,靜脈血栓的病人凝血因子V活性高于健康對照組[2],但是Suehisa等[3]研究發現低水平的凝血因子V與DVT發生相關，因為凝血因子V既有促進凝血的功能也有促進抗凝的作用。本文研究的患者FV明顯高于健康對照組，是靜脈血栓栓塞的危險因素，FV增高可能促進血栓形成。

FⅧ是血漿中的一種球蛋白，曾被稱為抗血友病因子或抗血友病球蛋白，由肝細胞合成，FⅧ作為FⅨa的輔因子參與對FⅩ的激活，在鈣離子參與下，FⅧ與FⅨa在磷脂表面形成復合物，而能使FⅨa對FⅩ激活的速率加快幾百倍，促進凝血酶形成。Jenkins等[4]研究表明高水平的FⅧ是靜脈血栓形成的高危因子。本研究通過Logistic回歸分析，發現FⅧ與下肢深靜脈血栓形成關系密切。患者FⅧ明顯高于健康對照組，可能促進血栓形成。而且Nossent等[5]已研究證實FⅧ基因突變可影響FⅧ水平并顯著增加血栓形成風險性，Viel等[6]發現FⅧ基因多態性與FⅧ活性也顯著相關。所以對于疑似下肢DVT患者，應早期檢測FⅧ水平，對于結果異常者，需行FⅧ基因檢測，以排除基因突變與多態性，以期明確病因，采用最佳治療方案，并預防下肢DVT再發。

蛋白C是一種VitK依賴的糖蛋白，主要由肝細胞合成，分布于血漿中，蛋白C分子在結構上含有3種結構域，分別為1－羧基谷氨酸結構域，表皮生長因子同源區域以及絲氨酸蛋白酶樣結構域。其中絲氨酸蛋白酶樣結構域為蛋白C的活性中心[7]。蛋白C主要通過其活性形式APC(activated protein C,APC)參與滅活FV、FⅧa并影響FXa與凝血酶的形成，從而抑制凝血過程的發展[8]。嚴重的蛋白C缺乏癥會使凝血與抗凝及纖溶系統發生紊亂．從而引發血栓性疾病，如深靜脈血栓形成、彌散性血管內凝血等[9]。研究發現FV、FⅧ基因發生突變時，產生的FV、FⅧ變異體，對APC產生抵抗，APC不能對FV、FⅧ起到滅活作用，從而促進血栓形成[10,11]。本研究中發現DVT組APC活性明顯低于健康對照組，表明APC活性在DVT中發揮重要作用。回歸分析也表明，蛋白C活性降低是下肢深靜脈血栓形成的極重要的危險因素。

因此，聯合檢測血漿凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性是早期診斷下肢深靜脈血栓的重要方法，對外科手術后患者及危重患者的監測尤為重要。

參考文獻

[1]Cook DJ,Crowther MA,Meade MO, et al.Prevalence ,incidence,and risk factors for venous thromboembolism in medical-surgical intensive care unit patients[J].J Crit Care,2005,2:309-313.

[2]韓軒茂,任景芳,郝斌,等.靜脈血栓栓塞癥患者活化蛋白C抗性及凝血因子Ⅴ活性和基因多態性研究[J].中國試驗血液學雜志, 2007,15(3):612-616.

[3]Suehisa E, Kawasaki T, Toku M, et al. Low level of factor V is associated with development of deep-vein thrombosis in Japanese patients[J].Thrombr Res,2010,125(2):128-133.

[4]Jenkins PV, Rawley O, Smith OP, et al. Elevated factor VIII levels and risk of venous thrombosis [J]. Brit J Haematol,2012,157(6): 653-663.

[5]Nossent AY,Eikenboom JCJ,Vos HL,et a1．Haplotypes encoding the factorⅧ1241Glu variation,FactorⅧlevels and the risk of venous thrombosis[J].Thromb Haemost,2006,95(6):942-948．

[6]Viel KR, Machiah DK, Warren DM, et a1. A sequence variation scan of the coagulation factorⅧ(FⅧ) structural gene and associations with plasma FⅧactivity level [J]. Blood,2007,109:3713-3724．

[7]Dahlback B,Villoutreix BO. Regulation of blood coagulation by the protein C anticoagulant pathway: novel insights into structure funotion relationships and molecular recognition [J]. Arterioseler Thromb Vasc BioI,2005,25(7):1311-1320．

[8]Rezende SM, Simmonds RE, Lane DA. Coagulation, inflamation and apoptosis:different roles for protein S and the protein S-C4b binding protein complex[J].Blood,2004,103(4):1192-1201.

[9]陸松松,吳迪,賈玫.蛋白C的檢測方法及研究進展[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(4):297-299.

[10]Castoldi E. FV and APC resistance: the plot thickens[J].Blood, 2014,123(15):2288-2289.

[11]Li J, Hu X, Zhang Q, et al. Activated protein C resistance associated with lupus anticoagulants is a high risk in acute mesenteric venous thrombosis [J]. J Vasc Surg: Venous and Lymphatic Disorders,2014,2(2):155-159.

·檢驗與臨床·

(收稿日期2014-07-29；修回日期2014-09-25)

DOI:10.3969/j.issn.1674-1129.2015.01.041

中圖分類號:R446.11+1，R543.6

文獻標識碼：A

文章編號：1674-1129(2015)01-0103-03