北伐是孫中山的一貫主張,蔣介石從1926年初就開始極力推動北伐計劃。但莫斯科明確指示要阻止北伐,為此召支持北伐的鮑羅廷、加侖回國,由季山嘉接任。季山嘉反對北伐,并削減黃埔軍校的經費、改編軍隊,引起蔣介石的猜疑,汪精衛傾向季山嘉的態度又增加了蔣的疑懼。3月18日晚,商輪定安號遭匪搶劫向黃埔軍校求救,軍校值班人員電請駐省辦事處派船,駐省辦事處主任向海軍局求助,海軍局當夜即令中山艦出動。次日清晨,中山艦駛往黃埔不久,一俄國考察團提出上午要參觀中山艦,海軍局局長、共產黨員李之龍請示蔣介石,問可否調回中山艦。此時,汪精衛又幾度詢問蔣何時回黃埔,而蔣赴俄的護照又剛好得到批準,于是蔣猜疑:中山艦開黃埔意在把他架往蘇聯,是倒蔣的陰謀。20日上午,蔣下令逮捕李之龍,占領中山艦,廣州部分地區戒嚴,一度收繳蘇聯顧問衛隊的武器;下午蔣意識到并不存在特別危險,就取消了戒嚴,交還武器并放人。周恩來當天也并未被軟禁,第一軍中的共產黨員沒有受到沖擊。事件當天,蔣介石十分緊張,以致見到何香凝時“竟像小孩子般伏在寫字臺上哭了”。事后,蔣不得不向蘇聯顧問百般道歉,但是,蘇方不僅沒有追究,而且痛快地答應了調走季山嘉的要求。如果說,事件對蔣的心理產生什么重要影響,那么可以肯定,蔣對用強力解決內部糾紛,實現政治目的留下了深刻印象。5月5日,國民黨二屆二中全會召開,包括毛澤東、惲代英、林伯渠在內的共產黨員,對整理黨務案都采取了相當合作的態度。蔣介石提出整理黨務案,目的是限制共產黨發展,確保自己和國民黨的政治生命和前途,還不是要馬上與共產黨分手。在他為退出第一軍的黨代表舉行的宴會上,仍試圖消除兩黨黨員的沖突,北伐開始后,他重新啟用一批共產黨員參加第一軍工作,如蔣先云等。