陰道分泌物干化學酶法與傳統方法檢測結果的比較

經先振　王　齊　牛國平　江蘇省徐州市中心醫院檢驗科　221009

陰道分泌物干化學酶法與傳統方法檢測結果的比較

經先振王齊牛國平江蘇省徐州市中心醫院檢驗科221009

摘要目的：探討陰道分泌物干化學酶法檢測結果與傳統方法檢測結果的差異。方法：對598例婦產科門診住院患者陰道分泌物同時使用干化學酶法檢測過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值等6項干化學酶法，并同時進行傳統的顯微鏡鏡檢、胺試驗檢測，并對兩種方法的檢測結果進行比較。結果：唾液酸酶測定細菌性陰道炎與傳統方法比較結果比較差異有統計學意義(McNemar檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性一般(Kappa=0.461>0.4)。干化學酶法判定霉菌性陰道炎，滴蟲性陰道炎的結果與傳統方法檢測結果比較差異有統計學意義(P<0.001)，一致性結果較差(Kappa值分別為0.044和0.107均<0.4)。白細胞酯酶與鏡檢結果檢測結果比較差異有統計學意義(McNemar-Bowker檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性很差(Kappa=-0.017<0) 結論：受多種因素的影響，兩種方法檢測結果差異有統計學意義，一致性較差。如何減少消除兩種方法的差異，更好的提高干化學酶法在陰道炎診斷的作用，有待進一步探討。

關鍵詞陰道分泌物干化學酶法顯微鏡檢查

陰道炎是婦科最常見疾病，根據病因將其分為感染性陰道炎、刺激性陰道炎和萎縮性陰道炎3種類型，其中由病原體導致的感染性陰道炎占到90%以上。包括由白色念珠菌感染為主的霉菌性陰道炎、加德納菌感染的細菌性陰道炎及陰道毛滴蟲導致的滴蟲性陰道炎。陰道分泌物是女性生殖系統分泌的液體，主要由陰道黏膜、宮頸腺體、前庭大腺及子宮內膜的分泌物混合而成。為白色稀糊狀、無氣味、量多少不等。陰道炎癥時陰道分泌物增多，并因病原體不同而呈不同的顏色性狀。陰道分泌物的檢查對確定感染的病原體，明確病因具有積極的作用。傳統的陰道分泌物檢查主要是顯微鏡鏡檢查找病原體，并結合pH測定、胺試驗對陰道炎的種類進行判斷[1,2]。傳統方法操作簡便，但要求檢查者經驗豐富，結果易受主觀因素影響，試驗重復性不高。近年隨著檢驗醫學的發展，基于干化學酶反應技術的陰道分泌物檢測的生化指標：過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH值等應用于臨床。本文就陰道分泌物干化學酶法與傳統方法檢測的結果進行比較，探討干化學酶法應用于細菌性陰道炎、霉菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎及白細胞酯酶檢測的臨床價值。

1資料與方法

1.1臨床資料2013年2-3月我院婦產科門診患者598例，年齡17～79歲，平均年齡33.6歲。由婦產科醫生用無菌棉簽采集患者的陰道分泌物，并立即送檢。

1.2試劑與儀器干化學酶法檢測使用江蘇碩世生物科技有限公司生產的陰道炎檢測工作站及炎速知陰道炎聯合快速檢測試劑盒，0.9%氯化鈉溶液、10%氫氧化鉀溶液，5%冰醋酸。

1.3試驗方法陰道分泌物采集后立即送檢，放入加樣管中滴加5～6滴快速檢測稀釋液，反復旋轉拭子促進所附著的分泌物釋放，并將棉簽的液體擠壓流回試管，棄去棉簽得到樣本液。干化學酶法測定按檢測說明書、儀器操作規程進行檢測。為減少誤差，傳統檢測使用干化學酶法測定后的樣本液按操作規程進行檢測。

1.4結果判定

1.4.1干化學酶法結果判定：炎速知聯合檢測試劑盒有六項檢測指標，包括過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸酶、β-葡萄糖醛酸酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶、pH，用于檢測細菌性陰道炎、霉菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎的指標如下：唾液酸酶陽性提示細菌性陰道炎；乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性，pH≤4.6提示霉菌性陰道炎，pH≥4.6提示滴蟲性陰道炎；白細胞酯酶根據顏色深淺分為-、+-、+、++、+++5個等級。因需氧性細菌及乳酸桿菌濕片法無法確定，所以β-葡萄糖醛酸酶、過氧化氫本文未予分析。

1.4.2傳統方法結果判定：細菌性陰道炎診斷標準為：(1)陰道分泌物稀薄均勻；(2)分泌物pH>4.5；(3)胺試驗陽性；(4)出現線索細胞；其中三項陽性為BV[3]。霉菌性陰道炎診斷標準為，濕片或KOH涂片看到白色念珠菌孢子或菌絲為陽性。滴蟲性陰道炎以高倍鏡看到濕片中的滴蟲為陽性[2]。白細胞判定標準對應白細胞酯酶分為5個等級：0個/HP為-，0個

1.5統計處理使用SPSS19.0統計軟件，對數據資料采用配對資料McNemar檢驗，檢驗差異性,P<0.05為差異有統計學意義；Kappa檢驗一致性[5,6]。

2結果

2.1兩種方法檢測細菌性陰道炎(BV)去除76例VVC、TV后的522例標本中唾液酸酶測定BV陽性為94例，傳統方法陽性為59例。以傳統方法為參考，陽性符合率為69.45%，陰性符合率為88.55%,總符合率為86.40%，應用SPSS19.0分析數據，顯示兩種方法檢測結果比較差異有統計學意義(McNemar檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性一般(Kappa=0.461>0.4)。見表1。

表1　兩種方法檢測BV結果

2.2兩種方法檢測霉菌性陰道炎(VVC)去除67例TV、BV后的531例標本中通過乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性和pH≤4.6(酶法判斷)檢測霉菌陽性142例，KOH法濕片鏡檢診斷霉菌陽性68例。以KOH濕片法為參考，陽性符合率為32.35%，陰性符合率為74.08%,總符合率為68.74%，應用SPSS19.0分析數據，顯示兩種方法檢測結果比較差異有統計學意義(McNemar檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性較差(Kappa=0.044<0.4)。見表2。

表2　兩種方法檢測VVC結果

2.3兩種方法檢測滴蟲性陰道炎(TV)去除127例BV、VVC后的471例標本中通過乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性和pH≥4.8(酶法判斷)檢測滴蟲陽性81例，濕片鏡檢診斷滴蟲陽性8例，以濕片鏡檢為參考，陽性符合率為75.00%，陰性符合率為83.80%,總符合率為83.65%，應用SPSS19.0分析數據，顯示兩種方法檢測結果比較差異有統計學意義(McNemar檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性較差(Kappa=0.107<0.4)。見表3。

表3　兩種方法檢測TV結果

2.4兩種方法檢測白細胞通過檢測白細胞酯酶與濕片鏡檢結果如表4，應用SPSS19.0分析數據，顯示兩種方法檢測結果比較差異有統計學意義(McNemar-Bowker檢驗結果P<0.001)，兩種方法檢測結果一致性很差(Kappa=-0.017<0)。見表4。

表4　兩種方法檢測白細胞結果

3討論

陰道炎是婦科最常見疾病，其中主要由白色念珠菌、加德納菌、陰道毛滴蟲三種病原體導致的感染性陰道炎占到90%以上。傳統的陰道分泌物檢查通過顯微鏡觀察找出致病的病原菌，并結合胺試驗、pH,對陰道炎的臨床診斷與治療具有重要的意義。近年來國內外在研究應用陰道分泌物的生化標志物間接地檢測病原微生物，來診斷陰道炎。在國內，利用干化學酶法檢測陰道分泌物的生化指標已開始應用于臨床，并開發出自動檢測工作站。新的檢測方法與技術的應用，不但減少了人為影響，提高了工作效率，而且為檢測的標準化提供了機會。然而，無論是傳統的陰道分泌物檢查，還是干化學酶法檢測易受多種因素的影響。已有許多學者對兩種方法的檢測結果進行了研究，有研究顯示兩種方法的檢測結果差異不大[7,8]。也有研究顯示兩種方法結果差異明顯[4]。本文結果顯示以傳統方法為對照，干化學的結果較差，一些檢測出線索細胞、白色念珠菌、陰道毛滴蟲的病原菌的陽性標本，干化學相關酶檢測結果陽性符合率分別為69.45%、32.35%、75.00%表明干化學結果對診斷陰道炎疾病的診斷意義不大。在檢測反映炎癥程度標志物白細胞的結果來看，白細胞酯酶的結果與鏡檢結果比較一致性也很差(kappa=-0.017<0)。

本文結果顯示無論是干化學酶法與成熟的傳統方法檢

測的結果相比較差異具有統計學意義，一致性較差。產生此結果與以下原因有關：(1)標本采樣不符合試劑盒的標準要求：取樣前24h應禁止性交、盆浴、陰道灌洗及局部上藥等。雌激素使用者，孕期、經期樣品會對結果判讀有影響，激素濫用者會對檢測結果產生影響，不適宜做該項檢測。有研究表明精液對陰道分泌物相關化學指標造成假陽性的影響。(2)干化學反應本身容易受到多種因素影響。有大量的研究表明相交成分比較簡單的尿液干化學反應結果都受到多種因素干擾，使結果產生假陰性或假陽性。相對來說一些抗原抗體的反應特異性比較高[9]。

以上結果表明，陰道分泌物標志物檢測較傳統方法簡便，更易于標準化，并且可以使用自動檢測系統，進一步提高其優勢，替代人工檢測是未來的趨勢，但是在相關標志物選擇上應該選用特異性強、靈敏度高、不易受干擾的指標，才能使其臨床應用價值提高。

參考文獻

[1]樂杰 .婦產科學〔M〕.第6版.北京：人民衛生出版社,2004:256-262.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程〔M〕.第3版.南京：東南大學出版社,2006:324.

[3]饒榮,馮申亮.五聯檢檢測3988例陰道分泌物結果分析〔J〕.中國微生態學雜志,2011,23(2):173-174.

[4]趙芳,曹國君,劉璐,等.陰道分泌物白細胞酯酶試驗與鏡檢結果一致性比較〔J〕.國際醫學檢驗雜志,2012，33(18):2236-2237.

[5]程宗,陳麗萍,劉一志,等.多分類計數配對資料Bowker檢驗的分割及其應用〔J〕.泰山醫學院學報,2008，29(11):864-867.

[6]陸運濤.相關四格表數據資料檢驗方法的進展與應用〔J〕.統計與決策,2011，27(17):30-32.

[7]唐吉斌,焦瑞寶,張岑.陰道分泌物生化標志物聯合檢測的評價〔J〕.中華醫院感染雜志,2012,22(2):436-438.

[8]宋志廣.聯合檢測六項白帶生化標志物在陰道炎中的應用〔J〕.中國實用醫藥，2014，9(26):104-105.

[9]方從舉,王志英,楊敏.膠體金陰道滴蟲試紙條檢測陰道滴蟲的臨床評價〔J〕.臨床和實驗醫學雜志，2008,7(6):149-150.

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收稿日期2015-04-15

中圖分類號：R711.31

文獻標識碼：B

文章編號：1001-7585(2015)23-3267-03