石河子部分地區(qū)規(guī)模化奶牛場奶牛球蟲感染調(diào)查

蔣業(yè)慧，王正榮，張艷艷，薄新文

（新疆農(nóng)墾科學(xué)院新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)綿羊繁育生物技術(shù)重點實驗室，新疆 石河子832000）

奶牛球蟲病是艾美耳屬（Eimeria）的多種球蟲寄生于奶牛腸道上皮細(xì)胞內(nèi)引起的以出血性腸炎為特征的寄生蟲病。艾美耳屬的球蟲種類豐富，Levies報道有22種[1]，Pallerdy報道有25種[2]。邱氏艾美耳球蟲和牛艾美耳球蟲的致病性最為嚴(yán)重。該病主要危害21～180日齡以內(nèi)的犢牛，輕微感染影響犢牛的生長發(fā)育，但病情嚴(yán)重時，可導(dǎo)致嚴(yán)重腹瀉，甚至死亡。石河子墾區(qū)奶牛養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展，但奶牛球蟲病的防治卻沒有相應(yīng)的調(diào)查數(shù)據(jù)作為理論依據(jù)。為了解石河子地區(qū)奶牛球蟲感染與流行現(xiàn)狀，于2013年10-11月對石河子地區(qū)的6個規(guī)模化奶牛場奶牛球蟲病的流行現(xiàn)狀進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 樣品來源 采自石河子6個規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場，采樣奶牛的年齡為：0～3月齡、5～6月齡、1～2歲、2～3歲、3～5歲。直腸采集糞便50 g，置于一次性塑料手套中，并標(biāo)記地區(qū)、場名、奶牛標(biāo)號、年齡、體況，置于4℃冰箱中待檢。

1.2 樣品的處理 每份樣品取5 g，加入適量的飽和蔗糖水，以3 000 r/min離心5min，用4mm的吊環(huán)蘸取表面液膜并抖落于載玻片中央，覆蓋蓋玻片，顯微鏡下觀察，記錄結(jié)果。

1.3 球蟲卵囊的孢子化培養(yǎng)及蟲種鑒定 取5 g陽性糞便于適量的飽和蔗糖水中，以3 000 r/min離心10min，用直徑為1 cm的漏網(wǎng)，蘸取表面水膜，抖于另一個裝有適量自來水的離心管中，重復(fù)5次，以3 500 r/min離心10min，去上清。在沉淀物中加入適量2.5%重鉻酸鉀溶液，溶液高度不超過2mm，放置于28℃下培養(yǎng)，培養(yǎng)24 h之后，每6 h觀察鏡檢1次。根據(jù)孢子化所用的時間，卵囊的大小、形態(tài)、顏色等，參照圖譜進(jìn)行蟲種鑒定[3]。

1.4 感染強(qiáng)度的確定 采用麥克馬斯特法進(jìn)行感染強(qiáng)度的檢測[4]，取1 g糞便于離心管中，加入29 mL的飽和食鹽水，混勻，在計數(shù)室內(nèi)加滿液體，靜置2～3min，顯微鏡下觀察，記10×10方格內(nèi)的卵囊數(shù)，記兩次，取平均值乘以200，即為每克糞便中的卵囊數(shù)（OPG值）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同奶牛場的球蟲感染率與平均感染強(qiáng)度

被調(diào)查的6個規(guī)模化奶牛養(yǎng)殖場均存在球蟲感染（見表1），由此可見石河子地區(qū)存在奶牛球蟲感染，廣大養(yǎng)殖戶應(yīng)給予足夠的重視。

表1 不同奶牛場的球蟲感染率與感染強(qiáng)度

2.2 不同年齡奶牛球蟲感染率與感染強(qiáng)度 被調(diào)查的5個年齡段的奶牛均存在球蟲感染，但差異不顯著（P＞0.05）（見表2）。且5～6月齡、1～2歲的犢牛球蟲感染率最高。

表2 不同年齡奶牛球蟲感染率與感染強(qiáng)度

2.3 奶牛感染球蟲的疑似種類及形態(tài)描述

2.3.1 奧博艾美耳球蟲（Eimeria auburnensis） 卵囊為卵形，大小為（32～46）μm×（20～25）μm，平均大小為38.4μm×23.1μm。4個孢子囊呈長卵圓形，無外殘體，斯氏體不明顯。卵囊壁光滑、均勻、透明，淺灰棕色。孢子化時間，48～72 h（見圖1：a、b）。

2.3.2 牛艾美耳球蟲（Eimeria bovis） 卵囊為卵形，大小為（23～34）μm×（17～23）μm，平均大小為27.7μm×20.3μm。4個孢子囊呈長卵圓形，有內(nèi)殘體，斯氏體明顯，無外殘體和極粒，每個孢子囊內(nèi)含有兩個子孢子。卵囊壁光滑、均勻、透明，呈褐綠色。有卵膜孔。孢子化時間：48～72 h（見圖1：c、d）。

2.3.3 亞球艾美耳球蟲（Eimeria subspherica） 卵囊為亞球形，大小為（9～11）μm×（8～11）μm，平均大小為8.5μm×11μm。4個孢子囊呈橢圓形，無外殘體，斯氏體明顯。卵囊壁光滑、透明，無卵膜孔。孢子化時間，4～5 d（見圖1：e、f）。

2.3.4 邱氏艾美耳球蟲（Eimeria zuernii） 卵囊為橢圓形，大小為（15～22）μm×（13～18）μm，平均大小為17.8μm×15.6μm。4個孢子囊呈長卵圓形，無內(nèi)殘體，有斯氏體，無外殘體和極粒。卵囊壁薄、均勻、無色、無卵膜孔。孢子化時間24 h～48 h（見圖1：g、h）。

2.3.5 橢圓艾美耳球蟲（Eimeria ellipsoidalli） 卵囊為橢圓形，大小為（12～27）μm×（11～21）μm，平均大小16.9μm×13μm。4個孢子囊呈長卵圓形，有內(nèi)殘體和明顯的斯氏體，無外殘體和極粒。卵囊壁薄、均勻、透明，無卵膜孔。孢子化時間：48～72 h（見圖1：i、j）。

2.3.6 柱狀艾美耳球蟲（Eimeria cylindrce） 卵囊為狹窄的柱狀。大小為（16～27）μm×（12～15）μm,平均大小為23.3μm×13.3μm。4個孢子囊呈長卵圓形，有內(nèi)殘體，斯氏體明顯，無外殘體和極粒。卵囊壁薄、無色，無卵膜孔。孢子化時間為48～72 h（見圖1：k、l）。

圖1 各種疑似艾美耳球蟲卵囊形態(tài)

2.4 不同種類的球蟲在各個年齡段奶牛中的感染率 各個年齡段奶牛的優(yōu)勢蟲種略有差異：0～3月齡奶牛的優(yōu)勢蟲種為牛艾美耳球蟲和邱氏艾美耳球蟲；5～6月齡奶牛的優(yōu)勢蟲種為橢圓艾美耳球蟲和柱狀艾美耳球蟲；1～2歲奶牛的優(yōu)勢蟲種為牛艾美耳球蟲和橢圓艾美耳球蟲；2～3歲奶牛所感染的球蟲種類僅為2種，為亞球艾美耳球蟲和邱氏艾美耳球蟲；3～5歲奶牛的優(yōu)勢蟲種為亞球艾美耳球蟲、橢圓艾美耳球蟲和奧博艾美耳球蟲（見表3）。

表3 不同種類的球蟲在各個年齡段奶牛中的感染率

3 討論

奶牛球蟲感染在世界范圍內(nèi)十分普遍，且牛球蟲種類豐富。早在1992年，黃兵等報道我國存在16種可以感染牛的艾美耳球蟲[5]。在國外，Chibunda R T等早在1997年報道，在坦桑尼亞奶牛球蟲的感染率為35%，發(fā)現(xiàn)7個蟲種[6]。koutny H.報告，在澳大利亞被調(diào)查的牛場當(dāng)中有97.97%的牛場中存在球蟲的感染，樣品的陽性率高達(dá)83.67%，共檢出11種球蟲[7]。Hatice Cicek報道，在土耳其所調(diào)查的504個牛糞便排泄物當(dāng)中有20.04%的樣品中檢出11種牛球蟲卵囊[8]。本次調(diào)查共涉及石河子6個規(guī)模化奶牛場，各個奶牛場均存在奶牛球蟲感染，且共檢出6種艾美耳球蟲，這與劉繼榮[9]等報道石河子某奶牛場曾暴發(fā)過奶牛球蟲病，共同證明新疆北部存在奶牛球蟲的感染，但各個地區(qū)、各個牛場、各個年齡段奶牛所流行的奶牛球蟲種類及感染率有所差異。這可能與不同牛場的飼養(yǎng)管理條件差異有很大的關(guān)系。金蘭梅等[10]對江蘇部分地區(qū)的9個奶牛場進(jìn)行了球蟲感染調(diào)查，結(jié)果表明，9個奶牛場均有球蟲感染，感染率最高的為1～6月齡和6～12月齡的奶牛，大部分牛場的OPG值低于1 000個。石冬梅等報道河南奶牛球蟲的感染率為37.57%，共檢出11種奶牛球蟲[11]。對比各地區(qū)調(diào)查結(jié)果顯示，雖然新疆氣候干燥，晝夜溫差大，但依然存在較為嚴(yán)重的奶牛球蟲感染。為了降低奶牛球蟲對奶牛業(yè)的危害，各個奶牛場應(yīng)加強(qiáng)奶牛球蟲病的防控，做好疾病監(jiān)測，采用藥物預(yù)防，提高整體畜群的抵抗力。當(dāng)然本次調(diào)查只是對新疆石河子地區(qū)10-11月份奶牛球蟲的感染情況進(jìn)行調(diào)查，并未對奶牛球蟲全年的感染情況進(jìn)行監(jiān)測，同時調(diào)查的數(shù)量不是很多，故這一結(jié)果并不能反應(yīng)整個石河子地區(qū)全年奶牛球蟲感染情況。鑒于此，本課題組將進(jìn)一步擴(kuò)大樣品數(shù)量，并做全年的感染情況調(diào)查，全面掌握石河子地區(qū)奶牛球蟲流行規(guī)律，為制定合理的驅(qū)蟲方案提供理論依據(jù)。

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[3] 曹希亮，董輝，黃兵，等.奶牛球蟲流行病學(xué)調(diào)查研究[J].中國奶牛，2012，3：29-31.

[4]張曉東，石泉，蘇日那，等.呼和浩特市周邊地區(qū)奶牛球蟲病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國畜牧獸醫(yī)，2008，35（4）：65-67.

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[10]金蘭梅，伍清林，馬高民，等.江蘇部分地區(qū)奶牛球蟲病流行情況調(diào)查[J].家畜生態(tài)學(xué)報，2010，31（3）：69-74.

[11]石冬梅，陳益，王軍.河南省奶牛球蟲病流行病學(xué)調(diào)查[J].中國奶牛，2010（10）：51-53.