Ki-67和p53在乳腺癌中的表達及臨床意義

張書卿,張緒良,黃丹青

(黃石市中心醫院腫瘤外科，湖北 黃石 435000)

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Ki-67和p53在乳腺癌中的表達及臨床意義

張書卿,張緒良※,黃丹青

(黃石市中心醫院腫瘤外科，湖北 黃石 435000)

摘要：目的探討Ki-67和p53在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達及其與乳腺癌發生、發展的關系。方法選取2010年3月至2014年3月就診于黃石市中心醫院的乳腺癌患者100例,另外選取行乳腺良性腫瘤切除后的患者20例，采用免疫組織化學SP法檢測100例乳腺癌組織及20例正常乳腺組織中Ki-67和p53的表達，比較兩者在兩種不同組織中的表達情況。結果Ki-67在乳腺癌組織中的陽性表達率為76.0%(76/100)，正常乳腺組織中為15.0%(3/20)，組間比較差異有統計學意義(P<0.01)；p53在乳腺癌組織中的陽性表達率為82.0%(82/100)，正常乳腺組織為20.0%(4/20)，組間比較差異有統計學意義(P<0.01)；Ki-67的陽性表達率與腫瘤大小、臨床分期、淋巴結轉移密切相關，p53與腫瘤大小、淋巴結轉移、臨床分期無明顯關系。結論Ki-67和p53與乳腺癌的發生相關，Ki-67與乳腺癌患者的預后密切相關，通過檢測Ki-67的表達水平可預測乳腺癌患者的惡性程度，為臨床上治療乳腺癌提供一定的理論根據，同時通過檢測p53可以為臨床上診斷乳腺癌提供一定的參考。

關鍵詞：乳腺癌；正常乳腺組織；Ki-67；p53

乳腺癌為人類常見的惡性腫瘤，也是女性常見的惡性腫瘤之一，極大危害人類的健康，目前對于乳腺癌的治療方法包括手術、化療、放療，但仍有大量的乳腺癌患者治療后的生存率不高，主要原因是乳腺癌發生轉移或臨床分期較晚[1-2]。研究表明，Ki-67和p53與腫瘤的發生、發展及預后密切相關[3]。本研究通過檢測乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中Ki-67及p53表達情況，探討它們與乳腺癌發生、發展的關系。

1資料與方法

1.1一般資料選取2010年3月至2014年3月就診于黃石市中心醫院的乳腺癌患者100例，患者術后均經病理證實，均為女性，年齡42～70歲，平均(62±2)歲。根據選取患者的病理結果，腫瘤大小:腫瘤直徑<2 cm的10例，2～5 cm的58例，>5 cm的32例；淋巴結轉移：N062例，N118例，N216例，N34例；臨床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期35例，Ⅲ期46例。另外選擇20例行乳腺良性腫瘤切除后的患者作為對照，并且經病理檢查提示為正常乳腺組織，排除癌前病變等相關病變,均為女性，年齡41～63歲，平均(62±2)歲。

1.2實驗試劑Ki-67鼠抗人單克隆抗體購自北京中山生物制品有限公司(批號：Ki679801),p53鼠抗人單克隆抗體購自北京中山生物制品有限公司(批號:68723),S-P試劑盒購自福州市邁新生物技術開發有限公司(批號：SP30232),二氨基聯苯胺顯色試劑盒購自福州市邁新生物技術開發有限公司(批號:Z98036),其余免疫組織所需要的試劑由本院中心實驗室提供。

1.3實驗方法將所有手術后采集的標本固定于4%甲醛中，24 h內脫蠟，并編號，切片，然后依次采用烤片、脫蠟、水化、沖洗、抗原修復、4 ℃冰箱過夜、磷酸緩沖液、二氨基聯苯胺顯色、封片、閱片。陽性對照采用乳腺切片，陰性對照采用磷酸緩沖液。結果判斷：Ki-67定位于細胞質中，p53定位于細胞核中，少量位于細胞質中。結果的判斷由2名副主任醫師以上病理科醫師綜合判斷，若結果不統一時，由第 3位病理科醫師判斷。

1.4統計學方法應用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析。計數資料比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1Ki-67在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達情況Ki-67在顯微鏡下主要表現為細胞質中棕黃色染色物質，見圖1；Ki-67在乳腺癌組織中的陽性表達率為76.0%(76/100),明顯高于正常乳腺組織的15.0%(3/20)，差異有統計學意義(χ2=27.572，P<0.01)。

2.2Ki-67在乳腺癌組織中的表達情況及與臨床病理特征的關系Ki-67在乳腺癌組織中的陽性表達率與乳腺癌的腫瘤的大小、淋巴結轉移、臨床分期密切相關(P<0.05)，見表1。

圖1　Ki-67在乳腺癌組織中的表達(SP×200)

表1　Ki-67在乳腺癌組織中的表達情況及

2.3p53在乳腺癌組織及正常乳腺組織組織中的表達情況p53在顯微鏡下主要表現為細胞核中棕黃色染色物質，見圖2。p53在乳腺癌組織中的陽性表達率為82.0%(82/100),顯著高于正常乳腺組織的20.0%(4/20)，差異有統計學意義(χ2=31.551，P<0.01﹚。

圖2　p53在乳腺癌組織中的表達　(SP×200)

2.4p53在乳腺癌組織中的表達情況及與臨床病理特征的關系p53在乳腺癌組織中的陽性表達率與乳腺癌的腫瘤大小、淋巴結轉移、臨床分期無關(P>0.05)，見表2。

表2　p53在乳腺癌組織中的表達情況及與臨床病理特征的關系

3討論

目前大量研究表明，Ki-67和p53與腫瘤的發生、發展密切相關，Ki-67為增殖細胞核抗原，存在于細胞周期中除G0期外的所有階段，Ki-67在細胞的生理及病理性死亡的過程中占有非常重要的地位，因為當其作用被抑制時就會促進腫瘤的產生或加速腫瘤的發生[4-6]。本研究結果表明，Ki-67在乳腺癌組織中的陽性表達率明顯高于正常乳腺組織，這是因為在乳腺癌組織中Ki-67作為正常的凋亡因子發揮其應有的作用，但是當其作用受到抑制時，將會促進腫瘤的發生，因此在乳腺癌組織中其陽性表達率高，這與Montemurro等[7]的研究結果一致。本研究結果還顯示，隨著乳腺腫瘤的直徑增加、臨床轉移站數的增加、臨床分期越晚，其陽性表達率也越來越高，因此Ki-67的表達可以為乳腺癌患者的預后提供一定的參考，從而指導臨床醫師進行診治。

p53為發現較早的促進細胞凋亡的因子，即所謂的野生型p53，也就是細胞生長的負性調節因子，可以監視細胞的癌變發生，當細胞基因DNA發生突變時，其可以促進修復，從而達到防治癌變的目的。因此當p53發生突變時，其監視腫瘤的作用將退變，因此將會間接促進腫瘤的發生，也就是由抑癌基因變成了癌基因，從而促進正常細胞的轉化或加速已經轉化的細胞進一步惡化[8]。大量研究表明，在乳腺癌、直腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤中均發現了突變型p53基因的表達[9-11]。本研究結果顯示，p53在乳腺癌組織中的陽性表達率高于正常乳腺組織，差異有統計學意義(P<0.01)，這與相關報道的p53抑癌基因在腫瘤細胞的激活過表達相關[8]。本研究結果還顯示，p53在乳腺癌組織中的表達與乳腺癌的腫瘤大小、淋巴結轉移、臨床分期無關。

綜上所述，p53與乳腺癌的發生密切相關，但是與預后無明顯關系，可以認為Ki-67和p53與乳腺癌的發生、發展密切相關，可為臨床上治療乳腺癌提供一定的理論依據。

參考文獻

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Ki-67 and p53 Expression and Clinical Significance in Breast CancerZHANGShu-qing,ZHANGXu-liang,HUANGDan-qing.(DepartmentofGeneralSurgery,HuangshiCentralHospital,Huangshi435000,China)

Abstract:ObjectiveTo detect expression of Ki-67 and p53 in breast cancer tissue and normal breast tissue,and the relationship with the occurrence and development of breast cancer.MethodsA total of 100 cases with breast cancer admitted to Huangshi Central Hospital from Mar. 2010 to Mar. 2014 were included in the study,and another 20 cases with benign breast tumor after resection were also included,and immunohistochemistry SP method was adopted to test the Ki-67 and p53 expression of both groups and then compared.ResultsThe positive expression rate of Ki-67 of breast cancer tissue was 76.0%(76/100),of normal breast tissue tissue was 15.0%(3/20),the difference was significant (P<0.01).The positive expression rate of p53 of breast cancer positive was 82.0%(82/100),of normal breast tissue was 20.0%(4/20),the difference was statistically significant(P<0.01).Ki-67 expression level was closely associated with tumor size,clinical stage,lymph node metastasis,while there was no obvious correlation between p53 and tumor size,clinical stage,or lymph node metastasis.ConclusionKi-67 and p53 are associated with the onset of breast cancer,Ki-67 is closely associated with the prognosis of patients with breast cancer,by detecting the expression level of Ki-67 can predict the malignancy degree of breast cancer,and provide a theoretical basis for the clinical treatment of breast cancer,and p53 detection can provide a reference for the clinical diagnosis of breast cancer.

Key words:Breast cancer; Normal breast tissue; Ki-67; p53

收稿日期：2014-10-13修回日期：2015-02-07編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.18.051

中圖分類號：R73-37

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)18-3400-03