WADiana全自動配血系統在預輸血患者抗體篩查中的應用

宋雪冬 劉文國 郭長義 宋任浩

WADiana全自動配血系統在預輸血患者抗體篩查中的應用

宋雪冬①劉文國①郭長義①宋任浩②*

目的：探討WADiana全自動配血系統在患者不規則抗體篩查中的應用價值，了解本地區預輸血患者不規則抗體檢出率、分布特點以及對預輸血患者進行抗體篩查的意義。方法：采用微柱凝膠法對9842例預輸血患者進行不規則抗體篩查，篩查陽性者用譜細胞進一步做特異性鑒定。結果：①9842例預輸血患者檢出不規則抗體79例，陽性檢出率為0.80%，其中以Rh血型系統和MNSs血型系統多見，分別占41.77%和15.19%。非特異性抗體占25.32%，IgG類占68.35%；②女性患者檢出率為1.10%，男性患者檢出率為0.54%，女性高于男性，差異有統計學意義(x2=9.49，P＜0.01)。有輸血和(或)妊娠史的患者檢出率為1.38%，高于無輸血和(或)妊娠史患者的檢出率，差異有統計學意義(x2=43.82，P＜0.01)。結論：預輸血患者不規則抗體檢出率較高，在輸血前對其進行抗體篩查有助于血液選擇，對于保證輸血安全具有重要意義。

預輸血患者；不規則抗體；篩查; 自動配血系統

[First-author's address]Clinical Laboratory, The Fourth People's Hospital of Langfang City, Langfang 065700, China.

不規則抗體又稱意外抗體，指不符合ABO系統Landsteiner規則的血型抗體，是指抗-A、抗-B或抗-AB以外的其他抗體。不規則抗體可引起較為嚴重的溶血性輸血反應、造成輸血無效以及難以進行配合型輸血而延誤治療。因此，篩查不規則抗體，可避免預輸血患者輸入相應抗原的紅細胞以減少輸血反應、提高輸血療效，尤其是對于有輸血史和(或)妊娠史的患者而言，不規則抗體篩查是輸血管理的重要內容之一[1]。美國輸血協會規定輸血患者輸血前應檢測意外抗體，以減少可能發生的輸血反應[2]。為提高輸血的安全性，本研究采用WADiana全自動配血系統，對臨床預輸血患者進行不規則抗體的篩查，并對影響檢測結果進行分析總結，以確保臨床輸血安全和確認該系統在不規則抗體檢測中的應用效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年1月至2014年2月廊坊市第四人民醫院預輸血患者9842例，年齡2個月至89歲，平均年齡(45.23±40.17)歲。其中男性5306例，女性4536例；有輸血史3544例；有妊娠史1278例。以乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-Na2)抗凝管采集患者靜脈血3～5 ml，以2500 r/min離心8 min分離血漿，置于2～8 ℃冰箱保存，24 h內進行檢測。

1.2 儀器與試劑

使用WADiana全自動配血系統(西班牙Grifols公司)；微柱凝膠檢測卡、37 ℃恒溫孵育器及檢測卡離①廊坊市第四人民醫院檢驗科 河北 廊坊 065700②河北省血液中心檢驗科 河北 石家莊 050071 *通訊作者：songrenhao888@163.com心機(瑞士DiaMed公司)；Ⅰ～Ⅲ號抗體篩查細胞及抗體特異性鑒定譜細胞(美國IMMUCOR公司)。試劑均檢定合格并在有效期內使用。

1.3 檢測方法

標本的條碼讀取、稀釋和加樣以及檢測卡的孵育、離心和結果判讀均由全自動配血系統自動完成，檢測結果由機器自動傳輸到醫院信息系統(hospital information system，HIS)。按WADiana全自動配血系統操作規程進行操作。采用微柱凝膠法進行不規則抗體篩查和特異性鑒定。

1.3.1 抗體篩查

向檢測卡的Ⅰ～Ⅲ微柱孔中各加入50 μl受檢血漿，再分別加入Ⅰ～Ⅲ號抗體篩查細胞50μl，將檢測卡放入37 ℃孵育器中孵育15 min，取出后將檢測卡以1100 r/min離心9 min。判斷結果：紅細胞留在微管頂部，表示篩查細胞與相應的抗體發生凝集，判定為陽性；紅細胞沉在微管底部，表示篩查細胞未與相應的抗體發生凝集，判定為陰性。

1.3.2 特異性鑒定

將Ⅰ～Ⅲ號抗體篩查細胞改為1～10號抗體鑒定譜細胞，受檢血漿為抗體篩查陽性的患者血漿。操作步驟和結果判斷同上。受檢血漿與譜細胞均凝集判斷為非特異性抗體，受檢血漿與部分譜細胞凝集為特異性抗體。根據反應格局以及與相應抗原反應的陰陽性來判斷為何種抗體[3]。采用巰基試劑進行Ig類別鑒定[4]。

1.4 統計學方法

采用SPSS 13.0統計軟件進行數據統計與分析，計數資料采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不規則抗體檢出率

在9842例預輸血患者中檢出不規則抗體79例，陽性檢出率為0.80%，以Rh血型系統和MNSs血型系統多見，分別占41.77%(33/79)和15.19%(12/79)，非特異性抗體占25.32%(20/79)；79例不規則抗體大多為IgG類，占68.35%(54/79)。

2.2 不規則抗體分布情況

在檢出的不規則抗體中男性患者不規則抗體檢出率為0.54%(29/5306)，女性患者不規則抗體檢出率為1.10%(50/4536)，女性高于男性，差異有統計學意義(x2=9.49，P＜0.01)；有輸血和(或)妊娠史的患者不規則抗體檢出率為1.38%(67/4822)，高于無輸血和(或)妊娠史患者0.23%(12/5020)，差異有統計學意義(x2=43.82，P＜0.01)，見表1。

3 討論

WADiana全自動配血系統是基于微柱凝膠技術，利用計算機自動控制操作進行血型血清學試驗的自動化儀器[5]。該儀器擁有全自動高靈敏度檢驗免疫-血液學分析系統，通過一套整合、連續的程序來完成樣品及試劑的添加，可自動完成孵育、離心、判讀及凝塊檢測等功能。可連接實驗室信息系統(laboratory information system，LIS)或HIS，實現數據共享。具有操作簡單、方便及無攜帶污染等優勢。

表1 79例不規則抗體分布情況

本研究應用該儀器對臨床患者開展不規則抗體篩查，并根據美國輸血協會第十二版操作技術規范手冊將微柱凝膠法作為臨床血型相關檢測的推薦方法，對檢測結果進行分析總結。由于血型系統具有人群分布的多態性和復雜性，不規則抗體的發生頻率和特異性分布在國內外人群或同一地區不同群體中均有一定差別[6]。有文獻報道，通過常規方法進行不規則抗體篩查，不規則抗體陽性檢出率為0.3%～2%[7]。在美國輸血協會《全球的輸血標準及手冊》(第13版)的“輸血標準”中規定，對每一份交叉配血的血樣都應檢測針對紅細胞抗原的不規則抗體(抗體篩選及/或抗體鑒定)[8]。本研究中9842例輸血前患者不規則抗體檢出率為0.80%(79/9842)，與陳麗娟等[9]報道的0.75%陽性檢出率基本一致，略低于危艷順等[10]報道的1.00%檢出率，但高于劉開良等[11]報道的0.2%的檢出率。不規則抗體的檢出率除與地域、患者人群構成有關以外，還與篩查方法的敏感度有關。其中Rh血型系統產生的不規則抗體比例最高，占41.77%(33/79)，與王謙[12]、許基平等[13]的研究結果一致，顯然Rh血型系統的不規則抗體是引發免疫性溶血性輸血不良反應的主要不規則抗體。本研究結果顯示，在Rh血型系統中抗-E為18例，在Rh血型系統中占54.55%(18/33)，而抗-D僅為6例，占18.18%(6/33)。

通常漢族人群D抗原陽性率較高，抗-D的發生頻率本應較高，但因我國在臨床上較早采用D抗原相容性輸血，患者輸血免疫產生的抗-D比例顯著下降，故Rh-D陽性而Rh-E陰性輸血患者可能引起輸血不良反應的情況應該引起足夠的重視，是否有必要采用E抗原相容性輸血值得進一步探討。本研究結果還顯示，僅次于Rh血型系統產生不規則抗體最多的為MNSsU血型系統，其中大部分為IgM類，在體內一般不會引起免疫性反應，但在低溫麻醉狀態時，可激活補體，發生溶血反應。79例不規則抗體68.35%(54/79)為IgG類，提醒不規則抗體大多是由于免疫產生，其檢測方法應包括鹽水介質法和非鹽水介質法，以避免漏檢。篩查陽性的輸血患者，必須應用鑒定譜細胞做抗體特異性鑒定，輸入無相應抗原的血液，才能保證輸血的安全。

本研究結果表明，有輸血和(或)妊娠史患者的不規則抗體檢出率高于無輸血和(或)妊娠史患者，與以往多項調查[10-13]結果相符。婦女在妊娠過程中，當胎兒的紅細胞上有同種異型抗原時可導致孕婦產生不規則抗體；輸血產生臨床療效的同時也使患者增加了接觸異型抗原的機會，因此產生抗體的機會增加。有研究顯示，因多次輸血產生不規則抗體的概率為15%～20%[14]。不規則抗體的發生頻率還存在著性別差異，男性患者不規則抗體檢出率為0.54%(29/5306)，女性患者不規則抗體檢出率為1.10%(50/4536)，女性患者的檢出率高于男性。這與女性患者在妊娠或流產等生理或非生理等因素影響下機體受免疫刺激有關，且同時存在著輸血和妊娠雙重免疫機會，故女性的不規則抗體檢出率較高[15]。因此，對有輸血史和妊娠史的患者，尤其是有妊娠史的反復輸血的患者進行不規則抗體篩查具有更為重要的意義。

綜上所述，預輸血患者不規則抗體檢出率較高，在輸血前對輸血患者進行不規則抗體篩查，有助于血液的選擇，可避免輸入含有相應抗原的血液，對于保證患者的輸血安全和提高輸血療效具有重要意義。

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Research on applied value of WADiana automated blood analysis system in screening of irregular antibody in pre transfusion patients/

SONG Xue-dong, LIU Wen-guo, GUO Chang-yi, et al//
China Medical Equipment,2015,12(12):100-102.

Objective:To discuss the application value of WADiana automated blood analysis system in irregular antibody screening, and understand the detection rate and distribution characteristics of irregular antibody among pre transfusion patients in our region and explore the meaning of antibody screening for pre transfusion patients.Methods:Nine thousand eight hundred and forty two cases of pre transfusion patients in our hospital were carried irregular antibody screening by using the micro column gel method, the positive specimens was made further identification by using specific spectrum cells.Results:(1)79 cases of irregular antibodies were detected in 9842 patients with pre transfusion and positive detection rate of 0.803%, among them Rh system and MNSs system were account for 41.77%(33/79) and 15.19% (12/79) respectively, nonspecific antibodies account for 25.32%(20/79), most of of irregular antibodies were IgG class, accounted for 68.35%(54/79).(2)The detection rate was 1.102%(50/4536) in female, and 0.547%(29/5306) in male, that in female were higher (x2=9.49, P＜0.01). The detection rate in patients with a history of blood transfusion/ pregnancy was 1.389%(67/4822), and higher than the rate in patients with no history of blood transfusion/pregnancy (x2=43.82, P＜0.01).Conclusion:The detection rate of irregular antibody among pre transfusion patients in our region is higher, the antibody screening before blood transfusion would help the blood to choose, and is of great significance to ensure the safety of blood transfusion.

Pre transfusion patients; Irregular antibody; Screening; Automated blood analysis system

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2015.12.032

1672-8270(2015)12-0100-03

R457.13

A

2015-05-13

宋雪冬,男,(1972- ),本科學歷，副主任檢驗師。廊坊市第四人民醫院檢驗科，從事醫學檢驗工作。