復方鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸的制備*

宦立娟，鄭春麗，樊麗雅，劉建平**，朱家壁中國藥科大學藥物制劑研究所，南京 0009；內蒙古科技大學包頭醫學院藥學院，包頭 04060

復方鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸的制備*

宦立娟1，鄭春麗1，樊麗雅2**，劉建平1**，朱家壁1
1中國藥科大學藥物制劑研究所，南京 210009；2內蒙古科技大學包頭醫學院藥學院，包頭 014060

目的：制備復方鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸，并考察制劑體外釋放特性。方法：利用底噴式流化床包衣設備，以空白丸芯、羥丙基甲基纖維素、單硬脂酸甘油酯、Eudragit NE30D、Eudragit L100-55等制備鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸；羥丙基甲基纖維素等制備鹽酸吡格列酮胃溶微丸。結果：制備的鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸在腸液中緩慢釋放12 h，鹽酸吡格列酮胃溶微丸在人工胃液中30 min溶出85%以上。結論：優選出的復方鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸的制備工藝簡單易行，重現性好，有望應用于工業化生產。

鹽酸二甲雙胍；腸溶緩釋微丸；鹽酸吡格列酮；累積釋放度；流化床包衣

復方緩控釋制劑對于慢性疾病的治療具有重要的意義。以鹽酸二甲雙胍和鹽酸吡格列酮為模型藥物，研究制備了復方鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸。鹽酸二甲雙胍主要通過降低肝及外周組織對胰島素的敏感度來降低血糖水平；鹽酸吡格列酮是一種高選擇性過氧化酶體增殖活化受體γ（PPARγ）激動劑，通過提高胰島素的敏感性來控制血糖水平[1]。臨床研究結果表明，在單獨使用二甲雙胍血糖控制不佳時，與吡格列酮聯合用藥，作用集中在代謝缺陷，更有效控制血糖，并減少低血糖的發生；且鹽酸吡格列酮和鹽酸二甲雙胍在糖尿病治療機制上具有良好的互補性，將兩種藥物進行聯合用藥，可以進一步優化藥物的治療效果[2]。鹽酸二甲雙胍的生物半衰期較短，約2～3 h，成人一日需要服用2～3次，且因其口服劑量較大，服藥后易產生一定程度的不良反應，主要表現為胃腸道不良反應（如惡心、嘔吐、食欲減退等）。本實驗根據鹽酸二甲雙胍的特點制成腸溶緩釋制劑，使鹽酸二甲雙胍在胃中不釋放，減少了對胃的刺激等副作用，使制劑進入小腸后才緩慢釋藥。將上述兩種藥物通過速釋加緩釋結合的手段、即制備鹽酸吡格列酮胃溶微丸和鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸，以保證定位快速起效，持續作用。

本實驗采用空白丸芯流化上藥并包薄膜衣的方法制備了鹽酸二甲雙胍腸溶緩釋微丸、鹽酸吡格列酮胃溶微丸。兩種微丸以在不同pH條件下的溶出為評價指標，對其進行處方工藝研究，為進一步的臨床研究和應用奠定了基礎。

1 材 料

1.1 儀器

UV-2102PC紫外可見分光光度計 （尤尼柯，上海儀器有限公司）；小型流化床包衣機（沈陽藥科大學制藥廠）；ZRS-4型智能溶出儀（天津大學無線電廠）；BS124S型分析天平 （德國Sartorious公司）；BT100-2J型恒流泵（保定蘭格恒流泵有限公司）；85-1B型磁力攪拌器（鞏義市予華儀器有限責任公司）。

1.2 試藥與試劑

鹽酸二甲雙胍 （西安綠郡生物科技有限公司，批號20130401）；空白丸心 （30～35目，Microcrys-tallinecellulosespheres，上海卡樂康包衣技術有限公司）；鹽酸吡格列酮 （武漢勝天宇生物科技有限公司，批號140102）；羥丙甲纖維素E5（HPMC E5，美國卡樂康公司）；丙烯酸樹脂（Eudragit NE 30D，上海德固賽輔料公司）；歐巴代腸溶材料 （Eudragit誖L100-55，美國卡樂康公司）；檸檬酸三乙酯（TEC，上海晶純試劑有限公司）；單硬脂酸甘油酯（GMS，上海試四赫維化工有限公司）；吐溫-80（國藥集團化學試劑有限公司）；無水乙醇（國藥集團化學試劑有限公司）。所用輔料均為藥用級。

2 方 法

2.1 鹽酸二甲雙胍（MH）腸溶緩釋微丸的制備

2.1.1 MH載藥微丸的制備 采用底噴流化床包衣機對空白丸芯上藥，制備MH含藥微丸。原料藥研磨過100目篩。配5%的HPMC-E5水溶液為粘合劑。稱取空白丸芯10 g置流化床包衣裝置中，稱取處方量的藥物溶于HPMC-E5水溶液中，持續攪拌條件下進行流化上藥。控制溫度37～40℃，霧化壓力0.08～0.1 MPa，鼓風頻率29.5 Hz，噴液流速0.8～1.2 r·min-1。所制藥丸于40℃流化干燥30 min。

2.1.2 MH緩釋微丸的制備 將去離子水加熱至70℃，加入處方量的吐溫-80（tween-80，乳化劑）、單硬脂酸甘油酯（GMS，抗粘劑）攪拌至溶解完全后，室溫下不斷攪拌冷卻，緩慢倒入攪拌狀態下的Eudragit NE 30D中，配成聚合物含量為10%的緩釋包衣液[3]。包衣工藝：進風溫度20～25℃；霧化壓力0.1 MPa；鼓風頻率29.5 Hz；噴液流速1.2～1.5 r· min-1。緩釋微丸與于25℃流化干燥1 h。

2.1.3 MH腸溶緩釋微丸的制備 稱取處方量的歐巴代腸溶材料（型號為93f19255），用4倍量的去離子水攪拌溶解，使之配成固含量為20%的腸溶包衣液。將配制的包衣液經80目篩網過濾，以防粗顆粒堵塞噴槍頭。將MH緩釋微丸置于流化床中包腸溶衣。包衣厚度以緩釋微丸增重計。通過考察不同包衣增重的腸溶緩釋微丸在0.1 mol·L-1的人工胃液中2 h耐酸情況來確定包衣增重。包衣工藝：進風溫度30～35℃，霧化壓力0.08～0.1 MPa，鼓風頻率29.6 Hz，噴液流速1.0～1.2 r·min-1。腸溶緩釋微丸于40℃流化干燥0.5 h。

2.2 鹽酸吡格列酮（PGH）速釋微丸的制備

溶解度結果顯示，鹽酸吡格列酮的溶解度隨著pH的增大呈遞減趨勢，當pH=1時，其為微溶性藥物。因此將空白丸芯外包微粉化后的PGH含藥層可實現其在胃中的速釋。稱取空白丸芯5 g，置流化床包衣裝置中，原料藥經氣流粉碎機進行微粉化預處理，以進一步降低活性成分鹽酸吡格列酮的粒度，增加其溶出速率。PGH屬于水不溶性藥物，可將羥丙基甲基纖維素（HPMC-E5）加入乙醇中，充分攪拌，加入藥物和適量水再攪拌均勻，制成藥物的混懸液。在持續攪拌狀態下流化上藥。采用流化床底噴包衣技術進行包衣。底物采用30～35目的空白丸芯。包衣溫度設計為40℃，鼓風頻率為29.5 Hz，霧化壓力保持在0.08～0.1 MPa，噴液流速控制在1.0～1.3 r·min-1。

2.3 MH腸溶緩釋微丸的含量測定

將腸溶緩釋微丸置研缽中研細，精密稱取適量微丸粉置100mL量瓶中，加pH6.8 PBS超聲溶解并定容，搖勻，過濾，精密吸取續濾液1 mL至25 mL量瓶中，以pH 6.8 PBS定容，搖勻，作為供試品溶液。另取鹽酸二甲雙胍對照品適量，精密稱定，同法配制成對照品溶液，于232 nm處測定供試品溶液的吸光度AT，對照品溶液的吸光度AS，通過公式MH%計算腸溶緩釋微丸中MH的含量。

WS表示MH對照品的量，mg；WT表示MH微丸的量，mg；AS表示MH對照品的吸光度；AT表示微丸中MH的吸光度。

2.4 PGH胃速釋微丸的含量測定

精密稱取適量PGH微丸置25 mL量瓶中，加0.1 mol·L-1鹽酸溶液超聲溶解并定容，搖勻，過濾，精密吸取續濾液1 mL至10 mL量瓶中，以0.1 mol· L-1鹽酸溶液定容，搖勻，作為供試品溶液。另取鹽酸吡格列酮對照品適量，精密稱定，同法配制成對照品溶液，于268 nm處測定供試品溶液的吸光度AT，

對照品溶液的吸光度AS，通過公式100%，計算微丸中PGH的含量。

WS表示PGH對照品的量，mg；WT表示PGH微丸的量，mg；AS表示PGH對照品的吸光度；AT表示微丸中PGH的吸光度。

2.5 釋放度的測定

2.5.1 MH腸溶緩釋微丸的釋放度測定 取自制MH腸溶緩釋微丸，依照釋放度測定法（《中國藥典》2010年版二部附錄XD第二法），以pH 1.0（0.1 mol·L-1）鹽酸溶液675 mL為溶劑,在（37.0±0.5）℃、100 r·min-1條件下，2 h后向溶出杯中加入預熱至37℃的0.2 mol·L-1磷酸鈉溶液225 mL[4]，分別于0、1、2、4、6、8、10、12 h取溶液5 mL，濾過得續濾液，并及時補充相同體積的溶出介質，精密吸取續濾液1 mL至25 mL量瓶，以pH 6.8 PBS介質定容，搖勻，依照紫外分光光度法，在232 nm波長處測定吸光度，分別計算不同時間的累積釋放度。

2.5.2 PGH胃速釋微丸的溶出度測定 取自制PGH胃速釋微丸，依照溶出度測定法（《中國藥典》2010年版二部附錄XC第三法），以250 mL的pH 1.2鹽酸（0.1 mol·L-1）溶液為溶出介質，在（37.0± 0.5）℃、100 r·min-1條件下，依法操作。分別于5、10、15、30、45、60 min取溶液5 mL，濾過得續濾液，并及時補充相同體積的溶出介質，依照紫外分光光度法，在268 nm波長處測定吸光度，分別計算不同時間的累積釋放度。

3 結 果

3.1 MH載藥微丸的處方確定

采用流化床底噴上藥法制備含藥丸芯，考察了粘合劑用量對空白丸芯上藥率的影響。結果見表1。

表1 MH含藥微丸粘合劑濃度的確定

HPMC-E5為常用粘合劑，其濃度大小對含藥微丸收率有很大影響，故分別考察 1%、3%、5% HPMC-E5對微丸收率的影響。由表1可知，當藥液中不加粘合劑時，上藥率太低；粘合劑固含量為5%時，上藥率為73.8%，而大于5%時包衣液較粘稠，包衣困難。因此本實驗選擇5%HPMC-E5作為MH含藥層的粘合劑。但是此上藥率仍偏低，在實際生產中可考慮采用離心造粒或擠出滾圓法制得MH含藥微丸。而后考察了此含藥微丸在去離子水中溶出情況，結果見圖1。

圖1 MH含藥微丸在去離子水中溶出曲線

結果表明，含藥微丸在3 min內能溶出99%以上，表示粘合劑不影響含藥微丸的溶出。

3.2 MH緩釋層包衣增重的確定

按照“2.1.2”項下的包衣液處方和包衣工藝參數，制備了幾種不同緩釋層增重的緩釋微丸，其在去離子水中溶出情況如圖2所示。考察發現，緩釋層增重10%的微丸釋放90%以上只需2 h，增重20%的微丸緩釋6 h，增重30%的微丸緩釋8 h，增重40%的微丸緩釋12 h，增重45%、50%的微丸前2 h出現明顯的時滯現象，尤其是增重50%時，1 h釋放0.9%，2小時釋放4.5%。可見釋藥速率與衣膜厚度成反比。實驗設計成緩釋12 h的緩釋微丸，故選取增重為40%的緩釋層。

圖2 不同緩釋層增重在去離子水中釋放曲線（n=3）

3.3 釋放介質對MH緩釋微丸釋放的影響

通過計算相似因子（f2）考察釋放介質的pH對MH緩釋微丸釋放曲線的影響。MH緩釋微丸在0.1 mol·L-1的鹽酸溶液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液中的釋放曲線和其在去離子水中釋藥曲線相比無顯著性差異，f2分別為93.3和88.5。從圖3可以看出，釋放介質的pH對MH緩釋微丸的釋放度無明顯影響。

圖3 不同釋放介質中MH緩釋微丸的釋藥曲線（n=3）

3.4 MH緩釋微丸釋藥機制的研究

以去離子水為釋放介質，100 r·min-1實驗條件下得到的最優處方體外釋放數據進行零級動力學、一級動力學、Higuchi方程和Hixson-Crowell方程擬合，結果見表2。

擬合結果表明，自制的鹽酸二甲雙胍緩釋微丸體外釋放接近于Higuchi動力學模型。藥物膜控微丸的釋放機制主要有:藥物通過連續的包衣膜的溶解/擴散；增塑劑通道釋藥機制；通過水性孔道的擴散和滲透壓驅動的釋放[5]。根據包衣材料Eudragit NE 30D的特性，其屬于中等滲透性水不溶的緩釋包衣材料。推測制備的膜控微丸通過包衣膜的擴散主要通過水性孔道的擴散和滲透壓驅動的釋放。這與Eudragit NE 30D在水中不溶，但是能溶脹，在包衣中形成孔道，與第三種釋藥途徑、藥物經膜上的孔道釋藥理論相符。

3.5 腸溶緩釋微丸耐酸力測定

取本品不同增重腸溶微丸，參照美國FDA相關標準，照釋放度測定法，采用溶出度測定第二法裝置，以pH 1.0（0.1 mol·L-1）鹽酸溶液675 mL為溶劑，在（37.0±0.5）℃、100 r·min-1條件下，2 h后向溶出杯中加入預熱至37℃的0.2 mol·L-1磷酸鈉溶液225 mL，分別于 0、1、2、4、6、8、10、12 h取溶液 5 mL，濾過得續濾液，并及時補充相同體積的溶出介質[5]，精密吸取續濾液1 mL至25 mL量瓶中，在232 nm波長處測定吸光度，計算0 h釋放度。見圖4。

結果表明，腸溶層增重為20%及30%的腸溶緩釋微丸在0.1 mol·L-1鹽酸溶液中2 h的釋放度大于或接近10%，腸溶層增重為40%的腸溶緩釋微丸與增重為20%及30%的微丸相比，在0.1 mol·L-1鹽酸溶液中2 h的釋放度小于10%，本實驗根據在酸性溶液中耐酸力好，在PBS 6.8中緩釋行為無影響的基礎上，選擇包衣增重為40%。

圖4 腸溶緩釋微丸2 h內在pH 1.0中累積釋放度（n=3）

3.6 PGH胃速釋微丸的溶出

結果表明PGH含藥微丸在30min內能溶出85%以上，見圖5。

圖5 鹽酸吡格列酮含藥丸在pH 1.0中溶出曲線（n=3）

4 討 論

4.1 制備了一種由鹽酸吡格列酮和鹽酸二甲雙胍組成的復方微丸制劑，其主要包含MH腸溶緩釋微丸、PGH胃速釋微丸。

4.2 微丸的包衣方法有流化床包衣、離心造粒包衣等，本實驗中考慮到處于處方篩選階段，所用的微丸量小，且由于本實驗采用的是水分散體包衣液，對物料溫度控制要求較高，所以選擇流化床進行包衣。

4.3 通過對流化床投料量與鼓風量、噴槍噴霧壓力、包衣液噴液流速及包衣溫度的考察，確定了流化法制備復方微丸的的工藝條件。

4.4 鹽酸二甲雙胍生物半衰期短，且對胃有刺激作用。本實驗根據鹽酸二甲雙胍的特點制成腸溶緩釋制劑，使鹽酸二甲雙胍在胃中不釋放，減少了對胃的刺激等副作用，使制劑進入小腸后才緩慢釋藥。

4.5 鹽酸二甲雙胍為水溶性藥物，且實驗所用包衣材料均為水分散體，為避免藥物在緩釋衣層中遷移，因此包緩釋衣層時開始物料溫度稍高，噴液速度慢些，包衣液在微丸表面快速成膜形成阻止層[7]。

[1] 中國人民解放軍第150中心醫院.一種復方鹽酸二甲雙胍鹽酸吡格列酮緩釋微丸制劑的組配方法：中國，201310374946.X[P].2013-12-18.

[2] 林巧平，李 薇，山莽挺.鹽酸吡格列酮/鹽酸二甲雙胍緩釋片的體內外評價[J].中國新藥雜志，2014，23（2）：154-60.

[3] 趙 鐵，張 偉，何仲貴，等.鹽酸青藤堿緩釋微丸的研制[J].中國醫院藥學雜志，2008，28（5）：360-2.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].北京：中國醫藥科技出版社，2010：1039-40.

[5] 蘇 龍，劉志東，吳保祥，等.司他夫定緩釋微丸膠囊的制備與體外釋放度考察 [J].中國新藥雜志，2007，16（16）：1279-82.

[6] 連燕飛，鄭春麗，朱家璧，等.鹽酸青藤堿腸溶緩釋微丸的制備[J].藥學與臨床研究，2013，21（3）：218-20.

[7] 劉冬梅.鹽酸二甲雙胍緩釋膠囊研究[R].黑龍江大學，2006：62-2.

Preparation of Compound Metformin Hydrochloride Enteric-coated and Sustained-release Pellets*

HUAN Li-juan1,ZHENG Chun-li1,FAN Li-ya2**,LIU Jian-ping1**,ZHU Jia-bi1
1Pharmaceutical Research Institution,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009;2Baotou Medical College,Inner Mongolia University of Science and Technology,Baotou 014060

Objective:To develop the compound metformin hydrochloride enteric-coated and sustainedrelease pellets and also to study its in vitro drug release.Methods:The fluid-bed coating equipment was used to prepare pellets.The metformin hydrochloride enteric-coated and sustained-release pellets were pre-pared with Eudragit NE30D,Eudragit L100-55,HPMC-E5and glycerylmonostearate(GMS).HPMC-E5was used to prepare pioglitazone hydrochloride pellets.Results:The prepared metformin hydrochloride entericcoated and sustained-release pellets in vitro slowly released for 12 hours.The pioglitazone hydrochloride pellets dissolved more than 85%in the artificial gastric juice in 30 minutes.Conclusions:We prepared the preferred preparation of compound metformin hydrochloride enteric-coated and sustained-release pellets. The preparing process is simple and reproducible.It can be used in industrial production.

Metformin hydrochloride;Sustained-release pellets;Pioglitazone hydrochloride;Cumulative release;Fluid-bed coating

R944.9；TQ460.6

A

1673-7806（2015）02-119-04

江蘇省普通高校研究生科研創新計劃項目（CXZZ13_0327）

宦立娟，女，碩士生 E-mail:huanlijuan2008@126.com

* *通訊作者劉建平，女，教授，博士生導師E-mail:jianpingliu1293@163.com樊麗雅，女，講師 E-mail:421590064@qq.com

2014-11-26

2014-12-11