半枝蓮黃酮類有效部位體內抗腫瘤實驗研究

竇錦明，荊漢衛山東濰坊市中醫院，濰坊 604；山東濰坊市食品藥品檢驗所，濰坊 605

半枝蓮黃酮類有效部位體內抗腫瘤實驗研究

竇錦明1，荊漢衛2
1山東濰坊市中醫院，濰坊 261041；2山東濰坊市食品藥品檢驗所，濰坊 261205

目的：探討半枝蓮黃酮類有效部位（HSB-FEP）體內抗腫瘤活性。方法：先制備HSB-FEP；以S180、U14、EAC、HepA實體瘤小鼠模型進行體內實驗，評價HSB-FEP的200、50 mg·kg-1對各實體瘤的生長抑制作用及對體重、抑瘤率、胸腺指數、脾臟指數等的影響。結果與結論：體內試驗表明，與模型組比較，高劑量組能明顯抑制S180、U14、EAC、HepA實體瘤生長，平均抑制率分別為33.87%、39.89%、37.60%、46.29%，胸腺、脾指數顯著升高。

半枝蓮；黃酮類；抗腫瘤；S180；U14；EAC；HepA

半枝蓮為唇形科多年生草本植物半枝蓮（Scutellaria barbata D.Don）的干燥全草。具有抗腫瘤等活性[1]。本實驗以半枝蓮黃酮類（HSB-FEP）對腫瘤細胞株增殖抑制作用研究，具有一定的科研意義。

1 材 料

1.1 藥材

半枝蓮購于山東濰坊海王中藥飲片有限公司（批號：20120825），經濰坊市藥檢所鑒定確認。

1.2 實驗動物和瘤株

昆明種小鼠♂，體重（20±2）g，200只，山東中醫藥大學實驗動物中心 〔SCXK（魯）20090002〕提供。S180、U14、EAC、HepA瘤株，山東省醫學科學院藥物所腫瘤室提供。

1.3 儀器和試劑

FA1204B型電子天平（上海精密科學儀器廠）。環磷酰胺（CTX，批號：13112021，江蘇恒瑞制藥廠）。

2 方 法

2.1 HSB-FEP的制備[2]

取半枝蓮10 kg，粗碎，80%乙醇回流提取3次，200目藥篩過濾，合并濾液，減壓濃縮至2.0 g·mL-1。選用聚酰胺柱，用水洗脫，20%乙醇洗脫，70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮，干燥即得HSBFEP 0.453 kg，得率4.53%，4℃保存備用。

2.2 對小鼠移植性腫瘤的實驗研究

2.2.1 S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠模型建立[3]

分別取傳代7天S180、U14、EAC、HepA瘤源小鼠，抽無菌腹水（活細胞數大于95%），稀釋成2×107/mL細胞懸液，右前腋皮下接種0.2 mL懸液，制備S180、U14、EAC、HepA實體瘤模型。

2.2.2 實驗動物分組及給藥 分別取S180、U14、EAC、HepA荷瘤小鼠各40只，稱重，隨機分4組：模型組（ig等體積水）、CTX組（ip 20 mg·kg-1，隔日1次）、HSB-FEP高、低劑量組（ig 200、50 mg·kg-1，每日1次）。用水配制懸濁液CTX 1.0 mg·mL-1、HSBFEP 10 mg·mL-1（相當于原藥材220.8 mg·mL-1），連續給藥10 d。末次給藥后處死動物，剝離瘤塊，稱瘤重，計算抑瘤率。同時分離胸腺和脾臟，精密稱重，計算胸腺指數、脾臟指數，計算公式：

抑瘤率（%）=（模型組平均瘤重－給藥組平均瘤重）/模型組平均瘤重×100%

臟器指數（mg·g-1）=臟器重量（mg）/體重（g）

2.3 統計學方法

實驗數據經SPSS11.0軟件處理，進行組間t檢驗，以均數±標準差（±s）表示。

3 結 果

3.1 HSB-FEP對各組荷瘤小鼠瘤重及體重影響

各組荷瘤小鼠接種6天后，觀察到模型組實體瘤，荷瘤小鼠逐漸出現運動減少、毛發枯燥、消瘦。CTX組實體瘤生長不明顯。HSB-FEP高劑量組實體瘤比模型組小。結果如表1所示。與模型組瘤重比較CTX組、HSB-FEP高劑量組（S180 P＜0.05，U14、EAC、HepA P＜0.01）能明顯抑制實體瘤生長；與CTX組瘤重比較，HSB-FEP高劑量組（S180、EAC、HepA P＜0.05，U14 P＜0.01）抑瘤效果較好。

表1 HSB-FEP對各組荷瘤小鼠的抑制作用

3.2 HSB-FEP對各組荷瘤小鼠臟器指數影響

表2所示，與模型組比較，CTX組胸腺、脾臟指數顯著降低（P<0.01），各給藥組無差異；與CTX組比較，HSB-FEP高劑量、低劑量組均能顯著提高胸腺、脾臟指數（S180、U14、EAC、HepA均P<0.01），表明它能調節機體免疫功能。

4 討 論

本實驗選用S180、U14、EAC、HepA實體瘤模型研究HSB-FEP體內抗腫瘤活性，發現HSB-FEP高劑量組抑瘤率 S180為 33.87%、U14為 39.89%、 EAC為37.60%、HepA為46.29%，均達到中藥療效評價中規定的指標[4]，表明有抗腫瘤活性。HSB-FEP高劑量組胸腺、脾臟指數增加，有良好的調節機體免疫作用，通過改善荷瘤機體的免疫功能低下狀態而發揮抑瘤活性；但其抑瘤作用機理，有待深入研究。

表2 HSB-FEP對各組荷瘤小鼠臟器指數的影響結果

[1] 蔡震峰，任風蓮，申定珠．中草藥半枝蓮的研究進展[J]．廣州化學，2006，31（4）：55．

[2] 姚新生.天然藥物化學[M].4版.北京：人民衛生出版社，2003：150-2.

[3] 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實驗方法學[M].3版.北京：人民衛生出版社，2002：1786.

[4] 韓 銳.抗癌藥物研究與實驗技術[M].北京：北京醫科大學、中國協和醫科大學聯合出版社，1997：271-2.

Study on In-vivo Antitumor Activity of the Flavonoids Effective Parts from Scutellaria barbata D.Don

DOU Jin-ming1,JIN Han-wei2
1Weifang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Weifang 261041;2Weifang Institute for Food and Drug Control,Weifang 261205

Objective:To study the in-vivo antitumor effect of the flavonoids effective parts from Scutellaria barbata D.Don(HSB-FEP).Methods:HSB-FEP were prepared.In in-vivo mice models of S180,U14,EAC and HepA solid tumors were established.HSB-FEP at 200 and 50mg·kg-1were given in tumor-bearing mice to evaluate the effects on solid tumor growth,body weight,spleen index,thymus index,tumor mass weight and the rates of tumor inhibition.Results and Conclusion:The results of in-vivo experiments showed that tumor growth(S180,U14,EAC and HepA)were apparently inhibited by HSB-FEP at 200mg·kg-1with inhibitory rates of 33.87%,39.89%,37.60%and 46.29%;spleen index and thymus index were significantly increased by HSB-FEP.

Scutellaria barbataD.Don;Flavonoids;Antitumor;S180;U14;EAC;HepA

R965.1

A

1673-7806（2015）01-021-02

竇錦明，男，專業方向：中藥制劑、抗腫瘤藥理研究E-mail:doujinming83@163.com

2014-08-18

2014-08-29