原發性肺腺癌組織中COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23的表達變化及意義

張愛麗，孫蕾娜，張丹丹，王文普(天津港口醫院，天津300456;天津醫科大學附屬腫瘤醫院)

原發性肺腺癌組織中COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23的表達變化及意義

張愛麗1，孫蕾娜2，張丹丹1，王文普1
(1天津港口醫院，天津300456;2天津醫科大學附屬腫瘤醫院)

摘要:目的觀察環氧合酶2(COX-2)、表皮生長因子受體(EGFR)、血小板衍生生長因子受體(PDGFR)和轉移抑制基因23(nm23)蛋白在原發性肺腺癌中的表達變化，探討其與臨床病理因素的關系。方法應用免疫組化S-P法檢測COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白在109例原發性肺腺癌組織和30例正常肺組織中的表達。結果COX-2、EGFR、PDGFR蛋白在肺腺癌組織中的陽性率分別為78.0%、58.7%、74.3%，均顯著高于正常肺組織(P均＜0.05)。nm23蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為60.6%，顯著低于正常肺組織(P＜0.05)。COX-2蛋白的表達與肺腺癌患者的年齡相關(P＜0.05); EGFR蛋白的表達與患者的年齡、淋巴結轉移及TNM分期相關(P均＜0.05); nm23蛋白的表達與淋巴結轉移及TNM分期相關(P均＜0.05)。肺腺癌組織EGFR和nm23、PDGFR和nm23的表達均呈負相關(r =－0.448，P＜0.05; r =－0.432，P＜0.05)，EGFR和PDGFR的表達呈正相關性(r = 0.403，P＜0.05)。結論在肺腺癌組織中，COX-2、EGFR、PDGFR表達升高，nm23蛋白表達降低，綜合檢測上述指標在判斷腫瘤的惡性程度、估計預后等方面具有一定價值。

關鍵詞:肺腫瘤;環氧合酶2;表皮生長因子受體;血小板衍生生長因子受體;轉移抑制基因23doi: 10.3969/j.issn.1002-266X.2015.37.022

原發性肺癌的發病率在全球實體腫瘤中排名第一，亦居癌癥相關死亡的首位［1］。肺腺癌約占原發性肺癌的45%，其起病隱匿、侵襲性強、預后差。隨著分子生物學研究的不斷深入，發現肺癌的發生、發展及轉移是一個多階段、多步驟、漸進演化的過程，這一過程與癌基因及其產物緊密聯系。我們檢測了表皮生長因子受體(EGFR)、環氧合酶2(COX-2)、血小板衍生生長因子受體(PDGFR)和轉移抑制基因23(nm23)在肺腺癌組織中的表達，探討其與原發性肺腺癌臨床病理因素之間的關系。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集天津醫科大學附屬腫瘤醫院2010年8月～2013年12月手術切除的109例肺腺癌患者的標本，其中患者男45例、女64例，年齡32～87歲、中位年齡62歲;有淋巴結轉移者41例，無轉移者68例。按照國際抗癌聯盟2009年肺癌分期標準分期，Ⅰ期34例、Ⅱ期39例、Ⅲ期36例。患者術前均未接受任何抗腫瘤治療。取遠離腫瘤的正常肺組織30份作為對照。

1.2組織COX-2、EGFR、PDGFR和nm23的檢測采用免疫組化S-P法。所有標本經10 %中性

甲醛固定，常規脫水后石蠟包埋，4 μm厚連續切片，HE常規染色和免疫組化染色。采用主要試劑有COX-2、EGFR、PDGFR和nm23，均購自北京中杉金橋生物技術有限公司，免疫組織化染色方法和步驟嚴格按試劑盒說明書進行，分別用PBS代替一抗作空白對照，已知陽性切片作陽性對照，光鏡下觀察HE染色切片和免疫組化染色切片。

1.3結果判定COX-2和nm23陽性信號定位于細胞質，EGFR和PDGFR陽性信號定位于細胞膜和(或)細胞質。根據其陽性細胞比例和染色強度進行陽性細胞評分:腫瘤細胞無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;陽性細胞數＜25%為1分，25%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分;上述2項得分相乘得出總分:0分為－，1～4分為+，5～8分為+ +，9～12分為+ + +。

1.4統計學方法采用SPSS17.0統計軟件。數據以百分比表示，比較采用χ2檢驗。相關性檢驗應用Spearman相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1肺腺癌組織及正常肺組織COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白表達比較COX-2和nm23陽性著色在細胞質，EGFR和PDGFR陽性著色在細胞膜和(或)細胞質。COX-2、EGFR、PDGFR蛋白在肺腺癌組織中的陽性率分別為78.0%(85/109)、58.7%(64/ 109)、74.3%(81/109)，在正常肺組織中的表達分別為16.7%(5/30)、26.7%(8/30)、53.3%(16/30)，兩組織各指標比較，P均＜0.05。nm23蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為60.6%(66/109)，顯著低于正常肺組織93.3%(28/30)(P＜0.05)。

2.2肺腺癌組織COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白的表達與臨床病理因素的關系見表1。

表1　肺腺癌組織COX-2、EGFR、PEGFR、nm23蛋白的表達與臨床病理因素的關系

2.3肺腺癌組織中COX-2、EGFR、PDGFR和nm23蛋白表達的相關性肺腺癌組織中EGFR和nm23、PDGFR和nm23蛋白的表達均呈負相關性(r分別為－0.448、－0.432，P均＜0.05)，EGFR和PDGFR蛋白的表達呈正相關(r =0.403，P＜0.05)。COX-2蛋白的表達和EGFR、nm23、PDGFR之間均無相關性(r分別為－0.086、0.069、0.042，P均＞0.05)。

3　討論

COX-2是前列腺素合成過程的重要限速酶，為誘導性酶，在大多數細胞中不表達或少量表達。當細胞受到細胞因子、生長因子和致癌物等刺激時，表達上調，并參與炎癥和腫瘤的形成和發展。據文獻［2、3］報道，COX-2蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為31.3%～55%。Turk等［3］對非小細胞肺癌的研究發現，COX-2蛋白在肺癌中的表達與肺癌分期、組織學類型、預后無關，COX-2不是肺癌的一個獨立的預后因素。本研究發現，COX-2蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為78.0%，顯著高于正常肺組織中的表達，且僅與肺腺癌患者的年齡相關，與患者的性別、腫瘤大小、分化程度、淋巴結轉移及TNM分期無關，提示COX-2可能參與肺腺癌發生的早期階段，而與肺腺癌的轉移和預后無關。

EGFR是一種細胞膜表面的糖蛋白受體，具有酪氨酸激酶活性，在多種上皮性腫瘤高表達。在正常肺組織中EGFR蛋白的陽性率很低，在肺腺癌組織中的陽性率為68.4%～88.2%［4～6］。Liang等［5］對133例肺腺癌標本的免疫組化研究表明，EGFR蛋白的表達與患者的性別、年齡、吸煙狀況、淋巴結轉移與否以及分期無關。而時衍同等［6］認為，EGFR蛋白高表達與組織學分級低分化、淋巴結轉移及腫瘤高分期有關。本研究中，EGFR蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為58.7%，顯著高于正常肺組織，且與淋巴結轉移和高分期相關，表明EGFR蛋白的表達上調可能促進腫瘤的發生、發展和轉移，EGFR蛋白的陽性表達提示預后不良。

PDGFR是酪氨酸蛋白激酶家族成員，是一種跨膜糖蛋白，能夠促進血管生成和細胞的分裂與增殖，在機體生長發育、創傷修復等生理過程中起著極其重要的作用。Donnem等［7］研究結果表明PDGFR蛋白在腫瘤細胞中高表達預示著預后不良，而在間質細胞中高表達預示著較好的預后，認為PDGFR抑制劑用于非小細胞肺癌的治療時應綜合考慮各種因素。本研究中，PDGFR蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為74.3%，顯著高于正常肺組織中的表達，而與患者的性別、年齡、腫瘤大小、分化程度、淋巴結轉移及TNM分期均無相關性，表明PDGFR可能參與肺腺癌發生的早期階段，但與肺腺癌的預后無直接關系。

nm23基因是目前研究較多的轉移抑制基因，該基因缺失、突變或功能喪失會促進腫瘤發生和轉移。Liu等［8］通過對452例Ⅰ期非小細胞肺癌組織進行免疫組化染色，發現nm23蛋白的陽性率為70.8%，認為nm23是估計預后的一個重要且獨立的生物學指標。Goncharuk等［9］對53例肺腺癌和51例肺鱗癌進行免疫組化檢測，發現nm23-H1蛋白的表達缺失與非小細胞肺癌的高分期、遠處轉移呈正相關，但與淋巴結轉移無關。本研究結果顯示，nm23蛋白在肺腺癌組織中的陽性率為60.6%，顯著低于正常肺組織，且與無淋巴結轉移和低分期相關，表明nm23可能抑制肺腺癌的發生、發展和轉移，可以作為肺腺癌患者預后較好的一個指標。

本研究發現，肺腺癌組織中EGFR和nm23、 PDGFR和nm23的陽性表達均呈負相關性，提示EGFR、PDGFR與轉移抑制基因nm23之間的表達失平衡是原發性肺腺癌發生、發展的原因之一。EGFR 和PDGFR的表達呈正相關性，表明EGFR、PDGFR在肺腺癌的發生、發展中可能起協同作用。

腫瘤的發生、侵襲及轉移是多個因素相互作用的復雜過程，多個因素相互促進，共同增強腫瘤的侵襲和轉移能力。本研究表明，COX-2、EGFR、PDGFR 和nm23均與原發性肺腺癌的發生和發展密切相關，并具有協同作用，它們的綜合檢測在判斷腫瘤的惡性程度、估計預后及指導臨床治療等方面具有一定價值。

參考文獻:

［1］Jemal A，Bray F，CentermM，et al.Global cancer statistics［J］.CA Cancer J Clin，2011，61(2): 69-90.

［2］Kim SJ，Rabbani ZN，Dong F，et al.Phosphorylated epidermal growth factor receptor and cyclooxygenase-2 expression in localized non-small cell lung cancer［J］.Med Oncol，2010，27(1): 91-97.

［3］Turk HM，Camci C，Sevinc A，et al.Cyclooxygenase-2 expression is not amarker of poor survival in lung cancer［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2012，13(1): 315-318.

［4］Ping W，Xia C，Fu S，et al.Immunohistochemistry with a novelmutation-specificmonoclonal antibody as a screening tool for the EGFR L858Rmutational status in primary lung adenocarcinoma ［J］.Tumour Biol，2015，36(2): 693-700.

［5］Liang Z，Zhang J，Zeng X，et al.Relationship between EGFR expression，copy number andmutation in lung adenocarcinomas［J］.BMC Cancer，2010，10: 376.

［6］時衍同，潘麗，王剛平，等.EGFR、VEGF及Ki-67在肺浸潤性腺癌和微浸潤性腺癌及浸潤前病變組織中的表達及意義［J/ CD］.中華臨床醫師雜志(電子版)，2013，7(22): 9883-9889.

［7］Donnem T，Al-Saad S，Al-Shibli K，et al.Prognostic impact of platelet-derived growth factors in non-small cell lung cancer tumor and stromal cells［J］.J Thorac Oncol，2008，3(9): 963-970.

［8］Liu C，Liu J，Wang X，et al.Prognostic impact of nm23-H1 and PCNA expression in pathologic stage I non-small cell lung cancer ［J］.J Surg Oncol，2011，104(2): 181-186.

［9］Goncharuk VN，del-Rosario A，Kren L，et al.Co-downregulation of PTEN，KAI-1，and nm23-H1 tumor/metastasis suppressor proteins in non-small cell lung cancer［J］.Anndiagn Pathol，2004，8(1): 6-16.

收稿日期:( 2015-06-30)

文章編號:1002-266X(2015)37-0057-03

文獻標志碼:B

中圖分類號:R734.2