蜂斗菜素誘導骨髓瘤RPMI 8226細胞凋亡及其機制

岳海源，任冬青，王東萍，雷栓虎，齊 進，汪玉良

（1．蘭州大學第二醫院骨科，甘肅省骨關節疾病重點實驗室，甘肅蘭州 730030；2．甘肅省人民醫院麻醉科，甘肅蘭州 730000；3．甘肅省人民醫院血液科，甘肅蘭州 730000）

多發性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是血液系統常見的惡性腫瘤，盡管對骨髓瘤的生物學研究和臨床治療技術有了較大進展，但對MM的臨床治療仍是醫學界一大難題。蜂斗菜素是藥食兩用植物蜂斗菜的提取物，研究表明蜂斗素能夠誘導腫瘤細胞凋亡，發揮抗腫瘤活性［1-2］。蜂斗菜素是否能抑制骨髓瘤，通過何種途徑起作用目前尚未見報道。為尋求新的能有效治療MM的藥物，我們采用骨髓瘤RPMI 8226細胞，研究了蜂斗菜素的抗MM作用及其相關的分子機制，以期為蜂斗菜素應用于臨床抗骨髓瘤提供實驗依據。

1 材料與方法

1．1 細胞系 骨髓瘤RPMI 8226細胞株購自中國科學院上海細胞庫，實驗前從液氮中取出培養。

1．2 藥品試劑 蜂斗菜素（含量≥98%，批號：20130321，西安天瑞生物技術有限公司）；RPMI-1640培養基，臺盼藍染色檢測試劑盒，Caspase抑制劑Z-VAD-FMK購自碧云天生物研究所；TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒，Hoechst 33258染色液購自武漢博士德生物制品有限公司；p-ERK，p-MEK，p-p38抗體（鼠抗人）均購自美國 CST公司；Caspase-3、8、9（鼠抗人）抗體購自美國Santa Cruz公司。

1．3 主要儀器 二氧化碳培養箱（美國SIM公司）；CJ-2F超凈工作臺（蘇州馮氏實驗動物設備有限公司）；尼康80i熒光顯微鏡（日本尼康）；FACS Calibur型流式細胞儀（美國BD公司）

1．4 方法

1．4．1 細胞培養 骨髓瘤 RPMI 8226細胞用含100 mL／L胎牛血清、100U／mL青霉素和100μg／mL鏈霉素的RPMI-1640培養基，于37℃、50mL／L CO2條件下培養，常規方法消化、傳代。處于對數生長期細胞用于實驗。……