RNA結合蛋白La對宮頸癌細胞侵襲轉移的影響及其機制

陳 茜，陳昆侖，劉 韡，李 牧，高 慶

（西安交通大學醫學部第二附屬醫院：1．婦產科；2．普通外科，陜西西安 710004）

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤，世界范圍內居女性癌癥相關死亡病因的第2位［1］。其中轉移復發是引起患者死亡的最主要原因［2］。癌癥細胞的侵襲轉移是一個多種因素參與的復雜過程，包括癌癥細胞從原發部位脫離，通過分泌基質金屬蛋白酶等分子降解細胞外間質，穿透血管和淋巴管管壁，最后到達遠處形成新的腫瘤［3］。雖然關于宮頸癌侵襲轉移的研究很多，但至今為止人們對宮頸癌細胞侵襲轉移的具體機制尚未完全明確。

La蛋白（La）是一種在多種細胞中廣泛分布、主要表達于細胞核的RNA結合蛋白，多數研究認為其能夠在細胞質和細胞核中自由穿梭發揮重要功能［4-7］。研究發現，La蛋白在多種腫瘤細胞中發揮重要作用，如宮頸癌和頭頸部腫瘤［8］。但其在宮頸癌侵襲轉移的作用尚未見文獻報道。

本研究為了探討La蛋白在宮頸癌侵襲轉移中的作用，通過RNA干擾技術構建穩定表達shRNA的宮頸癌細胞株HeLa，利用劃痕實驗和Transwell小室檢測了La蛋白對宮頸癌細胞侵襲轉移的影響，并利用 Western blot和明膠酶譜的方法檢測La對宮頸癌細胞侵襲轉移的影響及其可能機制。

1 材料與方法

1．1 主要試劑 La-shRNA重組質粒、陰性對照（negative control，NC）重組質粒由上海吉瑪制藥有限公司構建；HeLa細胞株購自ATCC（美國組織培養保藏中心）；La蛋白抗體（Abcam，美國）；MMP-2，TIMP-2蛋白抗體（Cell Signal，美國）；β-actin單抗（Santa Cruz，美國）；脂質體lipofectamine2000（Invitrogen，美國）；G418（Sigma，美國）；ECL化學發光試劑盒（Pierce，美國）；DMEM 培養基；……