G蛋白偶聯的內整流型鉀通道在哮喘模型大鼠肺組織的表達

楊旭東，寧啟蘭，蔣曉剛，孫青竹，劉 莉，韓 燕，張富軍，王慧蓮

（西安交通大學醫學部遺傳學與分子生物學系，陜西西安 710061）

過敏性哮喘是一種常見的Th2細胞介導的支氣管過敏性炎癥性疾病［1］。目前尚無治療哮喘的有效方法，但近年來過敏性哮喘在我國的發病率卻呈不斷上升的趨勢，深入研究哮喘的發病機制對于建立更有效的治療方法具有重要意義［2］。大量研究顯示，多種外向型鉀通道在哮喘氣道炎癥、氣道高反應性以及氣道重塑等病理生理過程中均發揮重要的作用，被視為治療哮喘的藥物靶點［3］。而G蛋白偶聯的內整流鉀通道（G protein-coupled inwardly rectifying potassium channel，GIRK）可在被活化的G蛋白釋放的Gβγ復合物激活后產生內向電流，對于膜電位的恢復具有重要意義［4］。研究發現，GIRK通道在正常的氣道上皮細胞表面表達［5］。G蛋白偶聯受體廣泛參與了哮喘的病程［6］，并且組胺、乙酰膽堿等多種可引發氣道異常收縮的神經遞質也都可激活GIRK［7-8］。因此，我們推測GIRK通道與哮喘也有密切的聯系。為了驗證假說，我們檢測了E3大鼠哮喘模型肺組織中構成GIRK的各種亞基表達水平的變化，及受到IL-4刺激的氣道上皮細胞中GIRK通道表達的變化。

1 材料與方法

1．1 實驗動物與試劑 成年健康E3大鼠，雌雄各半，共16只，體質量160～200g，由西安交通大學醫學部遺傳學與分子生物學系提供。卵清蛋白（ovalbumin，OVA）和硫酸鋁鉀（aluminium potassium sulfated）由Sigma公司提供；小鼠抗大鼠IgE重鏈抗體和辣根過氧化物酶標記的小鼠抗大鼠λ鏈κ鏈抗體由 AbD Serotec公司提供；抗 GIRK1和GIRK3的抗體由Bioworld公司提供；辣根過氧化物酶標記抗兔抗體和IL-4由博奧森公司提供。……