大鼠彌漫性軸索損傷后高遷移率族蛋白1的動態表達及其對神經細胞凋亡的影響

龐宏剛，宋錦寧，李丹東，孫 鵬，趙永林，黃廷欽，翟海程，安吉洋

（西安交通大學醫學部第一附屬醫院神經外科，陜西西安 710061）

彌漫性軸索損傷（diffuse axonal injury，DAI）是腦外傷患者重要的死亡原因，但是其具體機制仍不清楚。近來研究證實，在DAI后軸索損傷部位存在明顯的小膠質細胞活化，IL-1、IL-6和TNF-a等炎癥因子表達顯著升高［1-2］，證明炎癥反應在DAI后腦損傷中起著重要作用。探索DAI后炎癥誘導機制是目前DAI研究亟需解決的關鍵問題。高遷移率族蛋白1（high mobility group box-1，HMGB-1）是病理情況下誘導多種炎癥因子表達的上游激活分子。在動物研究中已證實腦缺血或蛛網膜下腔出血后腦組織中HMGB-1的水平明顯升高，并且抑制HMGB-1可以顯著減輕缺血后炎癥反應，改善預后［3-5］。腦外傷的臨床研究中也發現，患者外周血清中HMGB-1的水平明顯升高，并且與預后明顯相關［6］。上述研究結論均證實，作為重要的炎性分子，HMGB-1可能是DAI后導致腦組織炎性損傷的重要潛在機制。但是，DAI后腦組織中HMGB-1的表達水平及分布的動態變化目前還不清楚，也未見國內外相關研究報道。因此，本研究采用瞬時機械旋轉制作大鼠DAI模型，通過免疫組化、Western blot、RT-PCR等方法全面測定DAI后腦組織中HMGB-1的表達，并采用TUNEL觀察DAI后細胞凋亡水平，探討HMGB-1在DAI后腦組織損傷中的作用機制，為臨床治療DAI提供靶點。

1 材料與方法

1．1 實驗動物和試劑 雄性健康成年Sprague-Dawley大鼠84只，體質量280～300g，由西安交通大學醫學部實驗動物中心提供（許可證號：SCXK（陜）2007-001）。采用隨機數表法將實驗大鼠隨即分為正常組（12只）和DAI組6h、1、3、7d組各18只，共84只。……