VEGF-C在食管鱗癌組織中的表達及臨床意義

劉衛梅

VEGF-C在食管鱗癌組織中的表達及臨床意義

劉衛梅

目的 檢測血管內皮生長因子C(VEGF-C)在食管正常上皮、食管上皮非典型增生及食管鱗狀細胞癌(鱗癌)組織中的表達, 探討VEGF-C與食管鱗癌發生、淋巴結轉移和發展的相互聯系。方法 采用免疫組織化學S-P法檢測25例正常食管、70例食管鱗狀上皮非典型增生、55例食管鱗癌組織中VEGF-C的表達。結果 VEGF-C在正常食管鱗狀上皮、食管鱗狀上皮非典型增生及食管鱗癌組織中的表達依次增高, 差異有統計學意義(P＜0.05), 無淋巴結轉移的食管癌組織中VEGF-C的陽性表達明顯低于有淋巴結轉移病例(P＜0.05), VEGF-C在低分化鱗癌組織中的表達明顯高于中高分化鱗癌組織(P＜0.05), 但與臨床分期無關。結論 VEGF-C蛋白表達與食管鱗癌發生、發展及淋巴轉移有關。

食管癌；血管內皮生長因子C；免疫組織化學；腫瘤發生發展；轉移

食管癌是我國許多地區, 特別是華北地區最常見的惡性腫瘤之一, 發病率隨年齡的增長不斷升高, 腫瘤細胞的擴散和轉移是腫瘤致死的主要原因, 新生淋巴管和血管的生成是腫瘤轉移的依靠, 淋巴管生成受VEGF-C的影響［1］, 在腫瘤淋巴結轉移中起非常重要的作用。本文應用免疫組化S-P法檢測VEGF-C在食管正常上皮、食管上皮非典型增生及食管鱗狀細胞癌組織中的表達情況, 目的在于探討其在食管癌發生、轉移和發展中的重要意義, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院病理科2012年3月～2014年3月手術切除標本150例, 患者年齡41～82歲, 平均年齡56.8歲。術前均沒有放療和化療, 其中食管正常上皮25例, 食管上皮非典型增生70例(輕度非典型增生18例, 中度非典型增生24例, 重度非典型增生28例), 食管鱗狀細胞癌組織55例,臨床Ⅰ期食管鱗癌病例13例, 臨床Ⅱ期30例, 臨床Ⅲ期9例,臨床Ⅳ期3例；組織病理分級：6例高分化.15例中分化.34例低分化.30例無淋巴結轉移.25例有淋巴結轉移。

1.2 試劑 兔抗人VEGF-C多克隆抗體、DAB顯色劑、S-P試劑盒均購于武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 方法 免疫組化步驟 ：腫瘤組織標本經10%中性福爾馬林固定, 常規石蠟包埋, 切片厚度為3 μm, 脫蠟、水洗, 滴加一抗、二抗, DAB顯色, 蘇木素復染, 中性樹膠封片, 以已知抗體陽性組織作為陽性對照, 用PBS替代一抗作陰性對照。

1.4 判定標準 VEGF-C蛋白在癌細胞胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性, 細胞核著色無意義, 低倍鏡下(×100)分別選取VEGF-C密度最高癌細胞陽性區域, 計數10個視野中的500個癌細胞, 以細胞陽性數占腫瘤細胞數的百分率來表示, 陽性細胞數≥10%為陽性［2］。

1.5 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件對數據進行統計分析。計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；相關性采用線性相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 VEGF-C在食管正常上皮、食管上皮非典型增生及食管鱗狀細胞癌組織中的表達 VEGF-C陽性標記是棕色顆粒定位于食管癌細胞或食管非典型增生細胞的胞漿中, 陽性對照有明顯的陽性標記, 陰性對照沒有陽性標記。

2.2 VEGF-C與食管鱗狀細胞癌發生、進展的聯系 隨著食管病變的進展(正常-非典型增生-癌), VEGF-C的陽性表達率顯著增高, 食管正常鱗狀上皮表達呈陰性, 食管鱗狀上皮輕-中度非典型增生陽性率為2.4%(1/42), 食管鱗狀上皮重度非典型增生陽性率為32.1%(9/28), 鱗癌組織陽性率為45.5%(25/55), 差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.3 VEGF-C陽性表達與食管鱗狀細胞癌淋巴結轉移的聯系 無淋巴結轉移組VEGF-C陽性表達率33.3%(10/30)明顯低于有淋巴結轉移組60.0%(15/25), 差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.4 VEGF-C表達與食管鱗狀細胞癌分期及分級的聯系 高分化鱗癌6例中陽性反應1例, 中分化鱗癌15例中陽性反應4例, 低分化鱗癌34例中陽性反應20例。VEGF-C表達與食管癌的分級呈負相關(P＜0.05), VEGF-C在不同分期的食管鱗癌患者中表達(陽性表達：Ⅰ期6例, Ⅱ期14例, Ⅲ期4例,Ⅳ期1例)差異無統計學意義(P＞0.05), 表明VEGF-C的表達與臨床分期無關。

3 討論

1996年Joukov等［3］克隆并分離出VEGF-C, Skobe等［4］研究發現它可以使腫瘤內部和腫瘤周圍組織有新的淋巴管形成, 且可以增加淋巴轉移能力, 本文采用免疫組化S-P法分別檢測了食管正常上皮、食管上皮非典型增生和食管鱗癌中的表達, 發現食管正常上皮及食管上皮非典型增生陽性表達率明顯低于食管鱗癌組織, 表達程度隨腫瘤的惡性程度增加而增高, 表明它在食管鱗癌發展過程中起關鍵作用, 實驗發現VEGF-C表達與食管鱗癌分期無關, 與分化程度呈負相關,中高分化組中陽性表達率明顯低于低分化組, 表明其有癌分化抑制的作用, 且表達與淋巴轉移緊密聯系, 有淋巴結轉移組陽性表達明顯高于無淋巴結轉移組。本實驗中無淋巴結轉移組中有10例表達陽性, 淋巴結轉移和組織分化程度是食管鱗癌患者的兩個重要預后因素, 為食管癌患者預后的重要生物學指標, 抑制腫瘤生長最有效的治療是抑制血管的生成,但惡性腫瘤主要是通過淋巴管擴散, 本試驗在食管鱗癌組織標本中基因表達增強, 可通過阻滯其表達, 從而使淋巴管的生成受到抑制并且促進癌細胞凋亡, 從而抑制癌細胞的局部浸潤及淋巴結轉移, 對其通路抑制可為食管鱗癌的治療提供新途徑。

［1］ Niki T, Iba S, Tokunou M, et al. Expression of vascular endothelial growth factorA, B, C and D and their relationships to lymph node status in lung adenocarcinoma. Clin Cancer Res.2000.6(6):2431-2439.

［2］ Tang RF, Itakura I, Aikawa T, et al. Over expression of lymphangiogenic growth factor VEGF-C in human pancreatic cancer. Pancreas.2001.22(3):258-292.

［3］ Joukov V, Pajusola K, Kaipainen A, et al. A novelvascularendothelial growth factor, VEGF-C, is a ligand for the Flt4(VEGFR-3) and KDR (VEGFR-2) receptor tyrosine kinases. EMBO J.1996.15(2).290-298.

［4］ Skobe M, Hawighorst T, Jackson DG, et al. Induction of tumor limp angiogenesis by VEGF-C promotes breast cancermetastasis. Nat Med.2001.7(2):192-198.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.35.019

2015-06-01］

454001 河南省焦作市第二人民醫院病理科