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不同檢驗方法對慢性肝病的檢驗結果影響探討

2015-01-31 11:02:16劉欣
中國繼續醫學教育 2015年30期
關鍵詞:實驗法方法

劉欣

不同檢驗方法對慢性肝病的檢驗結果影響探討

劉欣

目的 探究分析不同的檢驗方法對于慢性肝病檢查結果的影響。方法 以我院在2013年1月~2014年1月間收治的108例慢性肝病的患者為觀察對象,分別采用膠體金層析法、PCR檢測法以及免疫電子發光實驗法檢測患者血清,統計并分析三種方法的肝病陽性檢出率。結果 膠體金層析法對于慢性肝病的陽性檢出率為73.15%,PCR檢測法的檢出率為94.44%,免疫電子發光實驗法的檢出率為84.26%。對比可知,PCR檢測法對于慢性肝病的檢出率叫其他兩種方法高,且差異顯著(P<0.05)。結論 PCR檢測法對于慢性肝病的檢出率高,且特異性強,敏感性高,對于臨床上對慢性肝病的早期具有重要的診斷價值。

慢性肝病;膠體金層析法;PCR檢測法;免疫電子發光實驗法

筆者以我院在2013年1月~2014年1月收治的108例慢性肝病患者為觀察對象,探究分析了不同的檢驗方法對于慢性肝病檢查結果的影響,現總結報道如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

以我院在2013年1月~2014年1月收治的108例慢性肝病患者為觀察對象,其中男性68例,女性40例,年齡25~75歲,平均年齡(42.2±3.5)歲。本組患者不包含HBV攜帶者和HAV等其他肝炎病毒感染的重癥患者,且所有患者的診斷符合2005年頒布的慢性乙肝的防治指南。

1.2 檢測方法

1.2.1 膠體金層析法 首先制備膠體金,用蒸餾水溶解氯金酸,并使其濃度在0.01%左右。取100 ml液體,加熱至沸騰后,加入1.0 ml 1%的檸檬酸三鈉,繼續加熱,直至液體顏色由白色變為藍色最終變為紅色,說明膠體金溶液已制備好,將溶液放置冷卻。在測試條上鋪勻IgM抗體,將其與硝酸纖維素膜和吸水濾紙重疊放置[1-2],并粘在白色的塑料片上。將患者的血清用生理鹽水按1:10稀釋,然后將測試條加樣端沒入血清中,5~10min后觀察結果。若為紅色“+”則為陽性,若為紅色“-”則為陰性,若無顯示紅色說明測試失敗應重新檢測。

1.2.2 PCR檢測法 取待檢樣本100 μl加入核酸提取液A100 μl,混勻后離心:13 000 r/min,15min。棄上清液再加入25μl核酸提取液B,混勻加熱:100℃,10min,離心:13 000 r/min,2min。根據取樣的量分別取18 μlhBV-cDNA反應液、3 μl氯化鎂、2 μl Taq酶和3 μl熒光探針加入離心管中,混勻并離心,按照每管26 μl的量分裝。將樣本和標準品分別加入反應管中,混勻并放在熒光PCR儀中進行PCR擴增反應:50℃下1min,94℃下5min,93℃下30 s,60℃下1.5min,以上述溫度和時間循環40次。當結果顯示的D值小于38時,則為陽性。

1.2.3 免疫電子發光實驗法 使用美國雅培公司生產的AX-SYM及其相關試劑、標準品對所取的樣品進行檢測。

1.3 統計學分析

采用SPSS 17.0軟件處理實驗數據,計量資料使用(x-±s)表示,計數資料使用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

對比分析本組108例患者通過膠體金層析法、PCR檢測法以及免疫電子發光實驗法三種檢測方法的慢性肝病的檢出率,結果顯示:使用膠體金層析法檢測的陽性患者數有79例,則其檢出率為73.15%;使用PCR檢測法檢出的陽性患者有102例,則其檢出率為94.44%;使用免疫電子發光實驗法檢出的陽性患者91例,則其檢出率為84.26%。由此可知,PCR檢測法對于慢性肝病的檢出率較其他兩種方法高,且差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

慢性肝病的發病率逐年上升,嚴重威脅著人們的身體健康和生活質量[3],臨床上對于慢性肝病的檢測方法較多。近年來,隨著分子生物學的發展,PCR檢測法逐漸應用于慢性肝病的檢測中[4],其利用病毒的部分DNA片段在體外進行擴增,并聯合使用電泳技術,具有方便、快捷以及特異性強、敏感性高等特點,但其在慢性肝病檢測中具體效果尚不十分明確。為探究分析不同的檢驗方法對于慢性肝病檢查結果的影響,本文以我院108例慢性肝病的患者為觀察對象,分別采用膠體金層析法、PCR檢測法以及免疫電子發光實驗法檢測患者血清,統計并分析三種方法的肝病陽性檢出率,結果顯示:膠體金層析法對于慢性肝病的陽性檢出率為73.15%,PCR檢測法的檢出率為94.44%,免疫電子發光實驗法的檢出率為84.26%。對比可知,PCR檢測法對于慢性肝病的檢出率叫其他兩種方法高,且差異顯著(P<0.05)。

綜上所述,PCR檢測法對于慢性肝病的檢出率高,且特異性強,敏感性高,對于臨床上對慢性肝病的早期具有重要的診斷價值。

[1]李國文.慢性肝病伴糖代謝異常48例臨床分析[J].山西醫藥雜志,2012,41(2):25.

[2]周瀟.幾種檢驗方法對慢性肝病的檢驗結果分析[J].中國醫藥指南,2012,10(12):16-17.

[3]石亮.慢性肝病患者血清中的診斷指標臨床意義探討[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(1):56.

[4]黃平.不同檢驗方法對慢性肝病的檢驗結果分析[J].臨床內科雜志,2012(1):23.

Different Inspection Methods Affect the Test Result of the Chronic Liver Disease

LIU Xin, Taiping People's Hospital, Harbin 150050, China

Objective To explore the analysis of different test methods for the infuence of chronic liver disease results. Methods From January 2013 to January 2014, 108 cases of chronic liver disease patients were taken as observation object, respectively using colloidal gold chromatography, PCR assay and the serum in patients with immune electron emitting experiment method and statistics and analysis of the three methods of liver positive detection rate.Results Colloidal gold chromatography for chronic liver disease positive detection rate of 73.15%, the PCR test detection rate of 94.44%, immune electron emitting experimental method detection rate of 84.26%. Comparison shows that the PCR assay for the detection rate of chronic liver disease is high, the other two methods and has a significant difference (P<0.05). Conclusion PCR assay for the detection rate of chronic liver disease is high, and strong specifcity, high sensitivity, it has important diagnostic value of chronic liver disease for early clinical effect.

Chronic liver disease, Colloidal gold chromatography, PCR assay, Immune electron emitting experimental method

R575

A

1674-9308(2015)30-0030-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.30.022

150050 黑龍江省哈爾濱市道外區太平人民醫院檢驗科

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