重金屬脅迫引起的大蒜DNA損傷與修復(fù)

鄧麗娟+張雁+駱淑媛

摘要：以紫外分光光度法和瓊脂糖凝膠電泳檢測了大蒜在重金屬Pb2+和Cd2+脅迫處理后的DNA的損傷。結(jié)果表明： Pb2+和Cd2+都能夠脅迫大蒜DNA解鏈、交聯(lián)程度增加，并引起部分DNA的降解;而綠豆浸出液對Pb2+和Cd2+引起的DNA損傷均能進(jìn)行修復(fù)，且對Pb2+引起的DNA損傷修復(fù)的效果更好。

關(guān)鍵詞：Pb2+和Cd2+脅迫;綠豆浸出液; DNA損傷

中圖分類號：X173

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號：1674-9944（2014）12-0231-02

1引言

鉛和鎘是常見的環(huán)境污染重金屬，對動(dòng)植物具有較強(qiáng)的毒性。許多研究表明，重金屬脅迫不僅會(huì)影響植物的生長發(fā)育[1～5]，還會(huì)引起動(dòng)物細(xì)胞DNA解鏈、交聯(lián)以及期外DNA合成速率大幅度提高等[6～8]。但是到目前為止，重金屬對植物細(xì)胞DNA水平的損傷及修復(fù)機(jī)制研究得較少。

本文擬采用最常見的大蒜為材料，探究重金屬鉛和鎘對大蒜DNA的損傷作用以及常用的解毒物質(zhì)綠豆浸出液對DNA損傷的修復(fù)，為防治重金屬污染對農(nóng)作物的毒害提供一定的理論基礎(chǔ)。

2材料與方法

2.1材料

大蒜。

2.2試劑

Pb（NO3）2、3CdSO4.8H2O、Tris、巰基乙醇、NaCl、EDTA、酚、氯仿、異戊醇、無水乙醇、瓊脂糖、溴化乙錠、純水、0.5*TBE緩沖液、上樣緩沖液、綠豆浸出液（按1g綠豆加水20mL的比例，煮沸后再煮30s取上清液）。

2.3方法

（1）材料培養(yǎng)。將未發(fā)芽的大蒜分組培養(yǎng)一周左右（表1），每3d適當(dāng)添加相應(yīng)的溶液，待大蒜發(fā)芽，至芽大約5～10cm時(shí)停止培養(yǎng)。DNA提取前將每組大蒜的蒜瓣皮剝掉，去除最上端的芽約2～3cm，用解剖刀將蒜瓣切成小粒狀，置于4℃?zhèn)溆谩?/p>

（2）DNA的提取：脅迫處理后，采用CTAB法[9]分別提取大蒜的DNA，4℃儲(chǔ)存。

（3）DNA損傷修復(fù)檢測：1%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

（4）DNA增色效應(yīng)測定。……