長期低劑量鎘致正常肝臟細胞異常增殖及其與caspase-8甲基化的關系

王　玥，郭　花，張　平，劉蓮勤，劉亞男，王　波，李　揚(吉林大學基礎醫學院病理生理學系，吉林長春130021)

長期低劑量鎘致正常肝臟細胞異常增殖及其與caspase-8甲基化的關系

王玥，郭花，張平，劉蓮勤，劉亞男，王波△，李揚△
(吉林大學基礎醫學院病理生理學系，吉林長春130021)

目的:應用L-02細胞建立長期低劑量鎘轉化細胞模型。觀察轉化細胞形態學變化，檢測轉化細胞增殖、凋亡和甲基化的改變，探討長期低劑量鎘導致細胞轉化的機制。方法:采用MTT法、形態學分析、Western blot、細胞克隆形成、流式細胞術、限制性內切酶酶切電泳和MSP。分組:對照組、CDT-L-02組、5-aza組和CDT-L-02 +5-Aza組。結果: (1) 1 μmol/L氯化鎘培養L-02細胞第2周時，細胞長軸逐漸變長; 10周時，細胞從方形變成長梭形;與對照組相比，轉化細胞DNMT1表達穩定升高，caspase-8表達穩定下降。與對照組L-02細胞相比，轉化細胞的增殖率，克隆形成率明顯升高。(2)轉化細胞在甲基化抑制劑5-Aza的作用下，與對照組相比，增殖率明顯下降，凋亡率明顯增加; DNMTs、caspase-8與凋亡和周期相關蛋白的表達在5-Aza的作用下恢復到對照組的水平;基因組和caspase-8基因啟動子甲基化的水平也有所恢復。結論:長期低劑量鎘能促進正常肝細胞L-02增殖增加，凋亡減少，導致正常細胞發生轉化，其機制是提高了基因組DNA和caspase-8基因啟動子甲基化的水平。

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