王 齊,王 建,李慶華,龐天翔(中國醫學科學院北京協和醫學院,血液學研究所血液病醫院,實驗血液學國家重點實驗室,北京100032)
shRNA干擾CIAPIN1基因表達對K562細胞粒系分化的影響*
王齊,王建,李慶華△,龐天翔△
(中國醫學科學院北京協和醫學院,血液學研究所血液病醫院,實驗血液學國家重點實驗室,北京100032)
目的:探討沉默CIAPIN1基因對慢性粒細胞白血病K562細胞向粒系分化的影響。方法:針對CIAPIN1基因構建短shRNA真核表達載體并轉染細胞。瑞氏染色觀察細胞形態學變化;電鏡觀測細胞超微結構的改變; real-time PCR方法檢測粒系分化標志基因mRNA水平的改變; Western blotting檢測ERK1/2、JNK、p38 MAPK及Akt磷酸化水平的改變。結果: CIAPIN1基因沉默后,K562細胞的形態和超微結構趨向成熟粒細胞,表面分化抗原CD11b、NCF1、ORM1、C/EBPα和HIF1α的mRNA表達水平升高,ERK1/2磷酸化水平升高。結論:抑制CIAPIN1基因表達能促進K562細胞分化,ERK1/2磷酸化水平的升高可能參與了該分化過程。
國家自然科學基金資助項目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學基金資助項目(No.14JCZDJC34900)
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