王 齊,王 建,李慶華,龐天翔(中國醫學科學院北京協和醫學院,血液學研究所血液病醫院,實驗血液學國家重點實驗室,北京100032)
沉默CIAPIN1基因對K562細胞增殖能力的影響*
王齊,王建,李慶華△,龐天翔△
(中國醫學科學院北京協和醫學院,血液學研究所血液病醫院,實驗血液學國家重點實驗室,北京100032)
目的:探討靶向干擾CIAPIN1基因表達對慢性粒細胞白血病(CML)細胞系K562細胞增殖能力的影響。方法:針對CIAPIN1基因構建shRNA真核表達載體并穩定轉染K562細胞系。Real-time PCR及Western blotting技術鑒定干擾效率; CIAP-IN1基因沉默之后,改良MTT法檢測細胞活力的變化;甲基纖維素集落形成實驗觀察細胞集落形成大小和數量的變化;流式細胞術檢測細胞周期的改變;將K562細胞接種到裸鼠體內皮下,觀察細胞在裸鼠體內成瘤能力的變化。結果: CIAPIN1基因表達下調后,K562細胞的活力下降;集落形成數量減少和集落減小; G1期細胞數量增加;小鼠體內成瘤能力明顯降低。結論:下調CIAPIN1基因表達能夠抑制K562細胞在體外及體內的增殖能力。
國家自然科學基金資助項目(No.81170510; No.81402432; No.81090412) ;天津市自然科學基金資助項目(No.14JCZDJC34900)
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