王心雪,毛 穎,姜現瑞,孫連坤,康勁松(吉林大學基礎醫學院病理生理學系,吉林長春130012)
抗氧化基因在糖缺失誘導細胞死亡中的作用
王心雪,毛穎,姜現瑞,孫連坤,康勁松
(吉林大學基礎醫學院病理生理學系,吉林長春130012)
目的:探討不同能量代謝途徑對細胞存活的影響以及抗氧化基因在葡萄糖缺失模型中導致細胞死亡的作用。方法:采用EBSS建立體外培養PC12細胞葡萄糖缺失模型,采用2-DG抑制糖酵解,Oligo抑制有氧氧化。MTT法檢測細胞生存率;倒置顯微鏡觀察細胞形態;流式細胞術檢測細胞死亡方式; Hoechst 33342染色觀察細胞核形態; Western blot和real-time PCR檢測凋亡及抗氧化相關基因的表達。結果:與對照組相比,EBSS(E)組、E +2-DG組、E + Oligo組以及E +2-DG + Oligo組PC12細胞的生存率均明顯下降,以2-DG組下降最顯著。進一步證明細胞凋亡率及壞死率亦明顯增加是生存率下降的主要因素,以凋亡率增加更為明顯。抗氧化基因SOD2、HO-1和NQO-1在轉錄及翻譯水平上均明顯降低。在加入外源性抗氧化劑NAC后,PC12細胞的生存率明顯升高。結論: PC12細胞在糖缺失時主要依靠糖酵解來維持細胞存活。干擾糖酵解和有氧氧化通過降低抗氧化基因的表達,降低PC12細胞抗氧化能力,促進PC12細胞凋亡。
E-mail: kanjs@jlu.edu.cn