劉協紅,蔡姣迪,肖獻忠,張華莉(中南大學基礎醫學院病理生理學系,湖南長沙410083)
NAC通過調控胞漿抗氧化蛋白的氧化還原狀態減輕心肌細胞氧化應激損傷
劉協紅,蔡姣迪,肖獻忠,張華莉
(中南大學基礎醫學院病理生理學系,湖南長沙410083)
目的:探討N-乙酰半胱氨酸(NAC)是否通過影響心肌細胞內抗氧化通路蛋白的氧化還原狀態從而在心肌細胞氧化應激中發揮保護作用。方法:用H2O2刺激H9c2心肌細胞導致氧化應激損傷。采用CM-H2DCFDA熒光染料檢測細胞內ROS變化情況;谷胱甘肽試劑盒檢測細胞內GSH和GSSG的水平;非還原Western blot技術檢測Trx1、GR、Prx1和PTEN的氧化還原狀態;還原Western blot檢測ASK1和AKT的磷酸化。結果: NAC預處理組明顯增加心肌細胞氧化應激時的細胞活力和GSH/ GSSG比值,并且降低細胞內ROS水平。非還原Western blot顯示H2O2刺激使還原型Trx1明顯減少,氧化型GR、Prx1和PTEN顯著增多,NAC預處理可以增加還原型Trx1,減少氧化型GR、Prx1和PTEN。還原Western blot發現,NAC預處理之后,H2O2誘導的ASK1磷酸化明顯減少,而H2O2誘導的AKT磷酸化明顯增加。結論: NAC通過減少胞漿內抗氧化蛋白的氧化從而保護心肌細胞氧化應激損傷。
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