高 娟,戚艷超,徐 明(北京大學第三醫院心內科,血管醫學研究所,北京100191)
G-四鏈體的形成與穩定對miR-24表達的調控作用*
高娟,戚艷超,徐明△
(北京大學第三醫院心內科,血管醫學研究所,北京100191)
目的:研究旨在探討G-四鏈體的形成與穩定對miR-24表達調控作用,為非編碼RNA的調控提供新的思路。方法:圓二色光譜、分子核磁、硫酸二甲酯保護實驗、電離電噴霧質譜。野生型(G4)和富G序列突變型(NG4)的miR-24過表達腺病毒的構建,人胚腎細胞系(HEK-293A)轉染,富G序列敲除SD大鼠的構建,qRT-PCR等實驗方法。結果:圓二色光譜證明miR-24-1上游能形成G-四鏈體并提示其具有平行鏈構象特征;分子核磁、硫酸二甲酯保護實驗等技術證實該G-四鏈體具有多層四分體平面結構。病毒轉染實驗表明,G-四鏈體在穩定性配基的誘導與穩定作用下能抑制miR-24成熟體的表達。該段富G序列敲除的SD大鼠,心臟組織的miR-24表達水平顯著高于野生型SD大鼠。結論: miR-24-1上游富G序列能夠形成平行鏈G-四鏈體結構,該G-四鏈體結構的形成與穩定能夠抑制miR-24的表達水平。
國家自然科學基金資助項目(No.91339105) ;北京市自然科學基金資助項目(No.7142165) ;北京市科學技術委員會基金資助項目(No.Z141100000214006)
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