雌二醇對MKP-1的調控與圍絕經期抑郁癥的相關性研究

惠凌云，王 凌，張 琳，李 娜，于學文

(西安交通大學第一附屬醫院，陜西 西安 710061)

雌二醇對MKP-1的調控與圍絕經期抑郁癥的相關性研究

惠凌云，王 凌，張 琳，李 娜，于學文

(西安交通大學第一附屬醫院，陜西 西安 710061)

目的 探討圍絕經期女性雌二醇水平對絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)代謝通路的調控與高發的抑郁癥的關系。方法 根據漢密爾頓抑郁量表(HAMD-17)評分及ICD-10“抑郁發作”的診斷標準入選196例研究對象并采集外周血標本。采用電化學發光法檢測雌二醇(E2)，ELISA雙抗體夾心法檢測MKP-1蛋白水平，比較各組之間的差異及其相關性。結果 圍絕經期抑郁癥組與其他三組比較，E2水平降低(Z值分別為-1.887、-6.561、-7.563，均P<0.05)，MKP-1水平升高(P<0.05)，HAMD評分和E2分級呈負相關關系(R=- 0.227，P=0.033)；HAMD與MKP-1顯示正相關(R=0.287，P=0.000)；E2分級與MKP-1顯示負相關(R=-0.264，P=0.000)。結論 圍絕經期雌激素水平的降低引發MKP-1水平升高，可能導致抑郁癥的高發。

雌激素；絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1；圍絕經期；抑郁癥

[Abatract] Objective To study the regulation of estrogen level on mitogen-activated protein kinase phosphatase-1(MKP-1) and its relationship with high incidence of depression among perimenopausal women. Methods In accordance with the diagnostic criteria ofdepressiveepisodeof ICD and Hamilton Depression (HAMD-17) rating scale, 196 women were recruited and their blood samples were collected. Peripheral blood estradiol (E2) was detected by electrochemiluminescence assay, and ELISA was used to detect MKP-1 protein level. The difference and relevance among different groups were compared. Results Compared to the other three groups , E2level in the perimenopausal depression group decreased(Zvalue was -1.887, -6.561 and -7.563, respectively, allP<0.05),but MKP-1 level increased (P<0.05). HAMD scores were negatively correlated with E2grading(R=-0.227，P=0.033)but positively correlated with MKP-1 levels(R=0.287，P=0.000). E2levels were negatively correlated with MKP-1 levels (R=-0.264，P=0.000). Conclusion The decrease of estrogen level of perimenopausal women causes the increase of MKP-1 level, which probably leads to the high incidence of perimenopausal depression.

女性進入圍絕經期以后，隨著卵巢功能的衰退，雌二醇(estrogen，E2)水平逐漸降低，抑郁癥的罹患風險增加2～4倍[1]。絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1，MKP-1)是絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶(mitogerr activated protein kinase phosphotase，MAPK)介導的去磷酸化調節的重要蛋白，發揮著負調節因子的作用[2]。最新研究表明，抑郁癥自殺患者尸檢的海馬組織中存在高表達的MKP-1mRNA， MKP-1是抑郁癥發病的關鍵基因[3]，目前關于E2與MKP-1的相關性研究很少報道，本研究通過對不同年齡段女性病例組與對照組E2與MKP-1水平的比較分析，探討MKP-1水平的改變與高發的圍絕經期抑郁癥的關系。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集2013年1月至2014年6月就診于西安交通大學醫學院第一附屬醫院精神科門診以及婦女保健科門診共196名女性作為研究對象。入選標準：圍絕經期組年齡45～55歲，月經周期紊亂(至少發生2次月經周期改變到距離最后1次月經1年之內)，對照組年齡20～35歲，月經周期正常；抑郁癥組符合國際疾病分類-10(international classification of diseases 10th revision，ICD-10) “抑郁發作”的診斷標準并同時滿足漢密爾頓抑郁量表-17(hamilton depression scale-17， HAMD-17)評分>17分；抑郁量表評分≤7分為非抑郁癥組；同時研究對象近3個月未服用過性激素，排除子宮切除患者。本研究所有入組研究對象均知情同意。

1.2 量表評定

由具有多年臨床工作經驗的醫生對所有研究對象用ICD-10“抑郁發作”的診斷標準進行診斷并進行HAMD-17評定。

1.3 血清標本的收集及檢測

嚴格控制在無月經來潮婦女的早卵泡期或月經來潮后3～7天，采集清晨空腹、靜息狀態下外周血5mL，待血塊自然收縮后離心15min(轉速為3 000r/min)，吸出血清、分裝、標記后迅速置-80℃低溫冰箱冷凍直至分析。羅氏全自動電化學發光免疫分析儀Coabs e601E-E以及配套試劑檢測E2；人絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶(MKP-1)酶聯免疫試劑盒(96T)檢測血清MKP-1水平，在450nm波長處通過測定OD值繪制標準曲線計算樣本濃度。每份血清樣本平行檢測2次，并取平均值進行統計學分析。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 入組資料比較

四組之間年齡和HAMD評分經正態性檢驗符合正態分布，采用one-way ANONA方差分析，同年齡段年齡比較顯示無統計學差異(P>0.05)；同年齡段抑郁癥組HAMD評分高于非抑郁癥組，有統計學差異(P<0.05)，說明入組對象符合研究要求，見表1。

注：*與Δ比較，年齡因素P=0.114；Δ與#比較， HAMD評分P=0.325；&與#比較，年齡因素P=0.667，其余各組之間年齡因素和HAMD評分比較，P<0.05，均有統計學差異。

2.2 雌二醇結果比較

四組E2水平非正態分布，按以下標準分為三級：1級：< 49.6 pmol/L；2級：49.6～218 pmol/L；3級：≥ 218 pmol/L。采用秩和檢驗，結果顯示：圍絕經期抑郁癥組與其他三組比較E2水平降低，有統計學差異(P<0.05)，見表2。

表2 圍絕經期抑郁與非抑郁組、青年女性抑郁與非抑郁組E2結果比較

Table 2 Comparison of E2results among perimenopausal depression group, perimenopausal non-depression group, young women depression group and young women non-depression group

注：*與Δ比較，Z=-1.887，P=0.047；*與&比較，Z=-6.561，P=0.000；*與#比較，Z=-7.563，P=0.000；Δ與&比較，Z=-5.509，P=0.000；Δ與#比較，Z=-6.522，P=0.000；其余各組之間無統計學差異。

2.3 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1結果比較

四組MKP-1通過正態性檢驗符合正態分布，采用one-way ANONA方差分析，圍絕經期抑郁癥組MKP-1水平高于其他三組，青年女性抑郁癥組高于非抑郁癥組，有統計學差異(P<0.05)，見表3。

注：*與Δ比較，P=0.000；*與&比較，P=0.000；*與#比較，P=0.000；&與#比較，P=0.049。其余各組之間無統計學差異。

2.4 相關性分析

將HAMD、E2分級和MKP-1水平分別進行Spearman相關性檢驗，結果顯示：HAMD評分和E2分級呈顯著負相關(R=- 0.227，P=0.033)；HAMD與MKP-1呈顯著正相關(R=0.287，P=0.000)；E2分級與MKP-1呈顯著負相關(R=-0.264，P=0.000)。

3 討論

3.1 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1在腦源性神經營養因子的絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶信號傳導通路中對抑郁癥的影響

MKP-1屬于 MKPs家族中的一員，主要分布在細胞核內，是MAPK的三條信號傳導通路的重要的負調節因子。MAPK是一種重要的生長信號調節蛋白，與細胞生長、分化、增殖、凋亡、免疫防御密切相關[4]。MKP-1 對腫瘤的影響已經得到廣泛而深入的研究[5]，最新研究認為 MKP-1是中樞神經系統功能的重要調節者， 參與了中樞神經系統中學習、記憶、神經元及突觸可塑性調節、神經元發生等多種重要功能，并影響細胞的增殖和激活[6]。其持續的激活可以導致MAPK的細胞外信號傳導通路(extracellular regulated protein kinases ，ERK)抑制，導致抑郁癥的發生，這一點從抑郁癥自殺患者的海馬mRNA檢測已得到證實[3]。抑郁癥患者 MKP-1 基因的活性是正常人的2倍，而敲除該基因的大鼠對精神壓力具有良好的抵抗力，并且能耐受外來刺激[7]。

抑郁癥的神經營養學說認為，神經營養因子的減少可能參與了抑郁癥的發生[8]。腦源性神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)是神經營養因子家族中含量最多的一種，抑郁癥患者血漿BNDF水平明顯低于對照組，經抗抑郁治療后血漿BDNF水平高于基礎值[9]，因此，BDNF水平的降低可能會導致抑郁癥的發生。MAPK是BDNF的三條信號傳導通路之一，研究發現，培養的抑制性神經元和興奮性神經元中加入BDNF，MKP-1 的表達迅速發生改變[10]。因此，MKP-1的去磷酸化使整個反應更加精確的被調控，其在抑郁癥的發生中起重要作用。

3.2 雌激素對腦源性神經營養因子的調控與抑郁癥的發生

雌激素是有效的情緒調節劑，在動物實驗中對抑郁模型動物能夠發揮抗抑郁作用[11]，雌激素通過兩條途徑調控BDNF。一方面通過BDNF基因上的雌激素反應元件(estrogen response element，ERE)來調節[7]。雌激素通過調控誘導 ERE 內含基因從而上調BDNF的 蛋 白 表 達，發揮神經保護作用[8]。另一方面通過γ-氨基丁酸能(γ-aminobutyricacid ,GABA)神經元中存在的雌激素β受體(estrogen receptor bata，ERβ)，雌激素通過與ERβ結合調節GABA神經元，進而調節BDNF的表達[12]。因此，高的雌激素水平正向調控BDNF，減低抑郁癥的發生。

3.3 圍絕經期抑郁癥的發生與絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1水平的關系

圍絕經期卵巢功能逐漸衰竭，體內性激素水平發生了劇烈的變化，以E2水平的降低最為顯著，導致內分泌失衡，抑郁癥的發生顯著上升[13]。本研究結果表明，圍絕經期抑郁癥組E2水平低于其他三組，并且抑郁癥的嚴重程度與E2水平呈負相關關系。MKP-1水平在圍絕經期抑郁組顯著高于其他三組，青年女性抑郁癥組MKP-1水平高于該年齡段對照組，表明MKP-1水平在抑郁癥組較非抑郁癥組有明顯的高表達，同時在對MKP-1與E2的相關性分析中顯示，兩者之間存在正相關關系，因此血清MKP-1水平的升高與抑郁癥的發生有關，并受到了E2水平的調節。

通過以上實驗結果認為，圍絕經期婦女抑郁癥的高發受到了E2水平降低的影響，而E2水平降低引發了BDNF水平的降低，進一步影響到BDNF的MAPK/ERK傳導通路水平下降，以致MKP-1負調節因子水平升高，進而減少BDNF蛋白的表達，最終可能導致抑郁癥的發生。

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[專業責任編輯：韓 蓁]

孕婦使用化妝品或能誘發小孩孤獨癥

約克大學的研究者指出，孕早期的婦女應當避免接觸一些產品，例如化妝品、清潔劑和藥物，以保護胎兒大腦不受一些化合物的影響，這些化合物有可能誘發孤獨癥。這些產品都是日常經常使用的，例如乳霜、化妝品、清潔劑、殺蟲劑、非甾體抗炎藥(阿司匹林)、米索前列醇、用作工業潤滑劑的多氯聯苯、木材和紡織品中發現的多溴聯苯、PVC地板含有的鄰苯二甲酸、兒童玩具、洗液等。這些物品中含有某些化合物，能夠潛在影響胎兒發育。報告指出，孕婦不僅要注意這些化合物的類型，還應注意使用的周期、頻率及濃度，其可能危害胎兒大腦。研究者推薦婦女們了解這些環境物質的健康危害，從而減少胎兒疾病的風險。研究發表在《歐洲神經科學雜志》(European Journal of Neuroscience)。

Regulation of estrogen level on MKP-1 and its relationship with perimenopausal depression

HUI Ling-yun, WANG Ling, ZHANG Lin, LI Na, YU Xue-wen

(FirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity,ShaanxiXi’an710061,China)

estrogen; MKP-1; perimenopausal period; depression

2015-06-03

惠凌云(1974-)，女，主管技師，碩士，從事檢驗醫學工作。

于學文，教授。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.05.008

R711.7

A

1673-5293(2015)05-0931-03