抗－Ce合并抗－e混合抗體致交叉配血不合1例分析

張冬霞，史立英，李 影，于 紅，黃士敏，李凌波

（1.吉林省腫瘤醫(yī)院輸血科，吉林長(zhǎng)春130012；2.長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司）

抗－Ce合并抗－e混合抗體致交叉配血不合1例分析

張冬霞1，史立英1，李 影1，于 紅1，黃士敏1，李凌波2＊

（1.吉林省腫瘤醫(yī)院輸血科，吉林長(zhǎng)春130012；2.長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司）

1 臨床資料

患者，女，38歲，2013年11月在我院診斷為卵巢癌術(shù)后化療后（Ⅳ期）。患者曾于3年9個(gè)月余前在某醫(yī)院行全子宮及雙側(cè)附件切除術(shù)，并于2012年12月、2013年1月兩次分別輸注去白細(xì)胞洗滌紅細(xì)胞懸液2U，自述未發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)。入本院后給予輸血、升血對(duì)癥治療。患者血型鑒定為B型，RhD陽(yáng)性。應(yīng)用卡式抗人球蛋白試驗(yàn)對(duì)患者血清進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選為陽(yáng)性，且輸血前行卡式法交叉配血時(shí)，發(fā)現(xiàn)連續(xù)配血4份（均為B型RhD陽(yáng)）均出現(xiàn)主側(cè)凝集，遂對(duì)患者血清不規(guī)則抗體進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)患者血清出現(xiàn)IgG類抗－Ce和IgG類抗－e混合抗體。

ABO、RhD血型定型檢測(cè)卡（單克隆抗體）；抗人球蛋白檢測(cè)卡；Rh血型抗原檢測(cè)卡（單克隆抗體）；ABO血型反定型試劑盒（人血紅細(xì)胞）；不規(guī)則抗體檢測(cè)試劑（人血紅細(xì)胞）；低離子強(qiáng)度鹽溶液（LISS）。以上均由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)。紅細(xì)胞血型抗體鑒定譜細(xì)胞，10人份，上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)。以上所有試劑均在效期內(nèi)使用。

血型鑒定：采用卡式法，按生產(chǎn)廠家使用說明書進(jìn)行操作和判讀。

不規(guī)則抗體篩查：采用鹽水法及卡式抗人球蛋白試驗(yàn)兩種方法，卡式法按廠家使用說明書進(jìn)行操作和判讀。

不規(guī)則抗體鑒定：采用鹽水法及卡式抗人球蛋白試驗(yàn)，分別將標(biāo)本血清與由10人份O型紅細(xì)胞組成的譜紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞（卡式法中使用紅細(xì)胞均由低離子強(qiáng)度鹽溶液稀釋成0.8%濃度）反應(yīng)。與譜紅細(xì)胞中1至數(shù)人份凝集，與自身紅細(xì)胞不凝集者為抗體陽(yáng)性，并根據(jù)與譜紅細(xì)胞的反應(yīng)格局判定抗體特異性。

吸收放散試驗(yàn)及抗體效價(jià)測(cè)定 吸收放散試驗(yàn)及抗體效價(jià)測(cè)定均按文獻(xiàn)［1］進(jìn)行。

2 結(jié)果

患者ABO血型為B型，Rh血型表型為DccEE。患者血清在生理鹽水介質(zhì)中，與所有篩檢細(xì)胞均產(chǎn)生陰性反應(yīng)；在卡式抗人球蛋白試驗(yàn)中與1號(hào)、3號(hào)細(xì)胞分別呈3＋、2＋的陽(yáng)性反應(yīng)，與2號(hào)細(xì)胞呈陰性反應(yīng)，提示患者血清檢出ABO系統(tǒng)外的IgG類的不規(guī)則抗體。篩檢細(xì)胞的1號(hào)、2號(hào)和3號(hào)的Rh血型分別為DCCee、DccEE、DCcEe。患者血清在生理鹽水介質(zhì)中與所有的譜細(xì)胞及自身對(duì)照細(xì)胞均產(chǎn)生陰性反應(yīng)；在卡式抗人球蛋白試驗(yàn)中，除與第2號(hào)（Rh血型DccEE）、第10號(hào)（Rh血型DccEE）譜細(xì)胞以及自身對(duì)照細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果為陰性以外，其余的反應(yīng)結(jié)果均為陽(yáng)性。結(jié)果表明患者血清中可能存在抗－Ce、抗C和抗－e抗體，需進(jìn)一步鑒定抗體特異性。由于此抗體在室溫生理鹽水介質(zhì)中沒有反應(yīng)活性，可判斷為IgG性質(zhì)抗體。吸收放散試驗(yàn)：選取前述譜細(xì)胞中Rh表型dccee型細(xì)胞吸收患者血清，直到吸收后血清與該細(xì)胞反應(yīng)陰性為止，表明已完全去除了可能存在的抗－e和（或）抗－Ce抗體，再用上述譜細(xì)胞檢測(cè)吸收后患者血清，發(fā)現(xiàn)與C抗原相關(guān)的DCCee、DCcEe型譜細(xì)胞均呈陰性，表明患者血清中不存在單特異性抗－C抗體。對(duì)吸收抗體后的dccee細(xì)胞進(jìn)行放散，應(yīng)用譜細(xì)胞、自身細(xì)胞檢測(cè)放散液，除DccEE型譜細(xì)胞以及自身細(xì)胞結(jié)果陰性以外，其余的結(jié)果均為陽(yáng)性；將放散液與本室篩出的O型DCcEE型獻(xiàn)血者細(xì)胞反應(yīng)，結(jié)果為陽(yáng)性，排除患者血清中單獨(dú)存在單特異性的抗－e抗體，表明存在抗－Ce復(fù)合抗體或抗－Ce、抗－e混合抗體。抗體效價(jià)測(cè)定：用篩出的DCcEE型獻(xiàn)血者細(xì)胞吸收患者血清，直到吸收后血清與該細(xì)胞反應(yīng)陰性為止，吸收后血清與譜細(xì)胞中DccEe、Dccee、dccee型細(xì)胞均呈陽(yáng)性反應(yīng)，表明患者血清中應(yīng)存在抗－Ce、抗－e混合抗體；應(yīng)用O型Dccee型細(xì)胞檢測(cè)吸收后患者血清抗體效價(jià)，測(cè)得IgG抗－e效價(jià)為8。對(duì)吸收患者血清后的DCcEE細(xì)胞進(jìn)行放散，應(yīng)用O型DCCee型細(xì)胞對(duì)放散液中抗體進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得IgG抗－Ce效價(jià)為16。

3 討論

Rh血型是人類已知的紅細(xì)胞血型中最為復(fù)雜的一個(gè)，現(xiàn)已確定的Rh血型抗原總共有50多個(gè)［2］。臨床上Rh血型抗原抗體的不相容均可致溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病以及自身免疫性溶血性貧血［3］，其臨床意義僅次于ABO血型。Rh血型抗體主要是由妊娠、輸血或其他明確原因產(chǎn)生的同種異型免疫抗體，其中抗－D曾是最常見的抗體，但隨著近年來對(duì)RhD血型的常規(guī)檢測(cè)并對(duì)供受者的RhD配型以及將抗RhD免疫球蛋白用于預(yù)防的出現(xiàn)，其發(fā)生率已顯著下降。一項(xiàng)國(guó)內(nèi)的研究顯示［4］，對(duì)5 050名患者Rh血型抗原及不規(guī)則抗體進(jìn)行檢測(cè)，共檢出抗體70例，其中抗－E、抗－c、抗－C的檢出頻率均超過抗－D，并檢出抗－cE與抗－Ce復(fù)合抗體各1例，并認(rèn)為這與檢測(cè)的患者Rh系統(tǒng)抗原分布頻率等因素有關(guān)。

Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的出現(xiàn)，在輸血前相容性檢測(cè)中還可導(dǎo)致反復(fù)交叉配血不合，本例患者曾因卵巢癌術(shù)后多次輸注去白細(xì)胞洗滌紅細(xì)胞懸液，由于患者Rh血型表型為DccEE，其在多次輸血免疫刺激下產(chǎn)生了不規(guī)則抗體，給交叉配血造成了很大困難，經(jīng)鑒定該患者產(chǎn)生的抗體為IgG類抗－Ce合并抗－e混合抗體，我們根據(jù)鑒定結(jié)果為該患篩選B型DccEE表型的獻(xiàn)血者進(jìn)行配血相合后輸注取得了良好效果，但篩選過程中發(fā)現(xiàn)相合率不高大概為3%－4%左右，這應(yīng)與中國(guó)北方人Rh血型DcE單倍型頻率（0.2417）相對(duì)不高有關(guān)［5］。由于患者前幾次輸血均在其他醫(yī)院進(jìn)行，其獻(xiàn)血者的血液已不可考，不能證實(shí)是哪一次輸血免疫產(chǎn)生了抗體。抗－e抗體并不常見，因?yàn)橹挥写蠹s3%的人為e抗原陰性，且抗－e往往和抗－Ce同時(shí)存在［6］，本例患者推測(cè)應(yīng)是多次輸注了DCCee等表型的獻(xiàn)血者血液導(dǎo)致產(chǎn)生了抗－Ce和抗－e混合抗體，這也與諸多研究顯示的我國(guó)DCe單倍型頻率（0.6583［4］、0.5901［5］、0.6405［7］）較高有關(guān)。

Ce復(fù)合抗原，現(xiàn)ISBT（國(guó)際輸血協(xié)會(huì)）命名為RH7，以及類似的抗原RH41，均為C和e在同一復(fù)合物中，被同一基因所編碼［6］。最初的抗－Ce（同時(shí)伴有很弱的抗e）是從一位經(jīng)免疫的婦女血清中發(fā)現(xiàn)的，其表型即為DccEE［8］。抗－Ce、抗－e混合抗體的出現(xiàn)，臨床上可引起新生兒溶血病及溶血性輸血反應(yīng)［9，10］，也是導(dǎo)致交叉配血不合的一個(gè)重要因素［9，11］。因此，在輸血前對(duì)具有輸血史和妊娠史的患者應(yīng)進(jìn)行抗體篩選，進(jìn)而采取相應(yīng)的方法對(duì)含有不規(guī)則抗體的患者進(jìn)行抗體鑒定，可有效提高配血效率，并根據(jù)鑒定結(jié)果為患者尋找相配合的血液進(jìn)行輸注，以減少輸血反應(yīng)的發(fā)生。

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2014－03－15）

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