乳腺癌組織中E-cadherin和CD105的表達

陳謙，高超，張磊

(1徐州醫學院附屬醫院，江蘇徐州221000;2連云港市第二人民醫院)

乳腺癌發病率呈緩慢上升及年輕化趨勢，如今已躍居女性惡性腫瘤第1位［1～4］。上皮鈣黏蛋白(E-cadherin)與腫瘤細胞的黏附有關，且可作為乳腺癌有價值的預后指標;CD105是一種新的血管內皮抗體，即同型二聚體細胞膜糖蛋白，在與腫瘤有關的新生血管內皮中強表達，是新生血管增殖的標志。現就乳腺癌中E-cadherin、CD105的表達及其兩者間的關系分析如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年3月～2013年10月連云港市第二人民醫院收治的60例乳腺癌患者，年齡30～69(49.57±10.23)歲。組織學分級(Elson and Eliis分級法):Ⅰ級15例，Ⅱ級41例，Ⅲ級4例;pTNM分期:Ⅰ期15例，Ⅱ期34例，Ⅲ期11例。人表皮生長因子受體(C-erbB-2)陰性38例，陽性22例;雌激素受體(ER)陰性29例，陽性31例;孕激素受體(PR)陰性28例，陽性32例。所有患者手術治療前未做任何治療。

1.2 方法

1.2.1 E-cadherin、CD105蛋白表達檢測 通過免疫組化SP法對乳腺癌標本進行處理。兔抗人E-cadherin蛋白多克隆抗體使用濃度為1∶100，鼠抗人CD105蛋白多克隆抗體使用濃度為1∶100，SP試劑盒、DAB染色劑均購于武漢博士德生物公司。陰性對照為PBS代替一抗的空白對照和正常兔血清代一抗的替代對照，陽性對照為已知明確陽性的乳腺癌組織。E-cadherin蛋白表達陽性細胞主要定位于細胞膜與細胞質內，表現為棕黃色。顯微鏡下觀察陽性細胞＜25.0%為E-cadherin蛋白表達陰性，≥25.0%為表達陽性。CD105蛋白陽性表達主要定位在細胞質，以微血管密度(MVD)表示，MVD＞30.0%為表達陽性。

1.2.2 E-cadherin、CD105 mRNA 表達檢測 按試劑盒說明書提取組織RNA，用逆轉錄試劑盒進行逆轉錄得到 cDNA，保存 －80℃冰箱備用;使用ABI7900實時熒光定量PCR檢測儀進行E-cadherin、CD105 mRNA表達水平檢測。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件，計量數據以±s表示，兩組間比較采用t檢驗;計數資料以百分比表示，比較采用χ2檢驗;基因表達狀態與乳腺癌臨床病理參數之間的關系用χ2檢驗或Fisher's精確概率法;相關性檢驗選用Spearman分析。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 E-cadherin、CD105蛋白表達與乳腺癌臨床病理參數的關系 見表1。

2.2 E-cadherin蛋白與 CD105蛋白的相關性CD105蛋白在有淋巴結轉移、組織分級Ⅰ和Ⅱ級、pTNM分期Ⅲ期中呈高表達，E-cadherin蛋白在有淋巴結轉移、組織分級Ⅰ和Ⅱ級、pTNM分期Ⅲ期中呈低表達;經過Spearman相關性分析，E-cadherin蛋白與CD105蛋白表達呈負相關(r= －0.343，P ＜0.05)。

2.3 E-cadherin、CD105 mRNA 表達與乳腺癌臨床病理參數的關系 見表2。

表1 E-cadherin、CD105蛋白表達與乳腺癌臨床病理參數的關系

表2 E-cadherin、CD105 mRNA表達與乳腺癌臨床病理參數的關系

3 討論

復發和轉移是乳腺癌治療失敗的最主要原因。乳腺癌的發生、發展過程復雜，因而尋找影響乳腺癌治療和預后的相關因子成為人們近年研究熱點。本文通過對CD105、E-cadherin表達與乳腺癌臨床特征的關系可以看出，CD105陽性率在腫瘤直徑、淋巴結轉移、組織分級、pTNM分期間存在差異，E-cadherin陽性率在淋巴結轉移、組織分級、pTNM分期、C-erbB-2陰性與陽性間存在差異，這與屈洪波等［5］報道一致。E-cadherin的功能是一類介導細胞之間相互黏附的鈣依賴性跨膜蛋白，參與形成和維護正常細胞之間的鏈接，對維持正常上皮細胞形態和結構的完整性起重要作用［6］。腫瘤細胞的浸潤、轉移是一個多因素、多步驟的復雜過程，在這一過程中，E-cadherin起著關鍵的作用。E-cadherin在正常細胞中穩定表達，但在癌細胞中表達常不穩定，且在多種上皮性腫瘤中表達下調［7］。由于E-cadherin是上皮細胞中的黏附分子，故對維持正常上皮細胞形態和結構的完整性起著重要作用，陽性表達有抑制腫瘤轉移的功能。當E-cadherin表達下降或缺失，細胞間的相互黏附力下降，細胞容易分散而向外周浸潤性生長，一旦獲得轉移的必要條件，就可脫離原發灶而發生侵襲和轉移［8］。有相關報道［9］證實，E-cadherin的黏附能力的丟失是獲得去分化和有侵襲力表型的關健一步。上皮細胞E-cadherin的正常表達能抑制細胞的游走和增殖，E-cadherin表達下調則使細胞連接松散，刺激細胞增殖游走，有利于腫瘤浸潤擴散［10］。王剛平等［11］研究表明，CD105 在乳腺癌組織血管內皮細胞中強表達，新生血管尤為明顯，正常組織則弱表達。CD105高表達的乳腺癌患者總生存期及無病生存期較短，從而預測在轉移性乳腺癌中C105有可能成為重要的治療靶標。E-cadherin表達降低與腫瘤的分化侵襲轉移有關;CD105在乳腺癌中的表達高于癌前病變組以及乳腺纖維瘤組［12］。

綜上所述，乳腺癌中E-cadherin與CD105表達呈負相關，聯合檢測E-cadherin與CD105表達對判斷乳腺癌的惡性程度及預后有較大作用。

［1］薛娜，楊國旺，王笑民，等.乳腺癌中醫證候研究現狀及思考［J］.中醫雜志，2014，55(2):168-171.

［2］漆楚波，龔益平，王明偉，等.上皮間葉轉化相關蛋白在三陰性乳腺癌組織中的聯合表達及其與預后的關系［J］.腫瘤防治研究，2014，41(3):265-268.

［3］張力雙，牛質琰，劉雯，等.糖耐量異常對原發性高血壓患者血壓變異性的影響［J］.疑難病雜志，2013，12(12):917-918.

［4］鄭臨海，吳愛國，范旭龍，等.短程低氧條件下乳腺癌BT549細胞表達beclin 1基因對上皮間質轉化的影響［J］.中華乳腺病雜志(電子版)，2014，53(1):13-18.

［5］屈洪波，方力，段麗麗，等.化療后殘存乳腺癌組織乳腺癌耐藥蛋白和P-糖蛋白的表達及其與上皮間質轉化的相關性［J］.中華病理學雜志，2014，43(4):236-240.

［6］霍莉莉，李慧，魏楓，等.乳腺癌中FoxP3表達與上皮間質轉化的相關性及其意義［J］.中國腫瘤臨床，2014，28(3):3364-3366.

［7］Jung E，Choi I.The metastatic rate of internal mammary lymph nodes when metastasis of internal mammary lymph node is suspected on PET/CT［J］.J Breast Cancer，2013，16(2):202-207.

［8］Xi R，Li YJ，Zhang JD，et al.Application of immediate breast reconstruction with silicon prosthetic implantation following bilateral mammary gland excision in treatment of young patients with early breast cancer［J］.J Thoracic Disease，2013，5(3):278-282.

［9］張自森，李燦宇，王寧，等.RNA干涉E-cadherin表達對乳腺癌細胞紫杉醇化療敏感性的影響［J］.中國婦幼保健，2014，29(7):1106-1108.

［10］白璐，高志安.乳腺癌中4.1N蛋白和E-cadherin蛋白表達的臨床意義［J］.醫學與哲學，2014，27(8):73-76.

［11］王剛平，梁云愛，張作峰，等.CD105標記微血管密度及HIF-1α在乳腺癌及癌前病變中的表達及意義［J］.中華臨床醫師雜志(電子版)，2013，27(8):30-34.

［12］黃桂林，孫旭凌.尿激酶型纖維蛋白酶原激活劑和基質金屬蛋白酶-26在乳腺癌中的表達及其與微血管密度的關系［J］.中華乳腺病雜志，2012，6(1):22-25.