銀魚中亞硝酸鹽的測定

陳一虎

摘 要：以離子色譜法測定地產銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質中的有害化學成份， 對人體具有一定的危害性。聯合國糧農及世界衛生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應小于20 mg。國內外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養豐富，肉質細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經粉碎，沉淀蛋白質、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經沉淀蛋白質、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結果分析

依據前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛生標準中規定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產品常規監測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創新導報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）

摘 要：以離子色譜法測定地產銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質中的有害化學成份， 對人體具有一定的危害性。聯合國糧農及世界衛生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應小于20 mg。國內外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養豐富，肉質細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經粉碎，沉淀蛋白質、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經沉淀蛋白質、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結果分析

依據前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛生標準中規定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產品常規監測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創新導報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）

摘 要：以離子色譜法測定地產銀魚中亞硝酸鹽的含量，兼具選擇性好、靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性;所得結果低于國標的含量限制，符合食品安全要求。

關鍵詞：離子色譜;銀魚;亞硝酸鹽

亞硝酸鹽是一種廣泛存在于水體、蔬菜、加工食品等物質中的有害化學成份， 對人體具有一定的危害性。聯合國糧農及世界衛生組織專門委員會認為亞硝酸鹽的日攝入量應小于20 mg。國內外已報道測定亞硝酸鹽的方法有光度法、極譜法、流動注射分析光度法、催化電位法等[1-3]。

太湖銀魚與松江鱸魚、黃河鯉魚、長江鰣魚，并稱中國四大名魚。它營養豐富，肉質細膩，潔白鮮嫩，無鱗無刺，無骨無腸，無腥，含多種營養成分。姚可成在《食物本草》中評價之為“利水，潤肺，止咳”，《醫林纂要》中也有“補肺清金，滋陰，補虛勞”之說。

離子色譜法可用于對啤酒、白酒、蔬菜等樣品中常見無機陰離子的測定，歐盟將離子色譜法規定為肉制品中亞硝酸鹽檢測的標準方法。而用于對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量的測定，則尚未見諸報道。試樣經粉碎，沉淀蛋白質、除去脂肪和凈化后，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離后進行定量，具有選擇性好，靈敏度高的特點，具有較強的實用性和可操作性。

1 儀器試劑

1.1 儀器

離子色譜儀（ZCS-1100）;超聲波清洗儀;022 μm 水性濾膜針頭濾器;凈化柱。

1.2 試劑

超純水（電阻率>18.2 MΩ·cm）;NO2-標準液（1 000 mg/L，水基體）;NO3-標準液（1 000 mg/L，水基體）;乙酸（3 %）; NO2-和NO3-混合標準使用液（10.0 mg/L NO2-和10.0 mg/L NO3-）。

2 實驗部分

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac AS11-HC 4 mm×250 mm（帶IonPac AG11-HC 型保護柱4 mm×50 mm）。

流動相：DionexEG50自動淋洗發生器，OH-型。

淋洗液：氫氧化鉀，濃度為20 mmol，等度洗脫。

抑制器：DionexASRS 4 mm陰離子抑制劑，外加水抑制模式，抑制電流100 mA。

檢測器：電導檢測器，檢測池溫度為 30 ℃。

進樣體積：25 μL。

2.2 標準曲線

表1 標準曲線配制

進樣序號

保留時間

/min

峰面積/

μS·min-1

峰高/μS

ST1

6.014

0.023

0.125

ST2

6.014

0.038 9

0.215

ST5

6.014

0.101 2

0.567

ST10

6.017

0.207 7

1.173

ST20

6.007

0.433 5

2.447

移取亞硝酸鹽標準使用液，加水稀釋，制成系列標準溶液，含亞硝酸根離子濃度為0.00 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L，從低到高濃度依次進樣，得到上述各濃度標準溶液的色譜圖。以亞硝酸根離子濃度（mg/L）為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線[4]。結果見表1、圖1、圖2。

圖1 標準曲線（Correlation coefficient：0.998 9）

圖2 NO2- 濃度為0.5 mg/L時色譜圖

2.3 實驗步驟

用天平稱取樣品，破碎，加入少量二次水，超聲使充分溶解，經沉淀蛋白質、除去脂肪后，將上清液倒入25 mL容量瓶中，定容，混勻后過C18柱后過0.22 μm水性濾膜針頭濾器，棄去初濾液，使用離子色譜儀，外標法測得亞硝酸鹽的含量。

2.4 樣品檢測與結果分析

依據前述方法，對銀魚樣品進行測定，所得結果見圖3、表2。

圖3 銀魚NO2-濃度色譜圖

表2 銀魚制品NO2-濃度峰積分報告

序

號

保留時

間/min

峰

名稱

峰面

積/μS

·min-1

樣品

量/mg

·kg-1

Average

/mg

·kg-1

RSD

/%

1

5.82

NO2-

0.078

0.366 4

2

5.82

NO2-

0.082

0.385 9

3

5.82

NO2-

0.081

0.381 0

4

5.82

NO2-

0.079

0.371 30.3762.0

對銀魚樣品中亞硝酸鹽含量進行檢測，平均含量為為0.376 2 mg/kg，而我國強制性衛生標準中規定肉類食品中亞硝酸鹽的殘留量不得超過50 mg/kg，符合食品安全要求。

2.5 可靠性試驗

2.5.1 空白測試 用二次水代替樣品，其余步驟與上述實驗步驟一致，得空白含量為0.011 7 mg/kg，結果見圖4，表3。

圖4 空白NO2-濃度色譜圖

表3 空白NO2-濃度峰積分報告

序號

時間

/min

峰名稱

峰面積/

μS·min-1

峰高

/μS

樣品量/

mg·kg-1

1

6.01

NO2-

0.003

0.012

0.011 7

2.5.2 加標回收 添加標樣，其余步驟與實驗步驟一致，進行回收率實驗，結果見圖5，表4。實驗的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，表明方法具有較高的準確度。

圖5 Add色譜圖

3 討論

本實驗以地產銀魚為樣品，采用離子色譜法測定亞硝酸鹽的含量，結果為0.376 2 mg/kg，符合食品安全要求;方法的平均回收率為99.56%，RSD為0.7%，具有較高的準確度，可以作為太湖水域的系列水產品常規監測的方法。

參考文獻：

[1]

中華人民共和國衛生部. GB5009.33—2010.食品安全國家標準[s].北京：中國標準出版社，2010

[2] 郭麗娜，邢宇，胡婧.肉類制品中亞硝酸鹽殘留量的實驗測定分析[J].科技創新導報，2013（13）：12

[3] 周文斌.泡菜中亞硝酸鹽測定方法研究[J].食品科學，2006（02）：241-243

[4] 羅哲珠，丘婷婷，范江平，等.離子色譜法對食品中亞硝酸鹽檢測的研究和討論[J].廣東化工，2013（12）：81-182+195

（收稿日期：2014-11-26）