噻托溴銨對慢性阻塞性肺疾病患者肺功能及相關炎癥介質表達的影響

朱 娜 胡 鑫 黃 禹 楊春燕

解放軍第一七一醫院呼吸內科，江西九江 332000

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種以氣流受限呈進行性發展且不完全性可逆為特征的疾病，伴有炎性反應[1]。國內COPD患病率約為8.2%[2]，近年來發病率和病死率呈上升趨勢，嚴重影響了患者的生活質量，也給患者家庭及社會帶來較大的經濟負擔。 2006 年慢性阻塞性肺疾病全球倡議（GOLD）指出COPD 是能夠被預防和治療的，并認為使用吸入性長效支氣管擴張劑可延緩COPD患者病情的惡化，減輕患者的臨床癥狀[3]。長效支氣管擴張劑包括長效抗膽堿能藥物和長效P 受體激動劑[4]。 噻托溴銨（Tiotropium Bromide）為新型長效抗膽堿能藥物[5]，本研究探討其對COPD 患者肺功能及相關炎癥介質表達的影響。

1 資料與方法

1.1 病例納入與排除標準

病例納入標準：①既往無呼吸道感染、心血管疾病、支氣管哮喘病等其他肺部疾病；②近半個月內未使用其他支氣管擴張劑或糖皮質激素者；③所有患者均簽署知情同意書。 排除標準：①對噻托溴銨等抗膽堿藥物過敏者；②患有嚴重心臟、肝、腎等重要臟器疾病者；③患有高血壓、糖尿病等全身慢性疾病者；④孕婦或哺乳期婦女。

1.2 一般資料

選擇2013 年10 月～2014 年10 月解放軍第一七一醫院門診和住院部收治的中重度COPD 患者共100 例為研究對象，將其隨機分為兩組，觀察組和對照組，每組各50 例。所有研究對象均符合中華醫學會呼吸病學分會COPD 學組制訂的COPD 診治指南[6]，診斷標準按照GOPD 診斷標準[7]。 所選患者均為中重度COPD 患者，肺功能符合如下診斷標準[8]：第1 秒用力呼氣量占用力肺活量的百分比（FEV1/FVC）均小于70%。 中度患者：50%≤第1 秒用力呼氣量 （FEV1）＜80%預計值，重度患者：30%≤FEV1＜50%預計值。對照組中男31 例，女19 例；年齡40～78 歲，平均（64.3±6.9）歲；其中中度COPD 患者29 例，重度COPD 患者21 例。觀察組中男33 例，女17 例；年齡41～79 歲，平均（65.2±7.1）歲；其中中度COPD 患者30 例，重度COPD患者20 例。 兩組患者性別比、年齡、病情等一般資料比較，差異無統計學意義（P ＞0.05），具有可比性。

1.3 方法

對照組：常規治療，吸入糖皮質激素，口服茶堿，急性發作時吸入短效β 激動劑予以緩解。 觀察組：在對照組治療的基礎上吸入噻托溴銨（商品名：天晴速樂， 正大天晴藥業集團股份有限公司， 批號20060454）18 μg，1 次/d。 2 個月為1 個療程。 治療期間禁止使用其他抗膽堿能藥物。

1.4 觀察指標及其檢測方法

1.4.1 肺功能檢測 使用日本CHEST 肺功能儀檢測患者肺功能。具體方法：分別檢測治療前、治療后2 個月FEV1、FEV1/FVC，FEV1占預計值的百分比。注意事項：①為確保檢查的順利進行以及獲得可靠的檢測結果，患者在檢查之前需要練習用口：深吸氣，然后快速用爆發力吹氣并持續吹氣6 s。 ②支氣管激發試驗和支氣管擴張試驗按要求需要停用相應支氣管擴張劑。③支氣管激發試驗、支氣管擴張試驗等會出現一些不良反應如胸悶、咳嗽、心悸、氣促、輕微手顫、面紅、頭痛、咽痛、頭暈等，一般休息后可自行緩解。 檢查時需做好處理不良反應的準備工作。

1.4.2 運動耐力檢測 以6 min 步行距離（6MWD）觀察患者治療后運動耐力改變情況。 具體如下：依據2002年美國胸科學會提出的六分鐘步行試驗指南[9]，在長35 m 的走廊里進行檢測。 試驗前給患者講解清楚試驗過程，并且排除干擾。 檢測開始后患者在走廊里盡力行走，記錄患者在6 min 內能夠完成的最遠距離。1.4.3 血清炎癥介質檢測 分別于治療前、治療后2 個月空腹抽取靜脈血4 mL，于試管中低溫離心，取上清血清，-20℃冷凍保存，待統一測定血清中白介素（IL）-8、單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）的濃度。 采用酶聯免疫吸附測定（ELISA）試劑盒， 試劑盒購自北京普爾偉業生物科技有限公司，檢測方法嚴格按照試劑盒說明書操作。ELISA 法具體操作步驟：①標準品稀釋：按照試劑盒操作說明。②加樣：分別設空白孔對照孔（空白對照孔不加樣品以及酶標試劑，其他步驟均相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標板上準確加入標準品50 μL，待測樣品孔中加入樣品稀釋液40 μL 和待測樣品10 μL（樣品稀釋5 倍）。③溫育：封板膜封板后置37°C 孵育30 min。 ④配液：將洗滌液按照使用說明用蒸餾水稀釋適當倍數后備用。⑤洗滌：揭掉封板膜，甩去液體，每孔加200 μL 洗滌液，靜置30 s 后棄去，重復5 次，拍干。 ⑥加酶：處空白孔外，每孔加入酶標試劑50 μL。 ⑦溫育：同操作步驟3。⑧洗滌：同操作步驟5。⑨顯色：每孔先加入顯色劑A 50 μL，再加入顯色劑B 50 μL，搖床上混勻，37°C 避光顯色15 min。⑩終止：每孔加終止液50 μL，反應終止。 11○測定：以空白孔為基準，450 nm 波長下測量各孔的OD 值。

1.5 統計學方法

采用SPSS 16.0 軟件進行統計分析， 計量資料以均數±標準差（s）表示，采用t 檢驗，以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療前后肺功能指標比較

兩組患者治 療前FEV1、FEV1/FVC、FEV1占預計值的百分比比較，差異均無統計學意義（P ＞0.05）。治療后兩組患者肺功能FEV1、FEV1/FVC、FEV1占預計值的百分比均較治療前顯著增加，差異有統計學意義（P ＜0.05）。 觀察組治療后FEV1、FEV1/FVC、FEV1%預計值明顯高于對照組，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表1。

2.2 兩組治療前后運動耐力變化比較

治療前，對照組和觀察組平均6 min 步行距離分別為（272.6±42.1）、（271.7±40.0）m，差異無統計學意義（P ＞0.05）。 治療后對照組和觀察組平均6 min 步行距離[（304.0±45.2）、（349.0±45.2）m]均較治療前顯著增加，差異有統計學意義（P ＜0.05），且觀察組較對照組增加更明顯（P ＜0.05）。 見圖1。

表1 兩組治療前后肺功能指標比較（s）

表1 兩組治療前后肺功能指標比較（s）

注：FEV1：第1 秒用力呼氣量：FVC：用力肺活量

組別 例數 FEV1（L）治療前 治療后 t 值 P 值FEV1/FVC（%）治療前 治療后 t 值 P 值觀察組對照組t 值P 值50 50 1.31±0.50 1.18±0.60 0.98＞0.05 1.58±0.75 1.22±0.72 8.14＜0.05 5.32 4.98＜0.05＜0.05 47.87±13.23 47.67±9.08 0.92＞0.05 55.90±15.07 50.86±7.89 9.23＜0.05 4.21 3.87＜0.05＜0.05 FEV1 占預計值的百分比（%）治療前 治療后 t 值 P 值37.25±18.91 31.22±18.73 0.58＞0.05 44.20±0.78 31.78±0.72 9.30＜0.05 5.20 6.06＜0.05＜0.05

圖1 兩組治療前后運動耐力變化比較

2.3 血清炎癥介質比較

兩組患者治療前血清IL-8、MCP-1 和TNF-α 水平比較差異無統計學意義（P ＞0.05）。 兩組患者治療后血清IL-8、MCP-1 和TNF-α 水平均顯著低于治療前（P ＜0.05）， 觀察組比對照組效果更加顯著 （P ＜0.05）。 見表2。

3 討論

COPD 患者肺組織以及氣道中的M 受體減少，膽堿能性氣道收縮致使氣道阻塞[10]，因此抗膽堿能藥物在治療COPD 中發揮了重要作用。噻托溴銨為新型抗膽堿藥物，被GOLD 推薦作為COPD 患者的基礎用藥[3]，其與內源性ACH 競爭性結合M3 受體而選擇性拮抗M3 受體功能從而具有治療效果[11]，因此它較其他抗膽堿能藥物有更好的治療效果。

肺功能檢查被認為是診斷COPD 的“金標準”[12]，COPD 患者由于氣道和肺泡壁損壞，肺的彈性回縮能力降低，引起FEV1和FVC 下降[13]。 本次研究數據表明， 觀察組給予噻托溴銨治療后FEV1、FEV1/FVC 均較治療前顯著提高（P ＜0.05），與對照組比較，療效顯著（P ＜0.05），提示噻托溴銨對COPD 的治療效果還是很明顯的。

表2 兩組治療前后血清炎癥介質水平比較（ng/mL，s）

表2 兩組治療前后血清炎癥介質水平比較（ng/mL，s）

注：IL-8：白介素-8；MCP-1：單核細胞趨化蛋白-1；TNF-α：腫瘤壞死因子α

組別 例數IL-8治療前 治療后 t 值 P 值MCP-1治療前 治療后 t 值 P 值觀察組對照組t 值P 值50 50 0.82±0.29 0.84±0.30 1.32＞0.05 0.31±0.26 0.78±0.21 10.14＜0.05 11.32 14.98＜0.05＜0.05 39.05±13.50 41.30±11.20 1.56＞0.05 39.05±13.50 41.30±11.20 1.56＞0.05 9.21 12.87＜0.05＜0.05 TNF-α治療前 治療后 t 值 P 值79.56±8.31 80.96±7.42 0.98＞0.05 65.17±5.81 71.28±5.37 10.34＜0.05 8.20 9.06＜0.05＜0.05

6 min 步行距離檢測方法安全、無創、易行，已在臨床上廣泛應用于反映患者的運動耐量，以此了解患者的呼吸系統狀況及全身狀況[14-16]。 本研究分別在治療前后對患者進行6 min 步行距離測試，結果發現治療之前兩組患者步行最遠距離無顯著性差異（P ＜0.05），治療2 個月后觀察組患者步行最遠距離顯著大于對照組（P ＜0.05），說明噻托溴銨可以很好地改善患者的呼吸系統，提高患者的運動耐量。 同時，由于6 min步行距離檢測方法可以評價患者的全身狀況，包括神經系統、呼吸系統、心血管系統等器官和系統的功能狀況， 是比較全面了解患者整體生命質量的指標，因此可以看出噻托溴銨對患者的治療效果很理想。

炎性因子在COPD 的發病中起著非常重要的作用，巨噬細胞可產生細胞因子TNF-α，進而刺激氣道單核細胞和中性粒細胞等釋放IL-8，誘導炎性反應[17]。MCP-1 是一種單核細胞趨化因子， 對炎癥細胞有重要的趨化作用[18]。 有學者認為炎性因子可在一定程度上反映肺功能，可作為COPD 病情的判斷指標[19-22]。噻托溴銨還可以抑制炎性反應來發揮治療COPD 的作用[23]。本研究結果表明，觀察組給予噻托溴銨治療后可顯著減少患者血清中IL-8、MCP-1、TNF-α 濃度，與對照組比較差異有統計學意義（P ＜0.05），說明噻托溴銨明顯減輕了患者的炎性反應，全身抗炎作用顯著。

綜上所述， 吸入噻托溴銨具有顯著的抗炎作用，可有效改善COPD 患者肺功能， 增加患者運動耐力，可考慮作為治療COPD 的首選用藥。

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