MDR1基因C3435T多態性與癲患者耐藥性關系的Meta分析

董曉敏，蔣巧俐，吳建華

(武漢大學中南醫院1.骨科；2.藥學部，武漢 430071)

董曉敏1，蔣巧俐2，吳建華2

(武漢大學中南醫院1.骨科；2.藥學部，武漢 430071)

目的 評價多藥耐藥基因1(MDR1)C3435T多態性與癲患者耐藥性的關系。方法 全面檢索關于MDR1基因C3435T多態性與癲患者耐藥性的原始研究，將符合入選標準的研究納入，采用Meta分析方法對所納入的研究進行綜合分析。結果 共納入非隨機對照研究15項，其中耐藥組1 284例，控制組1 620例。未發現發表偏倚，異質性檢驗中發現CC/(CT+TT)、CT/(CC+TT)和TT/(CC+CT)基因型研究中存在異質性，故采用校正后的隨機效應模型(D-L法)進行數據合并。CC/(CT+TT)(OR：1.47，95%CI：0.98～2.22)；CT/(CC+TT)(OR：0.84，95%CI：0.66～1.06)；TT/(CC+CT)(OR：0.76，95%CI：0.50～1.17)。亞組分析顯示：成人CC/(CT+TT)(OR：1.73，95%CI：1.03～2.91)；兒童CC/(CT+TT)(OR：0.91，95%CI：0.67～1.23)；成人TT/(CC+CT)(OR：0.69，95%CI：0.40～1.20)；兒童TT/(CC+CT)(OR：1.01，95%CI：0.60～1.71)；成人CT/(CC+TT)(OR：0.76，95%CI：0.56～1.04)；兒童CT/(CC+TT)(OR：1.11，95%CI：0.82～1.49)，均P>0.05。結論 目前尚沒有充分的證據表明MDR1基因C3435T的基因型與癲耐藥性有關。

多藥耐藥基因；多態性，基因；耐藥；癲；Meta分析

由于這些AEDs有不同的作用機制，因此這種現象可能由非特異性機制所介導。多數AEDs是多藥耐藥基因1(multidrug resistance gene 1，MDR1)及其編碼產物 P-糖蛋白(P- glycoprotein，P-gp)的底物[1]，而MDR1/ P-gp在腦組織尤其在血腦屏障的表達增強，可將進入腦實質的AEDs泵出，導致進入癲病灶部位AEDs的濃度降低，從而導致患者對AEDs產生耐藥性[2]。因此影響P-gp蛋白表達的因素可能與癲耐藥性產生有關。研究表明，MDR1基因單核苷酸多態性可能影響P-gp的表達及功能，其中外顯子26的C3435T位點的突變與P-gp的表達及活性有關，所以MDRI基因C3435T單核苷酸多態性可能與癲耐藥有關[3-4]。目前國內外已有多項關于MDR1基因C3435T多態性與癲耐藥相關性的研究，但其結論并不一致。筆者應用Meta分析評價MDRI基因C3435T單核苷酸多態性與癲耐藥性的關系。

1 資料與方法

1.1 資料來源 在中國期刊全文數據庫(CNKI)、重慶維普數據庫、萬方數據庫以及優秀碩博論文庫，用“多藥耐藥基因1”“MDR1” “ABCB1” “基因多態性” “癲”作為題名或關鍵詞聯合檢索獲得全部有關MDR1與癲的中文文獻；同時以“MDR1”“ABCB1”“epilepsy”“polymorphism”，作為關鍵詞聯合檢索PubMed和EMbase等數據庫，獲得發表在外文期刊上的研究。并通過文獻追溯途徑收集關于MDR1基因多態性與癲耐藥性的相關研究。

1.2 文獻納入標準 ①2014年3月1日前在國內外公開發表的、并提供原始數據的有關中國人群MDR1基因C3435T多態性與癲耐藥性的相關研究，并且對照組為癲藥物控制組；② 直接或間接給出統計指標比值比(odds ratio，OR)或率比(rate ratio，RR)及95%置信區間(confidence interval，CI)，以及不同基因型的頻率分布資料；③剔除重復發表、重復收錄或資料雷同的研究；④觀察對象為中國漢族人群；⑤ 對所納入的文獻根據非隨機對照臨床試驗質量評價標準進行文獻質量評價，總分為12分，剔除評分低于4分的文獻。

1.3 數據提取與統計學處理 ①由3人分別評價文獻的質量。采用Stata12.0版統計軟件包進行數據分析。觀察指標為MDR1基因C3435T 的CC基因型/(CT+TT)基因型、CT基因型/(CC+TT)基因型及TT基因型/(CT+CC)基因型的OR值及其95%CI；②運用Begg’s檢驗來評估發表偏倚。③根據各個研究的異質性檢驗結果，選用相應的數據合并方法。如各研究結果間無異質性，則采用Mantel-Haenszel固定效應模型進行數據合并，計算合并OR值及其95%CI；如研究結果間存在異質性，則采用校正后的隨機效應模型(D-L法)進行數據合并，計算合并OR值及其95%CI。

2 結果

2.1 文獻檢索入選結果 在本次研究中，共檢索出54篇有關于中國漢族人群MDR1多態性與癲耐藥性關系的文獻。其中20篇與所研究主題無關而剔除，1篇未提供癲藥物控制組的基因分型而剔除，15篇因CNKI和PubMed 重復收錄或資料雷同而剔除。在對Hardy-Weinberg平衡檢驗中發現：有4項研究基因分布不符合Hardy-Weinberg平衡，并且該4項研究樣本量較小，并且未對此進行必要的說明及討論，并且文獻質量評價標準均低于4分，剔除。而KWAN等[5]的研究中，筆者發現其癲控制組基因分布不符合Hardy-Weinberg平衡(表1)。一般情況下在研究候選基因與復雜疾病的遺傳關聯研究當中，常要求對照組符合Hardy-Weinberg平衡，否則會認為其研究的樣本代表性差。KWAN等[5]的研究樣本量較大，且對控制組納入的人群要超過耐藥組的人群，而且KWAN等[5]對其研究對象采用3種方法檢測基因分型，因此筆者還是將其納入該次Meta的分析中。最后經過嚴格的篩選，共有15篇文獻進入數據合并分析。15篇研究均為非隨機對照研究。共累積耐藥組1 284例，控制組1 620例。15篇研究的基本情況見表1。

2.2 發表偏倚評估 產生發表偏倚的主要原因是陽性結果的研究易發表，陰性結果的研究不易發表或者研究者本身就放棄做進一步研究，這可能導致部分陰性結果的研究未發表而最終對Meta分析的結果產生影響。為了客觀地評價有無發表性偏倚。Z=0.05(continuity corrected)、Pr >|Z|=1.000(continuity corrected)，1.000>0.05故不能認為有顯著性發表偏倚，因此納入的文獻可以進行Meta分析(圖1)。

2.3 異質性檢驗 CC/(CT+TT)研究中的χ2=81.83，P<0.001；成人χ2=65.7，P<0.001；兒童χ2=2.7，P>0.05；TT/(CC+CT)研究中的χ2=52.84，P<0.001，成人χ2=46.96，P<0.001；兒童χ2=4.29，P>0.05；CT/(CC+TT)研究中的χ2=31.75，P<0.001，成人χ2=26.33，P<0.001；兒童χ2=0.45，P>0.05；因此該項研究存在異質性尤其來源于成人的相關研究。

2.4 數據合并 由于該項研究異質性明顯，故采用校正后的隨機效應模型(D-L法)進行數據合并。CC/(CT+TT)基因型OR值為1.47，95%CI為0.98～2.22；TT/(CC+CT)基因型OR值為0.76，95%CI為0.50～1.17；CT/(CC+TT)基因型的OR值為0.84，95%CI為0.66～1.06。這3種基因型合并的OR值及其95%CI包含中線，均P>0.05，說明OR值差異無統計學意義(圖2～4)。因此尚不能認為中國人群MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性有關。亞組分析顯示：成人CC/(CT+TT)(OR：1.73，95%CI：1.03～2.91)；兒童CC/(CT+TT)(OR：0.91，95%CI：0.67～1.23)；成人TT/(CC+CT)(OR：0.69，95%CI：0.40～1.20)；兒童TT/(CC+CT)(OR：1.01，95%CI：0.60～1.71)；成人CT/(CC+TT)(OR：0.76，95%CI：0.56～1.04)；兒童CT/(CC+TT)(OR：1.11，95%CI：0.82～1.49)。均P>0.05。因此MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性無關(圖2～4)。

表1 入選的15篇研究的基本情況

圖1 兩組患者MDR1基因C3435T CC基因型與(CT+TT)基因型比較的Begg漏斗圖

3 討論

腦組織中過度表達有關。目前，對于MDR1基因多態性和P-gp的水平及功能之間的關系尚缺乏足夠的生物學證據，多數研究認為，定位在MDR1基因26號外顯子的C3435T位點的基因多態性與MDR1基因/P-gp蛋白的表達及功能有明顯的相關性[3]。因此推測該基因位點的多態性可能與癲耐藥性有關。但近年來有關于MDR1基因C3435T多態性與癲耐藥性研究結論迵異。因此筆者利用Meta 分析方法對中國漢族人群MDR1基因C3435T多態性與癲耐藥性做綜合定量評價。結果顯示在中國漢族人群中MDR1基因C3435T的多態性與癲耐藥性無關。

本研究存在非常明顯的異質性。推測可能與以下幾個因素有關：①研究對象差異明顯：有4項研究的對象為兒童癲患者[8-11]，有1項研究的對象為顳葉性癲患者[12]，這種各項研究間研究對象的差異，加大了各研究間的異質性。因此筆者對研究對象進行了亞組分析，結果顯示：在中國漢族人群中無論是成人還是兒童MDR1 C3435T基因型與癲耐藥性無關。②癲耐藥組、控制組的標準不一：目前，國際上對耐藥性癲的定義尚無統一的標準。對于耐藥性何時出現，經過多少種AEDs，發作頻率的界定，需要多長時間才能確認這種耐藥狀況是持續存在的過程等尚有爭議。從而導致納入的研究中受試個體很難保持同質性。這進一步加大了各研究間的異質性。③MDR1基因分析方法：在納入的15項研究中有較多的研究沒有進行基因分型確證試驗，因此可能存在基因分型錯誤，而影響研究結果。

圖2 兩組患者MDR1基因C3435T CC基因型與T等位基因攜帶者(CT+TT)比較的森林圖

圖3 兩組患者MDR1基因C3435T TT基因型與C等位基因攜帶者(CC+CT)比較的森林圖

圖4 癲耐藥組和控制組MDR1基因C3435T CT基因型與(CC+TT)基因型比較的森林圖

綜上所述，由于本研究存在明顯的異質性，且納入的樣本量較小，因此對本研究的結論應謹慎對待。通過Meta分析發現：①目前尚沒有充分的證據表明在中國人群中MDR1基因C3435T的基因型與癲耐藥性有關。②建議在該類研究中應增大樣本量，統一標準，盡可能消除偏差和混雜因素，同時進一步提高實驗設計的細致性和科學性，在此基礎上更新Meta分析才有可能得出較確切的結論。

[1] KWAN P，BRODIE M J.Potential role of drug transporters in the pathogenesis of medically intractable epilepsy[J].Epilepsia，2005，46(2)：224-235.

[2] LOSCHER W，POTSCHKA H.Drug resistance in brain dis-eases and the role of drug efflux transporters[J].Nat Rev Neurosci，2005，6(8)：591-602.

[3] HOFFMEYER S，BURK O，VON RICHTER O，et al.Fun-ctional polymorphisms of the human multidrug-resistance gene：multiple sequence variations and correlation of one allele with P-glycoprotein expression and activityinvivo[J].Proc Natl Acad Sci U S A，2000，97(7)：3473-3478.

[4] SIDDIQUI A，KERB R，WEALE M E，et al.Association of multidrug resistance in epilepsy with a polymorphism in the drug-transporter gene ABCB1[J].N Engl J Med，2003，348(15)：1442-1448.

[5] KWAN P，BAUM L，WONG V，et al.Association between ABCB1 C3435T polymorphism and drug-resistant epilepsy in Han Chinese[J].Epilepsy Behav，2007，11(1)：112-117.

[6] LU Y，YAN Y，WANG X F.Antiepileptic drug-induced mu-ltidrug resistance P-glycoprotein overexpression in astrocytes cultured from rat brains[J].Chin Med J(Engl)，2004，117(11)：1682-1686.

[6] HUNG C C，TAI J J，LIN C J，et al.Complex haplotypic effects of the ABCB1 gene on epilepsy treatment response[J].Pharmacogenomics，2005，6(4)：411-417.

[7] 盧強，吳立文.中國漢族人群中難治性顳葉癲與MDR1基因多態性關系的研究/藥物難治性顳葉癲危險因素分析[D].北京：中國醫學科學院中國協和醫科大學，2006：1-20.

[8] 陸駿超，洪震.MDR1、MRP2基因多態性在癲患者中的分布及其與癲病耐藥的相關性研究[D].上海： 復旦大學，2007：1-30.

[9] 陳黎，劉昌勤，胡雁，等.兒童癲對藥物反應性與多藥耐藥基因 MDR1C3435T多態性的相關性研究[J].中國當代兒科雜志，2007，9(1)：11-14.

[10] 王水有，高峰，夏哲智，等.兒童難治性癲與MDR1 基因C3435T多態性的相關性[J].浙江醫學，2008，30(12)：1307-1312.

[11] 高萱，周水珍，郭倩，等.兒童難治性癲MDR1基因多態性研究[J].臨床兒科雜志，2009，27(11)：1014-1018.

[12] 郭桂梅，郭穎杰，林衛紅，等.MDR1C3435T基因多態性與抗癲藥卡馬西平療效的相關性研究[J].中風與神經疾病雜志，2010，27(2)：128-130.

[13] 丁媛媛，楊凡，劉靜，等.多藥耐藥基因單倍體對中國癲患者丙戊酸鈉血藥濃度的影響[J].中國臨床藥理學與治療學，2010，15(11)：1237-1272.

[14] 狄晴，蔣穎，張穎冬.難治性顳葉癲與多藥耐藥基因1C3435T多態性的相關性研究[C]//中華醫學會第十三次全國神經病學學術會議論文匯編.北京：中華醫學會神經病學分會，2010： 405.

[15] DONG L，LUO R，TONG Y，et al.Lack of association bet-ween ABCB1 gene polymorphisms and pharmacoresistant epilepsy：an analysis in a western Chinese pediatric population[J].Brain Res，2011，139(1)： 114-124.

[16] MENG H M，GUO G，REN J，et al.Effects of ABCB1 poly-morphisms on plasma carbamazepine concentrations and pharmacoresistance in Chinese patients with epilepsy[J].Epilepsy Behav，2011，21(1)： 27-30.

[17] 王小燕，林若飛，史道華，等.多藥耐藥基因1 C3435T 多態性與癲耐藥的關聯性研究[J].現代生物醫學進展，2011，11(14)：2717-2719.

[18] 董通，許賢瑞，齊明山，等.回、漢族癲患者ABCB1基因C3435T多態性與癲耐藥的相關性研究[J].中風與神經疾病雜志，2011，28(3)：237-241.

[19] 楊美蘭，李濤，黃映華，等.多藥耐藥基因多態性及其表達物與抗癲藥療效的相關性研究[J].疑難病雜志，2012，11(8)：594-596.

《醫藥導報》對論文中實驗動物描述的要求

根據國家科學技術部1988年頒布的《實驗動物管理條例》和衛生部1998年頒布的《醫學動物管理實施細則》，《醫藥導報》雜志對論文中有關實驗動物的描述，要求描述以下事項：①品種、品系及亞系的確切名稱；②遺傳背景或其來源；③微生物檢測狀況；④性別、年齡、體質量；⑤質量等級及合格證書編號；⑥飼養環境和實驗環境(包括溫度、相對濕度、送風、光照等條件，飼料、飲水等情況)；⑦健康狀況；⑧對動物實驗的處理方式。

醫學實驗動物分為四級：一級為普通級；二級為清潔級；三級為無特定病原體(SPF)級；四級為無菌級(包括悉生動物)。

《醫藥導報》編輯部

2014-07-04

2014-09-23

董曉敏(1987-)，女，遼寧恒仁人，護師，學士，主要從事醫院護理研究。電話：027-67813116，E-mail：283463059@qq.com。

吳建華(1981-)，男，安徽寧國人，主管藥師，碩士，主要從事臨床藥學研究。電話：027-67813199，E-mail：wujianhua122012@126.com。

R971.6；R969.3

B

1004-0781(2015)09-1234-05

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.09.032