野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力

羅爽妍，王 超，段翰英*，羅堯欣，虞 兵

（1.暨南大學食品科學與工程系，廣東 廣州 510632；2.暨南大學-薩斯喀切溫大學 油料生物煉制與營養聯合實驗室，廣東 廣州 510632）

野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力

羅爽妍1,2，王 超1,2，段翰英1,*，羅堯欣1，虞 兵1

（1.暨南大學食品科學與工程系，廣東 廣州 510632；2.暨南大學-薩斯喀切溫大學 油料生物煉制與營養聯合實驗室，廣東 廣州 510632）

本實驗研究了野生桃金娘（Rhodomyrtus tomentosa）的抗氧化能力、總多酚含量、總黃酮含量、抗壞血酸含量和花青素類成分。采用超高效液相串聯光電二極管陣列（photo-diode array，PDA）檢測器和離子肼質譜法（ultra performance liquid chromatography coupled to photo-diode array and ion-trap mass spectrometry，UPLC-PDAIT-MS）鑒定花青素類化合物，通過高通量的自由基清除方法測定抗氧化能力。結果表明：野生桃金娘具有較高的抗氧化能力。每克桃金娘的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力相當于67.2μmol的抗壞血酸和28.5μmol沒食子酸；過氧化氫自由基清除能力（PSC單位）相當于23.2μmol的抗壞血酸和14.3μmol沒食子酸；2,2’-聯氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽（2,2’-azinobis（3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid） ammonium salt，ABTS）自由基（ABTS+·）清除能力相當于30.4μmol的抗壞血酸和7.8μmol沒食子酸；對三價鐵的還原能力相當于28.7μmol的抗壞血酸和3.1μmol沒食子酸。野生桃金娘的總多酚含量和總黃酮含量分別是4 976 mg沒食子酸/100 g（以干質量計）和49.7 mg兒茶酚/100 g（以干質量計），總抗壞血酸含量是9 mg/100 g（以鮮質量計）。總花青素含量相當于414 mg矢車菊素/100 g（以干質量計），共有飛燕草素3-O-葡萄糖苷等7種花青素類化合物被鑒別出來。

桃金娘；花青素；抗氧化成分；抗氧化能力

花青素是分布最廣的多酚類物質[1]，是食品工業中應用最廣的天然色素。它具有降低慢性疾病發病率的功能[2]，還能預防乳腺癌、腸癌、胰腺癌、肺癌和前列腺癌[3]。目前已發現了6種基本糖苷類和酰基葡萄糖苷類花青素衍生物：天竺葵色素、矢車菊素、錦葵色素、飛燕草色素、芍藥色素和牽牛花色素[4]。

桃金娘（Rhodomyrtus tomentosa）屬桃金娘科，是亞熱帶常綠灌木叢植物，產于中國南部各省和南亞[5]。桃金娘屬于傳統中藥中的滋補性藥物，其干果、根莖、葉子和種子可用于治療月經不調、更年期綜合征、肝炎、尿路感染、貧血、失眠癥和耳鳴[6]。桃金娘的果實呈深紫色，具有誘人的顏色和氣味，且果實的產量相當高。因此，在廣東省翁源縣，桃金娘盡管沒有經過常規的種植，其年產量也達3 000～5 000 t。桃金娘果實具有潛在改善人體健康的功能，且是花青素、多酚、抗壞血酸和其他抗氧化物質的豐富來源，但其貯藏壽命短且受深加工條件的限制，只有10%的果實能用于鮮食，其余90%的果實都被丟棄。目前，有關桃金娘果實的抗氧化活性報道較少[7]。

本實驗對野生成熟桃金娘的抗氧化能力[包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力、過氧化物自由基（ROO·）清除能力、2,2’-聯苯-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽自由基（2,2’-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）radical，ABTS+·）清除能力和鐵離子還原能力（ferric reducing antioxidant power，FRAP）]、總多酚含量、總黃酮含量、抗壞血酸含量和花青素類成分進行研究，并用超高效液相串聯光電二極管陣列檢測器和離子肼質譜（ultra performance liquid chromatography coupled to photo-diode array and ion-trap mass spectrometry，UPLC-PDA-IT-MS）鑒定花青素類化合物。

1 材料與方法

1.1材料與試劑

桃金娘，主要產地為廣東省翁源縣（收獲時間為2014年9月）。鮮果用自來水沖洗干凈表皮的泥土后，立即放于-20℃中冷凍并于同日運至實驗室。果實進一步在液氮中用研缽和杵研磨成粉末并立即用冷凍干燥機干燥24 h。干燥后的樣品再次用攪拌機磨碎，后過200目篩并混合。混合粉末用聚乙烯管密封后保存于-80℃用于進一步分析。

液相色譜-質譜聯用儀（liquid chromatograph-mass spectrometer，LC-MS）超純水、甲醇、乙腈 德國默克公司；甲酸（純度≥99%） 美國Acros公司；Folin-酚試劑、抗壞血酸（純度≥99%）、1,4-二硫蘇糖醇（1,4-dithiothreitol，DTT）、2’,7’-二氯熒光素-二乙酸鹽（2’,7’-dichloroflorescein-diacetate，DCFH-DA）、ABTS、DPPH、2,4,6-三-（2-氮苯基）-1,3,5三嗪（2,4,6-tri-2-pyridinyl-1,3,5-triazine，TPTZ）、兒茶素美國Sigma公司；KCl、KH2PO3、Na2CO3、K2S2O8、沒食子酸、CH3COONa、乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）四鈉、FeCl3·6H2O、AlCl3、NaNO2、HCl、NaOH（分析試劑級） 天津大茂化學試劑公司；2,2’-偶氮二異丁基脒二鹽酸鹽（2,2’-azobis（2-amidinopropane）dihydrochloride，ABAP） 日本和光純藥工業株式會社。

1.2儀器與設備

FD-10冷凍干燥機 北京博醫康實驗儀器有限公司；SB-5200D75超聲波清洗機 寧波新藝超聲設備有限公司；LC-20AD/T高效液相色譜儀（檢測器SPD-M20A）日本島津公司；LTQ XL質譜（包括Accela 1250二元液相泵、自動進樣器、Accela PDA檢測器和Accela柱溫箱）、Fluoroskan Ascent熒光分析儀 美國賽默飛世爾科技公司；Victor X3全波長酶標儀 芬蘭Perkin-Elmer公司。

1.3方法

1.3.1矢車菊素葡萄糖苷儲備溶液的準備

取1 mg矢車菊素葡萄糖苷標準品溶于1 mL體積分數為90%的甲醇（含體積分數為0.5%的甲酸），超聲提取10 min。儲備液質量濃度為1 mg/mL，儲備液保存于-20℃備用。

1.3.2多酚類化合物的提取[8]

取100 mg的冷凍干燥粉末，溶于10 mL 90%甲醇（含0.5%甲酸）中，超聲提取10 min，6 000 r/min離心5 min后取上清液。按照上述方法重復提取沉淀物3次，直到上清液變為無色。混合所有的上清液，并在40℃旋轉蒸發甲醇。用3 mL 100%甲醇回收旋轉蒸發后的剩余物，后用0.45 nm的PTFE注射器式過濾器過濾提取物。提取物于-20℃保存備用。整個提取過程在避光櫥中進行。

1.3.3固相提取

在用UPLC-PDA-IT-MS測定花青素的組成前，需要用C18固相萃取柱對樣品進行預處理。使用前，先注入5 mL酸化甲醇（含0.1%甲酸）后用5 mL酸化水（含0.1%甲酸）激活萃取柱。提取物過柱后，用5 mL酸化水（含0.1%甲酸）將水溶性成分（還原糖、氨基酸和VC）沖洗出來。再用5 mL酸化甲醇（含0.1%甲酸）將酚類物質洗脫出。洗脫物用氮氣吹干后，再用1 mL酸化水（含0.1%甲酸）溶解。提取物于—20 ℃保存備用。

1.3.4總花青素含量的測定

運用pH-示差分光光度法[9]測定總花青素含量。矢車菊-3-葡萄糖苷在510 nm波長處的摩爾分子吸光系數為26 900 L/（cm·mol），分子質量為449.2 g/mol。總花青素含量以矢車菊-3-葡萄糖苷當量表示（mg/100 g，以干質量計）。

1.3.5總多酚含量的測定[10]

取20 ?L樣品提取物或者沒食子酸標準品溶液與1.6 mL水和100 ?L Folin-酚試劑混合，混合后室溫靜置8 min。然后加入300 ?L體積分數為20%的碳酸鈉溶液，混合并于室溫下放置2 h，在765 nm波長處用紫外-可見分光光度計測定吸光度。以沒食子酸質量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，得到回歸方程為y＝0.001x+0.004 3（R2＝0.999 3）。總多酚含量以沒食子酸當量（gallic acid equivalent，GAE）表示（mg GAE/100 g，以干質量計）。

1.3.6鑒別桃金娘中花青素類化合物

運用由Thermo LTQ XL質譜（包括Accela 1250二元液相泵，自動進樣器，Accela PDA檢測器和Accela柱溫箱）組成的UPLC-PDA-IT-MS鑒別花青素類化合物。色譜柱：Symmetry C18柱（150 mm×4.6 mm，5 ?m）進行花青素的色譜分離。色譜條件：流速：1 mL/min；流動相：A液為5%甲酸-水，B液為5%甲酸-乙腈。線性梯度洗脫：0～30 min，B液0～40%；30～32 min，B液40%～100%；32～38 min，回復到初始條件。進樣量：25 ?L；自動進樣器溫度：4℃；柱溫：40℃；PDA掃描波長：200～700 nm。UPLC洗出液以1∶5的比例被微分流閥分離，并連接于Thermo LTQ XL質譜儀上。質譜條件：電離方式：ESI+；噴霧電壓：3.5 kV；金屬毛細管溫度：350℃；鞘氣壓力：70 arb；輔助氣壓力：15 arb；掃描模式：全掃描方式（m/z150～2 000），氦氣作鞘氣，氮氣作輔助氣。為了獲取MS/MS信息，所采用的碰撞能量為20。取1 ?g/mL矢車菊素葡萄糖苷標準溶液，以10 ?L/min的速率注入離子源，在ESI+模式下，分別對噴霧電壓、金屬毛細管溫度、鞘氣壓力、輔助氣壓力和碰撞能量等參數進行優化。

1.3.7抗壞血酸含量測定[11]

取10 g冷凍保藏的桃金娘在室溫下解凍15 min，然后加入40 mL 0.1%DTT，均質機中均質10 min，后以6 000 r/min的速率離心10 min。收集上清液并用0.1 mol/L NaOH調節pH值至5～5.2。在室溫下放置2 h。進行HPLC檢測前，樣品用0.45 nm的PTFE注射器式過濾器過濾。

高效液相色譜儀色譜條件：色譜柱：Symmetry C18柱（150 mm×4.6 mm，3.5 ?m）；流速：0.5 mL/min；流動相：2%KH2PO4（pH 2.5，含0.1%DTT）；洗脫時間：15 min；進樣量：20 ?L；進樣器溫度：25℃；柱溫：40℃；檢測波長：243 nm。

1.3.8抗氧化活性測定

1.3.8.1過氧化物自由基（ROO·）清除能力[12]

通過在1 mmol/L KOH中水解55 ?L 6 mmol/L的DCFH-DA制得DCFH溶液，DCFH-DA與KOH的體積比為1∶10。在水解液中加入100 mmol/L磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）至總體積為10 mL。每天用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）新鮮配制200 mmol/L ABAP工作液并在4℃條件下避光保存。用50%丙酮配制1 mg/mL的抗壞血酸溶液和沒食子酸溶液并保存在4℃條件下。使用熒光分析儀進行高通量實驗。在檢測過程中96孔板需蓋上蓋以防溶液蒸發。每一組反應混合物都包含100 ?L不同質量濃度的樣品，本實驗中取了6個不同質量濃度的桃金娘樣品（0.05、0.1、0.15、0.3、0.4 mg/mL）。用移液槍在每一個孔中加入50 ?L DCFH后在暗盒中2 000 r/min振蕩10 s以保證混合均勻。再加入50 ?L ABAP用于激發反應，并在自動振蕩儀上振蕩均勻。在加入激發劑（ABAP）后立刻測定熒光吸收值，激發波長485 nm，發射波長538 nm。每一96孔板連續讀值1 h，時間間隔為1 min。每一反應混合物的總體積是200 ?L，操作在37℃中進行，每一樣品重復3次。空白值與對照值在相同條件下測量。空白值包括100 ?L 50%丙酮和100 ?L 100 mmol/L磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）。對照值包括100 ?L 50%丙酮，50 ?L DCFH和50 ?L ABAP。使用Workout 2.5軟件進行數據收集。熒光值為3次實驗的平均值。控制值和樣品值都在40 min時達到最大吸收。ROO·抑制能力（PSC單位）根據公式（1）進行計算：

式中：AUC樣品和AUC對照分別表示樣品和對照的曲線下面積。

樣品、對照和抗壞血酸、沒食子酸標準品的AUC值通過公式（2）進行計算。

式中：f0為在0 min時樣品初始熒光強度、對照值減去空白的初始熒光強度；fi為在反應時間i時樣品熒光強度、對照減去空白熒光強度，這里i=40 min。

AUC值使用Microsoft Excel軟件進行計算。使用半最大效應濃度（concentration for 50%of maximal effect，EC50）（PSC單位＝0.5）來表示ROO·抑制能力，EC50以抗壞血酸和GAE表示。

1.3.8.2 ABTS+·清除能力[13]

用50%丙酮配制6.25 mmol/L的抗壞血酸儲備液和5 mmol/L的沒食子酸儲備液，并于4℃條件下保存。通過混合7 mmol/L ABTS儲備液和過硫酸鉀水溶液來制備ABTS+·，并使最終溶液里的過硫酸鉀濃度為2.5 mmol/L。待過硫酸鉀完全溶化后，將溶液置于室溫中避光保存16 h后再使用。在陽離子基生成后，所有的ABTS儲備液用95%乙醇稀釋7.5倍使其吸光度為0.7。新鮮的ABTS工作液需在每次測定前制備。將25 ?L、7個稀釋度的桃金娘提取物、抗壞血酸、沒食子酸及50%丙酮（作為空白）分別與200 ?L ABTS工作液混合，并用自動振蕩器混合均勻。然后立即使用Victor X3全波長酶標儀測定在734 nm波長處的吸光度。EC50來表示ABTS+·的清除能力，EC50以抗壞血酸和沒食子酸當量表示。

1.3.8.3 DPPH自由基清除能力[14]

0.625 mmol/L的DPPH儲備液需每月配制并于4℃條件下避光保存。通過用50%丙酮稀釋儲備液來配制0.208 mmol/L新鮮的DPPH工作液，工作液需當天使用配制。用50%丙酮配制6.25 mmol/L的抗壞血酸儲備液和5 mmol/L的沒食子酸儲備液，并于4℃條件下保存。將100 ?L、7個稀釋度的桃金娘提取物、抗壞血酸、沒食子酸及50%丙酮（作為空白）分別與100 ?L，0.208 mmol/L新鮮的DPPH工作液混合，并于室溫中避光保存40 min。然后立即使用Victor X3全波長酶標儀測定在515 nm波長處的吸光度。用EC50來表示DPPH自由基的清除能力，EC50以抗壞血酸和沒食子酸當量表示。

1.3.8.4 FRAP抗氧化能力[11]

將2.5 mL TPTZ溶液（90 mmol/L TPTZ溶于40 mmol/L HCl中）、25 mL醋酸鹽緩沖液（300 mmol/L，pH 3.6）和2.5 mL FeCl3·6H2O溶液（180 mmol/L）混合，并于37℃條件下反應4 min來制得FRAP試劑。用50%丙酮配制6.25 mmol/L的抗壞血酸儲備液和5 mmol/L的沒食子酸儲備液，并于4℃保存。將30 ?L、7個稀釋度的桃金娘提取物、抗壞血酸、沒食子酸及50%丙酮（作為空白）分別與100 ?L FRAP工作液及90 ?L蒸餾水混合均勻。然后立即使用Victor X3全波長酶標儀測定在593 nm波長處的吸光度。用EC50來表示FRAP的抗氧化能力，以抗壞血酸和沒食子酸當量表示。

1.3.9總黃酮含量測定[15]

分別取0.2 mL桃金娘提取物、兒茶酚標準溶液于50 mL容量瓶中，再加入10 mL體積分數為30%乙醇溶液和0.3 mL體積分數為5%NaNO2溶液。10 min后加入0.3 mL質量分數為10%AlCl3·6H2O溶液，再于室溫中反應10 min，后再加入4 mL 5%NaOH溶液。最后立即用蒸餾水稀釋溶液至50 mL，混合均勻。混合物放置10 min后用UV-1800紫外-可見分光光度計測定510 nm波長處的吸光度。以兒茶酚質量濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線，得到的回歸方程為：y＝0.104 9x-0.008 4（R2＝0.999 8），兒茶酚質量濃度范圍為0.4～6 mg/L。總黃酮含量以兒茶酚當量（catechol equivalent，CE）表示（mg CE/100 g，以干質量計）。

2 結果與分析

2.1 總花青素含量

為提高提取物中花青素的穩定性和達到最大提取率，采用酸性條件進行提取（90%甲醇中含0.5%甲酸）[16]。桃金娘中的總花青素含量是414 mg/100 g。為了便于與其他漿果類中的花青素含量進行比較，將干質量換算成濕質量，每100 g濕質量的桃金娘中總花青素的含量是78.6 mg/100 g（新鮮桃金娘的含水量是81%）。此含量與中國楊梅和一些醋栗相近[17-18]，但低于黑莓[19]。本實驗中的總花青素含量用矢車菊素3-O-葡萄糖苷當量表示，因為此化合物是桃金娘中花青素的主要存在形式。

2.2 桃金娘中花青素的組成

圖1 桃金娘的UPLC色譜圖Fig.1 UPLC chromatogram of anthocyanins in hill gooseberry (Rhodomyrtus tomentosa)

不同花青素類物質的鑒別基于其洗脫曲線、紫外可見光譜圖、LC-MS數據和文獻記載。通過圖1，采用優化的分離條件可以使桃金娘中的花青素物質完全基線分離。在520 nm波長處的高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）色譜圖中，檢測出7個花青素類化合物。桃金娘中花青素的分布見表1。質譜鑒定基于全掃描的正電噴霧模式和進一步的MS/MS實驗（圖2）。從桃金娘中花青素的質譜數據（表1）中看到，峰1母離子m/z為465處及最大的子離子m/z為303，表明其是飛燕草素3-O-己糖苷；峰2母離子m/z為449其最大的子離子m/z為287處，表明其為矢車菊素3-O-己糖苷；峰3母離子m/z為419及最大的子離子m/z為287，表明其為矢車菊素3-O-戊糖苷。峰4～7母離子m/z分別為479、433、463、493及最大的子離子m/z為317、271、301、331，表明它們分別是牽牛花色素、天竺葵色素、芍藥色素和錦葵色素己糖苷。除峰3以外，162質量單位的丟失相當于一分子己糖的分子質量。因此，共有7種不同的花青素被鑒別出來，分別為飛燕草素3-O-己糖苷、矢車菊素3-O-己糖苷、矢車菊素3-O-戊糖苷、牽牛色素3-O-己糖苷、天竺葵素3-O-己糖苷、芍藥色素3-O-己糖苷、錦葵色素3-O-己糖苷。根據Lai等[20]的報道，這里的己糖苷確定為葡萄糖苷。這些花青素的碎片特征與之前報道的單一或串聯四極質譜儀得到的數據相似。另外，桃金娘中花青素的洗脫順序與其他研究植物的文獻一致[21]。隨著極性的減小，花青素的保留時間會延長。通過計算峰面積百分比可知，矢車菊素3-O-葡萄糖苷的相對百分含量為61.0%，隨后的芍藥色素3-O-葡萄糖苷為17.7%，飛燕草素3-O-葡萄糖苷為12.8%，牽牛色素3-O-葡萄糖苷為3.9%，天竺葵素3-O-葡萄糖苷為2.2%，錦葵色素3-O-葡萄糖苷為2.0%，含量最少的矢車菊素3-O-戊糖苷為0.5%。

表1 桃金娘中花青素的色譜、質譜及光譜特征Table1 Chromatographic, mass spectral and spectroscopic characteristics of anthocyanins detected in hill gooseberry

圖2 桃金娘中主要花青素單體的MS/MS光譜圖Fig.2 MS/MS spectra of major anthocyanins in hill gooseberry (Rhodomyrtus tomentosa)

2.3 總多酚含量

桃金娘中的總多酚含量是4 976 mg GAE/100 g，此水平高于Huang等[7]的報道，其報道中產于太平山的桃金娘中總多酚含量是2 400 mg GAE/100 g。這些差異可能歸因于多種變量如產地、成熟度、不同的提取方法和其他。數據表明，產自翁源縣的桃金娘有與野櫻桃（4 210 mg GAE/100 g）具有相近的多酚含量，遠高于越橘（3 300～3 820 mg GAE/100 g）、黑醋栗（2 230～2 790 mg GAE/100 g）、波哥大越橘（2 910 mg GAE/100 g）、云莓（1 510～1 840 mg GAE/100 g）、越橘（2 600～2 780 mg GAE/100 g）、蔓越橘（2 200 mg GAE/100 g）、醋栗（1 320 mg GAE/100 g）、覆盆子（2 730～2 990 mg GAE/100 g）、紅醋栗（1 400 mg GAE/100 g）、花楸漿果（2 090 mg GAE/100 g）、草莓（1 600～2 410 mg GAE/100 g）[17]。

2.4 總抗壞血酸含量

桃金娘中的抗壞血酸含量是9 mg/100 g，此含量與Huang等[7]報道的相當。桃金娘中的總抗壞血酸含量與藍莓（9.7 mg/100 g）相近，但低于黑莓（21 mg/100 g）和黑加侖（181 mg/100 g）等[22]。

2.5 抗氧化活性

結果發現過氧化物自由基（PSC單位）清除能力為：抗壞血酸、沒食子酸和桃金娘的EC50分別是2.7、1.6μg/mL和0.66 mg/mL。桃金娘相當于23.2μmol抗壞血酸和14.3μmol沒食子酸量。基于EC50值，桃金娘過氧化物自由基清除能力明顯高于蘋果、蔓越橘、玉米、小麥、燕麥和稻谷，但低于葡萄和小麥[12]。

對DPPH自由基、ABTS+·和FRAP的實驗，EC50、抗壞血酸當量和沒食子酸當量見表2。ABTS+·清除能力的EC50：每克桃金娘相當于30.4μmol抗壞血酸和7.8μmol沒食子酸當量；FRAP還原能力的EC50：每克桃金娘相當于28.7μmol抗壞血酸和3.1μmol沒食子酸當量；DPPH自由基清除能力的EC50：每克桃金娘相當于67.2μmol抗壞血酸和28.5μmol沒食子酸當量。ABTS和DPPH方法測定的是抗氧化物清除ABTS+·或DPPH自由基的能力，而FRAP方法測定的是抗氧化物將黃色的Fe3+-TPTZ化合物還原成藍色的Fe2+-TPTZ化合物的能力。桃金娘具有較高抗氧化能力，這可能歸因于其中含有較多的多酚物質。在研究中發現，桃金娘中的多酚類物質含量遠遠高于其他水果和谷物[23-24]。多酚化合物主要包括黃酮類、酚酸、奎寧、單寧及其他[25]。過去的報道指出多酚含量和抗氧化能力之間有較強的相關性[26]。桃金娘中的抗壞血酸含量并不高，因此抗壞血酸可能不是其抗氧化能力的主要來源。此現象同樣在草莓和漿果的研究中發現，即抗壞血酸不是主要抗氧化物，而多酚類物質才是主要的抗氧化物[27]。

2.6 總黃酮含量

桃金娘中的總黃酮含量為49.7 mg CE/100 g。此含量是鮮西紅柿（9.42μg/g）的9倍[15]，也遠高于其他葉用蔬菜[28]。高黃酮含量也是桃金娘具有高抗氧化能力的原因。

3 結 論

本實驗報道了桃金娘抗氧化能力（DPPH自由基、ROO·、ABTS+·和FRAP）、總多酚含量、總黃酮含量、抗壞血酸含量和花青素類成分。研究表明，桃金娘是諸如花青素、黃酮、多酚等植物類化合物的優質來源，具有較高的抗氧化能力。因此桃金娘可作為天然抗氧化物質、天然色素和功能性食品的原料。

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Main Antioxidant Components and Antioxidant Activity of Wild Hill Gooseberry Fruits (Rhodomyrtus tomentosa) from Southern China

LUO Shuangyan1,2, WANG Chao1,2, DUAN Hanying1,*, LUO Yaoxin1, YU Bing1
(1. Department of Food Science and Engineering, Jinan University, Guangzhou 510632, China; 2. Guangdong Saskatchewan Oilseeds Joint Laboratory, Jinan University & University of Saskatchewan, Guangzhou 510632, China)

The ripe fruit of wild hill gooseberry (Rhodomyrtustomentosa) was analyzed for its antioxidant activity, total phenolics, total flavonoids, ascorbic acid contents, and anthocyanin composition. Ultra performance liquid chromatography coupled to photo-diode array and ion-trap mass spectrometry (UPLC-PDA-IT-MS) was used to identify the anthocyanin composition. The antioxidant activity was determined by high-throughput free radical scavenging assay. As a result, the wild hill gooseberry had a higher antioxidant capacity. The 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity was expressed as 67.2 μmol of ascorbic acid and 28.5 μmol of gallic acid equivalents per g of hill gooseberry. The peroxyl radical scavenging capacity (PSC) was expressed as 23.2 μmol of ascorbic acid and 14.3 μmol of gallic acid equivalents per g of hill gooseberry. The 2,2’-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) radical scavenging activity was expressed as 30.4 μmol of ascorbic acid and 7.8 μmol of gallic acid equivalents per g of hill gooseberry. The ferric reducing antioxidant power (FRAP) was expressed as 28.7 μmol of ascorbic acid and 3.1 μmol of gallic acid equivalents per g of hill gooseberry. Total phenolics and total fl avonoids contents (on a dry weight basis) were 4 976 mg GAE/100 gmdand 49.7 mg catechin/100 gmd,respectively, and total ascorbic acid content (on a fresh weight basis) was 9 mg/100 gmf.Total monomeric anthocyanin content (on a dry weight basis) was 414 mg/100 gmd. Seven anthocyanins including delphinidin 3-O-glucoside were identifi ed. Cyanidin 3-O-glucoside was the most predominated form, followed by peonidin 3-O-glucoside and delphinidin 3-O-glucoside.

hill gooseberry; anthocyanins; antioxidant components; antioxidant properties

TS201.2

1002-6630（2015）17-0077-06

10.7506/spkx1002-6630-201517015

2014-11-22

中央高校基本科研業務費專項資金項目（21612315）；廣東省自然科學基金項目（S2012040006809）

羅爽妍（1991—），女，碩士研究生，研究方向為功能性食品。E-mail：932124045@qq.com

*通信作者：段翰英（1978—），女，講師，博士，研究方向為食品加工與保藏。E-mail：tduhy@jnu.edu.cn