甲基強的松龍對脂多糖誘導的大鼠急性肺損傷高遷移率蛋白1表達的影響

陳慧偉++彭再梅

[摘要] 目的 探討高遷移率蛋白1（HMGB1）在脂多糖誘導的急性肺損傷中的作用，以及甲基強的松龍注射劑干預后其在急性肺損傷中的表達變化。 方法 將54只清潔級成年雄性SD大鼠隨機分成3組：①正常對照組（N組）：每只大鼠經尾靜脈途徑給予生理鹽水2 mL/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予生理鹽水1 mL/kg；②急性肺損傷組（ALI組）：尾靜脈注射脂多糖6 mg/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予生理鹽水1 mL/kg；③甲基強的松龍干預組（MPN組）：每只大鼠經尾靜脈途徑給予脂多糖6 mg/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予甲基強的松龍20 mg/kg。三組分別于注射后12、24、36 h麻醉處死后采集標本，每個時相點取6只大鼠。采用免疫組織化學法和實時定量PCR（Real-Time PCR）法檢測各組各時相點大鼠肺組織HMGB1表達水平，同時觀察肺組織病理學改變，并測定干濕重比（W/D）。采用SPSS 20.0統計學軟件分析，數據處理采用方差分析。 結果 N組中大鼠肺組織有少量HMGB1 mRNA及其蛋白表達，ALI組和MPN組大鼠肺組織中HMGB1 mRNA及其蛋白表達水平明顯高于N組，差異均有統計學意義（均P < 0.05），24 h表達達峰值；同一時相點ALI組大鼠肺組織HMGB1 mRNA及其蛋白表達水平高于MPN組，差異有統計學意義（P < 0.05）。ALI組大鼠與MPN組不同時相點W/D增高，與N組比較差異有高度統計學意義（P < 0.01），MPN組與ALI組比較W/D下降（P < 0.05或P < 0.01）。與N組比較，ALI組和MPN組組織病理學有不同程度的病理損害，MPN組比ALI組壞死程度輕，炎癥細胞浸潤少。 結論 HMGB1在炎癥后期持續性高水平表達，在ALI發生、發展過程中，尤其是ALI后期失控性炎性反應過程中可能發揮重要作用。甲基強的松龍注射劑通過影響HMGB1 mRNA及其蛋白表達，對脂多糖所致的急性肺損傷有一定的保護作用。

[關鍵詞] 脂多糖；急性肺損傷；高遷移率蛋白1；甲基強的松

[中圖分類號] R96 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2014）11（c）-0029-04

Effect of Methyl Prednisolone on high mobility protein 1 expression in LPS-induced acute lung injury

CHEN Huiwei1 PENG Zaimei2

1.Department of Emergency， the Central Hospital of Zhuzhou City， Hu′nan Province， Zhuzhou 412000， China； 2.Department of Emergency， the Second Xiangya Hospital Alliliated of Central South University， Hu′nan Province， Changsha 410000， China

[Abstract] Objective To explore the function of high mobility group box1 （HMGB1） in rats′lung tissue with acute lung injury induced by lipopolysaccharide and the intervention effect of Methyly Prednisolone Injection. Methods Fifty-four male SD rats were randomly divided into three groups： control group （n=18， injected 1 mL/kg saline through tail vein after the 2 mL/kg saline was injected）， ALI group （n=18， injected 1 mL/kg saline through tail vein after the 6 mg/kg lipopolysaccharide was injected）， MPN group （n=18， injected 20 mg/kg Methyl Prednisolone through tail vein after the 6 mg/kg lipopolsaccharide was injected）. Six rats of each group were killed at the twelve hour， twenty-four hour and thirty-six hour after the lipopolsaccharide was injected. Rats′blood from carotid artery was collected for vigor analysis. The HMGB1 mRNA and its protein expression of the rats′lung was measured by immunohistochemistry and RT-PCR in different periods of each group. At the same time the pathological changes of the lung tissues， and the proportion of wet and dry （W/D） were observed. Results Little HMGB1 mRNA and its protein was expressed in the lung tissue of control group， but was increased quickly in ALI group and MPN group with peak levels being present at 24 h， which significantly higher than that in control group （P < 0.05）. HMGB1 mRNA and its protein in MPN group was less expressed than that in ALI group （P < 0.05）. The proportion of wet and dry in ALI group and MPN group increased significantly， which was higher than that in control group （P < 0.01）， but the proportion of wet and dry in MPN group was lower than that in ALI group in different times （P < 0.05 or P < 0.01）. Compared with control group， it was observed different degrees of damage of lung′s pathological structure in ALI group and MPN group. There was more inflammatory cell and cell necrosis in ALI group. Conclusion It shows HMGB1 mRNA and its protein has a persistent high levels of expression on the stage of inflammation. This uncontrolled inflammation reaction contributes to the development of acute lung injury. Methyl Prednisolone， which through the effect of the expression of HMGB1 mRNA and its protein， has a protective effect to acute lung injury induced by lipopolysaccharide.

[Key words] Lipopolsaccharide； Acute lung injury； High mobility group box1； Methyl Prednisolo

急性肺損傷（ALI）是由抗炎因子與促炎因子失衡引發多臟器功能紊亂在肺部的表現。高遷移率族蛋白（high mobility group box，HMGB）作為參與級聯反應的晚期炎癥介質成為了研究的熱點和潛在的有效干預靶點。大中劑量糖皮質激素既不能預防ALI/急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）的發生，對早期ALI/ARDS也沒有治療作用，且副作用大，相關并發癥多[1-3]；但小劑量激素治療是否能改善其預后還不確定。甲基強的松龍有抗炎及免疫抑制的藥理作用，設想在晚期炎性反應中它可能通過作用于某些細胞因子而發揮干預作用。因此本研究通過尾靜脈注射脂多糖，建立ALI大鼠模型，通過觀察大鼠肺組織病理學改變、肺組織中HMGB-1 mRNA及其蛋白的動態表達，同時觀察在甲基強的松龍注射液的干預下肺組織病理學、HMGB-1 mRNA及其蛋白的時段變化特點，并對其作用機制和干預途徑進行初步探討。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

脂多糖（O55：B5美國Sigma公司L-2880），注射用甲潑尼龍琥珀酸鈉（甲強龍，美國輝瑞公司H200 80284），HMGB-1免疫試劑盒（Santa Cruz生物公司），Trizol試劑（美國Invitrogen公司），逆轉錄試劑盒（日本TaKaRa公司）。凝膠成像及圖像分析系統（美國Bio-Rad公司），ABI StepOne實時熒光PCR儀。

1.2 實驗動物分組

清潔級10周齡成年雄性SD大鼠54只，體重200～250 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司。實驗期間大鼠均可以自由飲水、攝食，明暗周期為12 h/12 h（8∶00-20∶00），室溫控制在21～23℃，濕度保持在50%～55%。隨機將其分成3組，每組分12、24、36 h 3個時相點，每個時相點各取6只動物。

1.3 模型建立

正常對照組（N組）：每只大鼠經尾靜脈途徑給予生理鹽水2 mL/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予生理鹽水1 mL/kg；急性肺損傷組（ALI組）：尾靜脈注射脂多糖6 mg/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予生理鹽水1 mL/kg；甲基強的松龍干預組（MPN組）：每只大鼠經尾靜脈途徑給予脂多糖6 mg/kg，1 h后再經尾靜脈途徑給予甲基強的松龍20 mg/kg。三組分別于注射后12、24、36 h予10%水合氯醛腹腔注射麻醉后處死動物，采集標本檢測相應指標，每個時相點6只大鼠。

1.4 組織標本處理

取右下肺肺組織于中性福爾馬林浸泡固定，常規石蠟包埋，連續切片，厚度為4 μm，置多聚賴氨酸預處理的載玻片上，60℃烤片3 h，室溫冷卻30 min后置4℃冰箱備用行免疫組化和蘇木精-伊紅（HE）染色，觀察組織病理學改變。取右上肺濾紙吸干稱濕重后置于60℃烤箱中72 h，稱干重計算干濕重比（W/D）。余肺組織用冷生理鹽水沖洗后迅速放于液氮中保存，用于實時定量逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）實驗。

1.5 肺組織病理學觀察

取肺組織切片，行HE染色，觀察各組各時相點肺組織病理學改變。

1.6 肺組織HMGB-1蛋白表達檢測

棕黃色顆粒出現在氣道上皮細胞為HMGB-1蛋白染色陽性。每張組織切片隨機選取5個高倍鏡視野，選擇400倍光鏡。參考Ota等[4]免疫組化評分標準：由兩個觀察者對切片進行盲式閱片，顯微鏡下隨機選擇5個視野，觀察所選擇的高倍鏡視野中所有細胞，記錄陽性染色細胞百分比（%）并計分，將陽性百分數記分和細胞染色記分相加為免疫組化積分。

2.2 各組大鼠肺組織HE染色

N組大鼠肺組織肺泡結構清晰，肺泡腔干凈，肺泡間無中性粒細胞浸潤，偶見少許紅細胞。ALI組肺泡壁增寬，肺泡及肺血管顯著充血水腫，肺間質大量炎癥細胞浸潤，肺泡腔見紅細胞滲出。肺組織的病理改變隨著時間的延長逐漸加重，24 h最明顯，36 h有所減輕。與ALI組比較，同一時相點MPN組肺組織改變有不同程度的減輕。見封三（圖1）。

2.3 大鼠肺組織HMGB1蛋白表達

N組大鼠肺組織HMGB1蛋白表達極低。ALI組大鼠12 h HMGB1表達升高，24 h達到高峰，36 h下降，但仍高于正常。MPN組大鼠HMGB1蛋白表達較N組升高，與同時相點ALI組相比，HMGB1蛋白表達減少。見封三（圖2）、表2。

2.4 大鼠肺組織HMGB1 mRNA的表達

3 討論

ALI的本質可能是促炎因子與抗炎因子的失衡，以致多種炎癥介質瀑布樣放大級聯效應，炎癥因子的過度釋放，導致肺微血管通透性增高、肺間質和肺泡滲出、肺水腫和透明膜形成，并伴有肺間質纖維化，最終造成急性呼吸衰竭[5-6]。ALI確切的發病機制仍不清楚，但目前研究炎癥介質的過度釋放是重要發病機制之一，常見于內毒素及其誘導的急性炎性反應。

Wang等[7]首次提出了HMGB-1是內毒素致死效應的晚期炎癥介質的概念。Wang等[7]用脂多糖與小鼠RAW 264.7細胞一起培養6 h后，上清液中HMGB1含量明顯升高，16 h出現峰值并在24 h仍有高水平表達。Andersson等[8]發現經氣管內給予HMGB1可導致肺部急性炎癥損傷，出現肺水腫，并可見中性粒細胞積聚。同時檢測到呈劑量依賴效應的巨噬細胞炎癥蛋白2（MIP-2）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素（IL）-1β等炎癥因子生成量增加。如果用抗HMGB1抗體作用于脂多糖誘導的ALI，則能發現中性粒細胞聚集減少，炎癥減輕，肺水腫改善。同時研究發現TNF-α、IL-1等多種促炎因子也能促使細胞分泌HMGB1，反過來HMGB-1也可以分泌一些促炎因子，如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等，主要是通過內分泌或旁分泌形式刺激單核巨噬細胞分泌形成。因而認為HMGB-1與促炎因子之間的相互作用、相互影響可以促進炎性反應，在延長和維持炎性反應中起著重要的作用[8]。

甲基強的松龍屬于合成的中效脂溶性糖皮質激素，具有較強的抗炎作用、免疫抑制及抗過敏作用，與其他激素相比，同等劑量時甲基潑尼松龍在肺組織和肺泡上皮襯液中的濃度較高，且滯留時間也較長[9]。游離型甲基潑尼松龍分子易于透過細胞膜到達胞漿，在胞漿內與特異的糖皮質激素受體（glucocorticoid receptor，GR）相結合，形成具有配體活性的GC-GR復合物，移行至細胞核后與DNA上GC反應元件相結合或與轉錄因子發生作用，影響與GC有關的各種特定蛋白的mRNA轉錄和蛋白質的合成，從而直接或間接作用于炎性反應有關的多種炎癥細胞及細胞因子，抑制iNOS，拮抗白三烯，減少氧自由基的產生，增加表面活性物質的產生等作用，保護肺組織[10-11]。同時糖皮質激素也能通過抑制核細胞因子（NF）-κB 的活性，減弱炎癥介質的轉錄表達，從而減輕炎性反應。

本研究數據結果表明HMGB1在內毒素所致大鼠ALI早中期即開始升高，24 h出現峰值并維持較長時間的高于正常水平表達，表明HMGB1參與了ALI的發生與發展過程，與炎癥因子的級聯效應可能相關；HMGB1是一種新的晚期炎癥介質，與TNF-α、IL-1等速發型炎癥介質相比意義有本質區別，HMGB1在誘導全身性性反應、宿主免疫功能紊亂及膿毒并發癥病理過程中扮演著重要角色。如果將HMGB1的表達和釋放過程作為切入點，干預與調控機體過度炎癥及有害免疫反應的進程，可控制炎性反應的級聯效應，減輕ALI的炎性反應，改善預后。

大量研究已經證實糖皮質激素通過糖皮質類固醇激素受體對多種信號通路的多種效應發揮作用，早期小劑量應用甲潑尼龍可縮短患者的缺氧和休克持續時間，并縮短機械通氣時間[12-13]。同時短期應用小劑量甲潑尼龍可減少糖皮質激素引起的副作用，如避免誘發或加重感染，防止消化道出血等并發癥。同時研究認為糖皮質激素能抑制ALI/ARDS晚期持續存在的炎性反應，并能防止過度的膠原沉積。本實驗數據提示小劑量甲強龍可以抗炎或抑制炎癥因子的釋放，從而減輕炎性反應。由此說明甲基強的松龍注射液在ALI中抗炎及抑制炎性反應的作用可能是通過抑制HMGB1等炎癥因子的釋放和炎性反應的擴大而發揮作用，對內毒素所致的ALI具有一定的干預作用。但是HMGB1防治ALI的確切機制與應用效果尚待深入探討與研究。

[參考文獻]

[1] Luce JM，Montgomery AB，Marks JD，et al. Ineffectiveness of high-dose methylprednisolone in preventing parenchymal lung injury and improving mortality in patients with septic shock [J]. Am Rev Respir Dis，1988，138：62-68.

[2] Bone RC，Fisher CJ，Clemmer TP，et al. Early methylprednisolone treatment for septic syndrome and the adult respiratory distress syndrome [J]. Chest，1987，92：1032-1036.

[3] Bernard GR，Luce JM，Sprung CL，et al. High-dose corticosteroids in patients with the adult respiratory distress syndrome [J]. N Engl J Med，1987，317：1565-1570.

[4] Ota H，Igarashi S，Sassaki M，et al. Distribution of cyclooxygenase-2 in eutopic and endometrin in wndonetriosis and andomyosis [J]. Hum Reprod，2001，16（3）：561-566.

[5] DowneyGP，DougQ，Kruger J，et al. Regulationofneutrophil activation inacute lung injury [J]. Chest，1999，116（Suppl1）：46-54.

[6] Hughes M，Mackirdy FN，Ross J，et al. Acute respiratory distress syndrome： an audit of incidence and outcome in Scottish intensive care units [J]. Anaesthesia，2003，58：838-845.

[7] Wang H，Bloom O，Zhang M，et al. HMGB-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice [J]. Science，1999，285：248-251.

[8] Andersson U，Erlandsson-Harris H，Yang H，et al. HMGB-1 as a DNA-binding Cytokine [J]. J Leukoc Biol，2002，72（6）：1084.

[9] 程青，曾梅，唐忠杰，等.丹參與甲基潑尼松龍聯合治療急性肺損傷的實驗研究[J].華南國防醫學雜志，2009，23（4）：31-33.

[10] 宋志芳，郭小紅.糖皮質激素在急性呼吸窘迫綜合癥中的救治價值探討[J].中國危重病急救醫學，2003，15（6）：349

[11] Nishio E，Fukushima K，Shiozaki M，et al. Nitric oxide donor SNAP induces apoptosis in smooth muscle cells through cGMP independent mechanism [J]. Biochem Biophys Res Commun，1996，221（1）：163-168

[12] Thompson BT. Glucocorticoids and acute lung injury [J]. Crit Care Med，2003，31：S253.

[13] Meduri GU，Tolley EA，Chrousos GP，et al. Prolonged methyl prednisolone treatment suppresses systemic inflammation in patients with unresolving acute respiratory distress syndrome： evidence for inadequate endogenous glucocorticoid secretion and in flammation-induced immune cell resistance to glucocorticoids [J]. Am J Respir Crit Care Med，2002，165：983.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：衛 軻）

甲基強的松龍屬于合成的中效脂溶性糖皮質激素，具有較強的抗炎作用、免疫抑制及抗過敏作用，與其他激素相比，同等劑量時甲基潑尼松龍在肺組織和肺泡上皮襯液中的濃度較高，且滯留時間也較長[9]。游離型甲基潑尼松龍分子易于透過細胞膜到達胞漿，在胞漿內與特異的糖皮質激素受體（glucocorticoid receptor，GR）相結合，形成具有配體活性的GC-GR復合物，移行至細胞核后與DNA上GC反應元件相結合或與轉錄因子發生作用，影響與GC有關的各種特定蛋白的mRNA轉錄和蛋白質的合成，從而直接或間接作用于炎性反應有關的多種炎癥細胞及細胞因子，抑制iNOS，拮抗白三烯，減少氧自由基的產生，增加表面活性物質的產生等作用，保護肺組織[10-11]。同時糖皮質激素也能通過抑制核細胞因子（NF）-κB 的活性，減弱炎癥介質的轉錄表達，從而減輕炎性反應。

本研究數據結果表明HMGB1在內毒素所致大鼠ALI早中期即開始升高，24 h出現峰值并維持較長時間的高于正常水平表達，表明HMGB1參與了ALI的發生與發展過程，與炎癥因子的級聯效應可能相關；HMGB1是一種新的晚期炎癥介質，與TNF-α、IL-1等速發型炎癥介質相比意義有本質區別，HMGB1在誘導全身性性反應、宿主免疫功能紊亂及膿毒并發癥病理過程中扮演著重要角色。如果將HMGB1的表達和釋放過程作為切入點，干預與調控機體過度炎癥及有害免疫反應的進程，可控制炎性反應的級聯效應，減輕ALI的炎性反應，改善預后。

大量研究已經證實糖皮質激素通過糖皮質類固醇激素受體對多種信號通路的多種效應發揮作用，早期小劑量應用甲潑尼龍可縮短患者的缺氧和休克持續時間，并縮短機械通氣時間[12-13]。同時短期應用小劑量甲潑尼龍可減少糖皮質激素引起的副作用，如避免誘發或加重感染，防止消化道出血等并發癥。同時研究認為糖皮質激素能抑制ALI/ARDS晚期持續存在的炎性反應，并能防止過度的膠原沉積。本實驗數據提示小劑量甲強龍可以抗炎或抑制炎癥因子的釋放，從而減輕炎性反應。由此說明甲基強的松龍注射液在ALI中抗炎及抑制炎性反應的作用可能是通過抑制HMGB1等炎癥因子的釋放和炎性反應的擴大而發揮作用，對內毒素所致的ALI具有一定的干預作用。但是HMGB1防治ALI的確切機制與應用效果尚待深入探討與研究。

[參考文獻]

[1] Luce JM，Montgomery AB，Marks JD，et al. Ineffectiveness of high-dose methylprednisolone in preventing parenchymal lung injury and improving mortality in patients with septic shock [J]. Am Rev Respir Dis，1988，138：62-68.

[2] Bone RC，Fisher CJ，Clemmer TP，et al. Early methylprednisolone treatment for septic syndrome and the adult respiratory distress syndrome [J]. Chest，1987，92：1032-1036.

[3] Bernard GR，Luce JM，Sprung CL，et al. High-dose corticosteroids in patients with the adult respiratory distress syndrome [J]. N Engl J Med，1987，317：1565-1570.

[4] Ota H，Igarashi S，Sassaki M，et al. Distribution of cyclooxygenase-2 in eutopic and endometrin in wndonetriosis and andomyosis [J]. Hum Reprod，2001，16（3）：561-566.

[5] DowneyGP，DougQ，Kruger J，et al. Regulationofneutrophil activation inacute lung injury [J]. Chest，1999，116（Suppl1）：46-54.

[6] Hughes M，Mackirdy FN，Ross J，et al. Acute respiratory distress syndrome： an audit of incidence and outcome in Scottish intensive care units [J]. Anaesthesia，2003，58：838-845.

[7] Wang H，Bloom O，Zhang M，et al. HMGB-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice [J]. Science，1999，285：248-251.

[8] Andersson U，Erlandsson-Harris H，Yang H，et al. HMGB-1 as a DNA-binding Cytokine [J]. J Leukoc Biol，2002，72（6）：1084.

[9] 程青，曾梅，唐忠杰，等.丹參與甲基潑尼松龍聯合治療急性肺損傷的實驗研究[J].華南國防醫學雜志，2009，23（4）：31-33.

[10] 宋志芳，郭小紅.糖皮質激素在急性呼吸窘迫綜合癥中的救治價值探討[J].中國危重病急救醫學，2003，15（6）：349

[11] Nishio E，Fukushima K，Shiozaki M，et al. Nitric oxide donor SNAP induces apoptosis in smooth muscle cells through cGMP independent mechanism [J]. Biochem Biophys Res Commun，1996，221（1）：163-168

[12] Thompson BT. Glucocorticoids and acute lung injury [J]. Crit Care Med，2003，31：S253.

[13] Meduri GU，Tolley EA，Chrousos GP，et al. Prolonged methyl prednisolone treatment suppresses systemic inflammation in patients with unresolving acute respiratory distress syndrome： evidence for inadequate endogenous glucocorticoid secretion and in flammation-induced immune cell resistance to glucocorticoids [J]. Am J Respir Crit Care Med，2002，165：983.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：衛 軻）

甲基強的松龍屬于合成的中效脂溶性糖皮質激素，具有較強的抗炎作用、免疫抑制及抗過敏作用，與其他激素相比，同等劑量時甲基潑尼松龍在肺組織和肺泡上皮襯液中的濃度較高，且滯留時間也較長[9]。游離型甲基潑尼松龍分子易于透過細胞膜到達胞漿，在胞漿內與特異的糖皮質激素受體（glucocorticoid receptor，GR）相結合，形成具有配體活性的GC-GR復合物，移行至細胞核后與DNA上GC反應元件相結合或與轉錄因子發生作用，影響與GC有關的各種特定蛋白的mRNA轉錄和蛋白質的合成，從而直接或間接作用于炎性反應有關的多種炎癥細胞及細胞因子，抑制iNOS，拮抗白三烯，減少氧自由基的產生，增加表面活性物質的產生等作用，保護肺組織[10-11]。同時糖皮質激素也能通過抑制核細胞因子（NF）-κB 的活性，減弱炎癥介質的轉錄表達，從而減輕炎性反應。

本研究數據結果表明HMGB1在內毒素所致大鼠ALI早中期即開始升高，24 h出現峰值并維持較長時間的高于正常水平表達，表明HMGB1參與了ALI的發生與發展過程，與炎癥因子的級聯效應可能相關；HMGB1是一種新的晚期炎癥介質，與TNF-α、IL-1等速發型炎癥介質相比意義有本質區別，HMGB1在誘導全身性性反應、宿主免疫功能紊亂及膿毒并發癥病理過程中扮演著重要角色。如果將HMGB1的表達和釋放過程作為切入點，干預與調控機體過度炎癥及有害免疫反應的進程，可控制炎性反應的級聯效應，減輕ALI的炎性反應，改善預后。

大量研究已經證實糖皮質激素通過糖皮質類固醇激素受體對多種信號通路的多種效應發揮作用，早期小劑量應用甲潑尼龍可縮短患者的缺氧和休克持續時間，并縮短機械通氣時間[12-13]。同時短期應用小劑量甲潑尼龍可減少糖皮質激素引起的副作用，如避免誘發或加重感染，防止消化道出血等并發癥。同時研究認為糖皮質激素能抑制ALI/ARDS晚期持續存在的炎性反應，并能防止過度的膠原沉積。本實驗數據提示小劑量甲強龍可以抗炎或抑制炎癥因子的釋放，從而減輕炎性反應。由此說明甲基強的松龍注射液在ALI中抗炎及抑制炎性反應的作用可能是通過抑制HMGB1等炎癥因子的釋放和炎性反應的擴大而發揮作用，對內毒素所致的ALI具有一定的干預作用。但是HMGB1防治ALI的確切機制與應用效果尚待深入探討與研究。

[參考文獻]

[1] Luce JM，Montgomery AB，Marks JD，et al. Ineffectiveness of high-dose methylprednisolone in preventing parenchymal lung injury and improving mortality in patients with septic shock [J]. Am Rev Respir Dis，1988，138：62-68.

[2] Bone RC，Fisher CJ，Clemmer TP，et al. Early methylprednisolone treatment for septic syndrome and the adult respiratory distress syndrome [J]. Chest，1987，92：1032-1036.

[3] Bernard GR，Luce JM，Sprung CL，et al. High-dose corticosteroids in patients with the adult respiratory distress syndrome [J]. N Engl J Med，1987，317：1565-1570.

[4] Ota H，Igarashi S，Sassaki M，et al. Distribution of cyclooxygenase-2 in eutopic and endometrin in wndonetriosis and andomyosis [J]. Hum Reprod，2001，16（3）：561-566.

[5] DowneyGP，DougQ，Kruger J，et al. Regulationofneutrophil activation inacute lung injury [J]. Chest，1999，116（Suppl1）：46-54.

[6] Hughes M，Mackirdy FN，Ross J，et al. Acute respiratory distress syndrome： an audit of incidence and outcome in Scottish intensive care units [J]. Anaesthesia，2003，58：838-845.

[7] Wang H，Bloom O，Zhang M，et al. HMGB-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice [J]. Science，1999，285：248-251.

[8] Andersson U，Erlandsson-Harris H，Yang H，et al. HMGB-1 as a DNA-binding Cytokine [J]. J Leukoc Biol，2002，72（6）：1084.

[9] 程青，曾梅，唐忠杰，等.丹參與甲基潑尼松龍聯合治療急性肺損傷的實驗研究[J].華南國防醫學雜志，2009，23（4）：31-33.

[10] 宋志芳，郭小紅.糖皮質激素在急性呼吸窘迫綜合癥中的救治價值探討[J].中國危重病急救醫學，2003，15（6）：349

[11] Nishio E，Fukushima K，Shiozaki M，et al. Nitric oxide donor SNAP induces apoptosis in smooth muscle cells through cGMP independent mechanism [J]. Biochem Biophys Res Commun，1996，221（1）：163-168

[12] Thompson BT. Glucocorticoids and acute lung injury [J]. Crit Care Med，2003，31：S253.

[13] Meduri GU，Tolley EA，Chrousos GP，et al. Prolonged methyl prednisolone treatment suppresses systemic inflammation in patients with unresolving acute respiratory distress syndrome： evidence for inadequate endogenous glucocorticoid secretion and in flammation-induced immune cell resistance to glucocorticoids [J]. Am J Respir Crit Care Med，2002，165：983.

（收稿日期：2014-08-25 本文編輯：衛 軻）