豬瘟與高致病性藍耳病的免疫程序優化實驗

文│張海燕 陳松林 周昌龍（江蘇省如皋市畜牧獸醫站）

豬瘟（CSF）與豬高致病性藍耳病（豬繁殖與呼吸障礙綜合征，PRRS）是引起“豬高熱病綜合癥”主要疾病之一，也是現行豬場必須免疫的兩種豬傳染性疾病。接種疫苗是目前控制重大動物疫病流行的主要措施，目前已有一些免疫參考方案，但如果不根據自己的實際情況，照搬現有的免疫方案，或不經過嚴格的科學實驗來研究符合本地實際情況的免疫程序，將導致免疫效果不佳甚至免疫失敗。為了給江蘇省如皋市制定合理的豬瘟和藍耳病免疫程序提供理論依據，我們特此進行了仔豬豬瘟與高致病性藍耳病的免疫程序優化試驗。現將有關試驗結果總結如下。

一、材料與方法

1.材料。

（1）試驗生豬。某豬場48頭19日齡左右、健康、未免疫仔豬。所有試驗豬皆為豬繁殖與呼吸綜合征（藍耳病）病毒和抗體陰性、口蹄疫感染抗體陰性、豬瘟抗原陰性、偽狂犬病野毒抗體陰性。

（2）疫苗。豬瘟細胞源活疫苗，生產批號201152，某生物股份有限公司生產；高致病性豬藍耳病活疫苗，批號1202005-2，某生物股份有限公司生產。

（3）診斷試劑。豬瘟病毒抗體檢測試劑盒，批號A651，購自北京愛德士元亨生物科技有限公司；LIS豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測試劑盒，批號5-VETPRA-031，購自北京天之泰生物科技有限公司。

2.試驗設計。動物試驗共分6組，分別為A、B、C、D、E、F程序組（A組為試驗對照組），詳見表1。

3.疫苗接種及樣品采集。經檢查保存完好的疫苗稀釋后，充分搖勻后備用。免疫豬保定后，在兩側耳根后頸部或腿部內側注射部位嚴格消毒后，按免疫試驗設計要求接種疫苗，且逐頭更換針頭。疫苗接種后分別于40、50、80、110、140、170日齡采血，常規方法分離血清，記錄編號后，置-70℃冰柜中保存備用。

4.免疫副反應觀察。每次免疫當天開始，測量豬體溫，連續5天，同時觀察豬的采食等狀況。若有異常，及時救治并記錄。

5.樣品檢測及結果判定。抗體水平測定按照試劑盒說明書進行。CSF抗體按試劑盒說明書被檢樣本阻斷率≥40%為陽性，≤30%為陰性，30%～40%之間為疑似。HP-PRRS抗體按試劑盒說明書IRPC＞20.0為陽性，IRPC≤20.0為陰性。

二、結果

1.免疫副反應觀察。48頭生豬免疫接種后，觀察21天，所有豬只精神、食欲、體溫均正常，注射局部無不良反應，說明該批次豬瘟苗無論是注射1頭份還是注射4頭份都是安全的，該批次高致病性豬藍耳病苗無論是注射1頭份還兩頭份都是安全的。

2.CSF抗體水平。B、E、F三組豬瘟均免疫兩次，C、D兩組豬瘟只免疫一次。各組不同時間點豬群豬瘟抗體陽性率的變化情況詳見圖1。

表1 各組免疫程序、免疫劑量、免疫時間

表2 實驗D組各時間點豬瘟抗體檢測結果（抗體阻斷率）

B組于50日齡一免后30天，群體的抗體陽性率達到100%，80日齡二免后90天，該群體抗體陽性率一直維持在100%。E組于50日齡一免后30天群體抗體陽性率僅為38%，在80日齡經過二免后30天，群體抗體陽性率上升到100%，此后就持續下降，二免后60天降為86%，90天降為75%。F組由于兩次各免疫1頭份，于二免后30天群體抗體陽性率僅上升到75%，此后逐漸下降。

C、D兩組由于只免疫一次，群體抗體陽性率均低于70%。并且D組在50日齡進行一免時的母源抗體較高，群體抗體陽性率達到38%，具體的抗體阻斷率詳見表2。2、6、7號豬于50日齡豬瘟首免時母源抗體的阻斷率分別達到52.52%、56.99%、78.67%，豬瘟疫苗免疫后，抗體阻斷率持續下降，而1、3、4、5、8號豬首免時母源抗體的阻斷率較低（小于10%），首免后豬瘟抗體抗體阻斷率持續上升，在沒有進行兩次免疫的情況下，最高可以達到90.62%，在免疫后4個月仍達到85.03%。

3.HP-PRRS抗體水平。除了E組免疫2頭份外，其余各組均免疫1頭份，各組不同時間點豬群藍耳抗體陽性率的變化情況詳見圖2。從圖2可知，40日齡所測抗體為母源抗體，40日齡免疫后10天，各組的母源抗體均下降，此后抗體陽性率逐漸上升，除C組豬群藍耳抗體陽性率達87.5%，其余各組均能達到100%，且D組免疫后130天，抗體陽性率仍能持續為100%，試驗表明，高致病性豬藍耳病苗免疫1頭份、2頭份都能起到較好的免疫效果。

三、討論

1.豬瘟二次加強免疫才能獲得好的保護。本實驗檢測結果表明，仔豬接種一次豬瘟疫苗免疫保護率不高也不持久，即使一次免疫量加大到4個頭份（C組），免疫抗體合格率一度可達到60%以上，但持續兩個月后抗體迅速下降，而兩次加強免疫比一次免疫產生的抗體水平高而持久。從免疫學意義上講，動物機體首次接觸外來抗原后，產生的抗體以IgM為主，IgM在體內維持的時間不長且不穩定，二次加強免疫后，抗原誘導機體記憶細胞產生高效的IgG抗體，抗體上升幅度大且持久穩固。所以在實際工作中，有的防疫員片面通過加大疫苗劑量減少免疫次數來想獲得好的免疫效果是不可行的，豬瘟一定要經過兩次免疫才能獲得好的持久的保護。

2.豬瘟最適免疫日齡。本實驗中，D組8頭試驗豬在50日齡進行一免時，有三只仔豬的母源抗體的阻斷率較高（阻斷率大于50%），免疫后抗體阻斷率均持續下降。只有在母源抗體相對較低時（阻斷率小于10%）進行免疫，免疫效果才好，但考慮免疫時間過遲，容易受到病毒感染。根據本實驗結果表明豬瘟最適首免時間為50日齡。

3.高致病性藍耳病苗對豬瘟的影響。

（1）兩種疫苗間隔時間對豬瘟疫苗的影響。高致病性藍耳病苗免疫對豬瘟細胞苗免疫產生明顯干擾作用，兩者同時免疫干擾作用極顯著，兩種疫苗間隔7天免疫，雖能滿足免疫要求，但有明顯干擾作用。本實驗中兩疫苗免疫間隔時間為10天，抗體陽性率均能達到70%以上，符合國家要求。

（2）藍耳疫苗劑量對豬瘟疫苗的影響。B組中藍耳疫苗免疫1頭份，豬群豬瘟疫苗首免后30天，群體豬瘟抗體陽性率即為100%，首免后120天時抗體陽性率仍然能維持100%。E組中藍耳疫苗免疫2頭份，豬群豬瘟疫苗首免后30天，群體抗體陽性率為38%，豬瘟疫苗首免后60天，群體豬瘟抗體陽性率升為100%，以后抗體陽性率逐漸降低，首免后120天時降為75%。說明藍耳疫苗除了時間間隔對豬瘟疫苗有影響外，藍耳疫苗的劑量對豬瘟疫苗也有免疫抑制作用。

◎圖1 各時間點不同組別豬群豬瘟抗體陽性率的變化情況

◎圖2 各時間點不同組別豬群藍耳抗體陽性率的變化情況