老年膠質(zhì)瘤患者術(shù)后組織中乙醛脫氫酶、Musashi-1和血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的臨床意義

侯曉峰 (武威市人民醫(yī)院神經(jīng)外科，甘肅 武威 733000)

膠質(zhì)瘤病變發(fā)展過程中常出現(xiàn)多種蛋白的表達(dá)失調(diào)。乙醛脫氫酶-1(ALDH1)在腫瘤的發(fā)生、血管生成和細(xì)胞增殖中起到重要的促進(jìn)作用〔1〕。Musashi-1是一種保守的神經(jīng)RNA結(jié)合蛋白，可在祖細(xì)胞中表達(dá)，也被認(rèn)為是干細(xì)胞的標(biāo)志物，近來研究認(rèn)為其可能與多種癌癥相關(guān)〔2〕。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是最經(jīng)典的血管內(nèi)皮生長因子，對腫瘤和新生組織中的血管形成有重要價(jià)值〔3〕。本實(shí)驗(yàn)探討膠質(zhì)瘤老年患者術(shù)后腫瘤組織中ALDH1、Musashi-1和VEGF的表達(dá)及三者的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料 我院2012年1月至2013年4月膠質(zhì)瘤老年患者術(shù)后組織86例作為觀察組，其中男44例，女42例，年齡60～87(平均67.5)歲。納入均符合世界衛(wèi)生組織(WHO)中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并進(jìn)行分級，其中Ⅰ級10例，Ⅱ級25例，Ⅲ級30例，Ⅳ級21例。患者術(shù)前均未進(jìn)行任何放化療。收集60例腦出血血腫清除術(shù)后周圍正常的腦組織作為對照組，其中男30例，女30例，年齡60 ～85(平均64.3)歲。

1.2 免疫組織化學(xué)方法檢測ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的表達(dá) ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的濃縮液均購自武漢博士德生物工程有限公司，應(yīng)用不同比例的稀釋后摸索適應(yīng)的條件，選擇最理想的濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。3種蛋白的檢測應(yīng)用免疫組化二步法，操作中嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的表達(dá)均定位于細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)染成棕黃色顆粒樣物質(zhì)為陽性表達(dá)，隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)典型的高倍視野區(qū)域(400倍)，取其平均值，以陽性細(xì)胞≥25%為陽性表達(dá)，以陽性細(xì)胞＜25%為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 ALDH1、Musashi-1和VEGF在觀察組和對照組中的表達(dá)觀察組中ALDH1、Musashi-1和VEGF表達(dá)的陽性率明顯高于對照組(P ＜0.000 1)，見表1。

2.2 觀察組不同臨床特征中ALDH1、Musashi-1和VEGF表達(dá)陽性率的比較 觀察組中ALDH1、Musashi-1和VEGF表達(dá)的陽性率與腫瘤直徑、分級及Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)，見表2。

2.3 觀察組中ALDH1、Musashi-1和VEGF表達(dá)的關(guān)系 觀察組中 ALDH1 和 Musashi-1(r=0.45，P=0.034 1)、ALDH1 和VEGF(r=0.49，P=0.013 5)、Musashi-1 和 VEGF(r=0.46，P=0.016 5)的表達(dá)均呈正相關(guān)性。

表1 ALDH1、Musashi-1和VEGF在觀察組和對照組中的陽性表達(dá)〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征中ALDH1、Musashi-1和VEGF表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

3 討論

膠質(zhì)瘤進(jìn)展過程中血管增生活躍。膠質(zhì)瘤中血管生成不僅是腫瘤生長的重要支持成分，也是腫瘤分級的重要病理基礎(chǔ)。ALDH1是人體干細(xì)胞的標(biāo)志，主要表達(dá)于起源的細(xì)胞，尤其是增殖活躍的上皮細(xì)胞。ALDH1可以對活化的血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和新生有重要作用。也有觀點(diǎn)認(rèn)為ALDH1的作用可能具有多向性，即不僅參與細(xì)胞的活化、增殖，也參與腫瘤的血管生成和轉(zhuǎn)移〔4，5〕。Musashi-1是一類在神經(jīng)系統(tǒng)特異表達(dá)的RNA結(jié)合蛋白，最早在果蠅中發(fā)現(xiàn)，后來研究發(fā)現(xiàn)Musashi-1在增殖活躍的細(xì)胞中表達(dá)增高〔6，7〕。有學(xué)者通過雙標(biāo)記免疫組化方法檢測胃增殖性疾病中 Musashi-1的表達(dá)，結(jié)果顯示Musashi-1主要表達(dá)在胃竇部的增殖細(xì)胞區(qū)域，并認(rèn)為Musashi-1高表達(dá)在腫瘤進(jìn)展對促進(jìn)增殖有重要作用〔8〕。

ALDH1、Musashi-1對惡變細(xì)胞的增殖活性明顯升高，也使兩種蛋白對多向分化潛能細(xì)胞的誘導(dǎo)作用增強(qiáng)〔9，10〕，此機(jī)制也是腫瘤細(xì)胞惡變的重要機(jī)制，膠質(zhì)瘤作為惡性程度較高的腫瘤，細(xì)胞分化及細(xì)胞形態(tài)更趨于祖細(xì)胞，因此ALDH1、Musashi-1的表達(dá)明顯升高。ALDH1、Musashi-1和VEGF聯(lián)合檢測可能為臨床上判斷生物學(xué)行為提供重要的支持。本實(shí)驗(yàn)提示ALDH1和Musashi-1是重要的血管生成促進(jìn)因子，其作用途徑是通過活化VEGF實(shí)現(xiàn)的。ALDH1、Musashi-1高表達(dá)時(shí)使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生VEGF增多，促進(jìn)CD34、CD105陽性的腫瘤新生血管的生成，加速腫瘤生長及侵襲作用。但是關(guān)于 ALDH1、Musashi-1和VEGF具體作用機(jī)制尚有待更多基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)。

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