化學發光技術檢測乙肝表面抗原陽性患者不同乙肝模式乙肝前S1蛋白的臨床價值

錢宏波 周曉冬

(西安市第八醫院檢驗科，710061)

我國是乙肝大國，屬于乙肝病毒(HBV)高流行區，HBV傳染性強，在我國發病率高[1]。因此HBV實驗室檢測具有很重要的篩查和診斷意義，其實驗方法也逐漸增多[2]。HBV外膜蛋白由S蛋白、前S1(pre-S1)和前S2(pre-S2)組成，pre-S1是乙肝病毒外膜蛋白的重要組成部分，其所含的肝細胞膜受體對乙肝病毒感染肝細胞和機體的免疫應答具有十分重要的作用，研究表明HBV pre-S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率一致，其能夠反映HBV在患者體內的復制情況[3]。目前，臨床實驗室大多采用ELISA方法檢測pre-S1，隨著化學發光技術的日益成熟，利用化學發光技術檢測pre-S1在臨床上得到了廣泛的應用[4]。本研究利用化學發光技術檢測乙肝表面抗原(HBsAg)陽性患者不同乙肝模式乙肝pre-S1蛋白，旨在探討其臨床價值，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013-02—2014-02在本院檢測HBsAg結果為陽性患者400例，患者來自門診和住院部。其中男230例，女170例；年齡17～81歲，平均(49.2±18.5)歲。本研究所有患者均獲得知情同意，并上報本院學術委員會批準備案。

1.2 儀器與試劑 pre-S1和乙肝兩對半的定量檢測采用雅培ARCHITECT i2000化學發光微粒子免疫分析儀及其配套試劑，由美國雅培公司生產；pre-S1所使用的試劑為上海復星長征醫學科學有限公司提供的乙型肝炎病毒pre-S1抗原檢測試劑盒[國食藥監械(準)字2010第3400465號]，儀器為鄭州安圖生物工程有限公司生產的Autobio LUMO型化學發光儀。

1.3 試驗方法 不同乙肝模式的定量采用化學發光微粒子免疫分析，嚴格按照試劑盒上的說明操作，結果的判斷為：≥0.05 IU/mL時，HBsAg陽性；≥10 mIU/mL時，HBsAb陽性；S/CO≥1時，HBeAg和HBcAb陽性；S/CO≤1時，HBeAb陽性。pre-S1的測定采用化學發光技術，利用化學免疫分析儀測定每孔RLU值后計算S/CO值，S/CO≥1時判斷為陽性。

1.4 統計學方法 本研究采用SPSS 19.0統計軟件進行數據的統計和分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乙肝模式分布 本研究中共有7種不同的乙肝模式。Ⅰ：HBsAg＋HBeAg＋HBcAb陽性；Ⅱ：HBsAg＋HBeAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅲ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAg＋HBcAb陽性；Ⅳ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅴ：HBsAg＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅵ：HBsAg＋HBsAb＋HBeAb＋HBcAb陽性；Ⅶ：HBsAg＋HBcAb陽性。其分布及pre-S1陽性率(表1)，可見HBV大三陽模式中pre-S1陽性率較高。

2.2 HBsAg濃值與pre-S1的關系 將HBsAg按照濃度值分為5組，對濃度值在＞250的標本使用雅培HBsAg Auto試劑自動稀釋500倍后重新檢測乙肝表面抗原，部分“大三陽”模式患者HBsAg濃度值升高到10 000以上，顯示當HBsAg濃度增加，HBV病毒載量的增加，前S1蛋白陽性率也增加。Ⅰ：HBsAg濃度值0.05～50；Ⅱ：HBsAg濃度值51～250；Ⅲ：HBsAg濃度值251～1 000；Ⅳ：HBsAg濃度值1 001～5 000；Ⅴ：HBsAg濃度值＞5 000。比較5組pre-S1陽性率，結果(表2)，HBsAg濃度值與pre-S1陽性率具有相關性，HBsAg濃度值越高，pre-S1陽性率越高。

2.3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較χ2＝54.55，P＜0.01(表3)。

表1 400例患者乙肝模式分布及pre-S1陽性率

表2 不同HBsAg濃度值的pre-S1陽性率

表3 HBeAg陽性及陰性患者中pre-S1陽性率比較

3 討論

化學發光技術是一種新興的非放射免疫分析方法，其原理為化學發光技術和抗原-抗體的特異性反應，具有靈敏度高、精密度高、廉價、快速等優點，目前已經在臨床上廣泛使用[5]。利用化學發光技術檢出HBV pre-S1較ELISA法更加準確和敏感。

HBV pre-S1是急性HBV早期感染的重要標志，在患者谷丙轉氨酶升高達到峰值之前，pre-S1已經達到了較高的水平，甚至在HBV核酸檢出前就可檢測到[6]。臨床上常常將pre-S1作為急性HBV預后判斷的重要指標，pre-S1轉陰越早，提示患者預后越好。有研究表明[7]，亞病毒科里在HBV感染的過程中能夠增強細胞內病毒的復制和其基因表達，而這被證明是pre-S蛋白反式激活觸發。除此之外，還有研究表明HBV包膜形成的過程需要HBsAg、pre-S1和pre-S2蛋白的參與[8]。

HBV HBsAg的濃度值能反映出HBV病毒的滴度，本研究中HBsAg濃度值與pre-S1陽性率呈正相關，在HBsAg濃度值＜250時，pre-S1蛋白陽性率相對較低，而當HBsAg濃度值＞250時，pre-S1陽性率顯著升高。本研究中，HBsAg濃度值＜250時pre-S1呈陽性患者多為HBeAg陽性，這表明HBV HBsAg濃度值與病毒載量具有一定的相關性，反映出pre-S1與HBV在患者體內的復制有關。

本研究中，HBeAg陰性時，仍有較高的pre-S1陽性率(76.10%)，這可能是由于HBV病毒仍然處于感染狀態，但其基因發生了變異，不能檢出HBeAg，因此HBV發生變異時，只測定HBeAg來判斷HBV復制水平不能反映出真實情況，這可能與HBV逃避機體免疫攻擊有關。因此pre-S1與HBeAg相比能夠更加準確地反映出患者體內HBV的復制情況。

綜上所述，利用化學發光技術測定HBsAg陽性HBV患者血清pre-S1蛋白對HBV早期感染的診斷、預后判斷和檢測病毒復制情況具有重要的臨床意義，且廉價易在臨床推廣。

[1]陳銀萍，吳愛萍，余亮科，等.組合模型對乙肝發病趨勢的預測研究[J].解放軍醫學雜志，2014，39(1)：52-56.

[2]楊笑瓊，何海洪，楊秀珠，等.ELISA法和MEIA法測定乙肝病毒血清標志物的比較研究[J].北方藥學，2014，11(2)：16-17.

[3]董運啟.乙型肝炎病毒前S1蛋白檢測的臨床價值[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33(S1)：20-21.

[4]顧春瑜，許瓊，趙喬妹，等.化學發光技術檢測乙肝前S1蛋白的臨床價值[J].感染、炎癥、修復，2013，14(2)：107-109.

[5]李璐，邢文革.化學發光技術在HCV和HIV檢測中的應用[J].中國艾滋病性病，2011，17(3)：382-284.

[6]黃啟強，黃麗慶，周曉蘭，等.乙型肝炎病毒前S1抗原與傳統標志物相關性分析[J].檢驗醫學與臨床，2011，8(11)：1341-1343.

[7]張和平，林國躍，王萍，等.HBV前S-2蛋白檢測與HBV-DNA和乙肝二對半模式相關性研究[J].醫學綜述，2011，17(1)：139-140.

[8]楊晉榮，楊棟梁.HBeAg陰性HBV感染者不同病毒載量與前S1抗原和大蛋白關系研究[J].臨床合理用藥雜志，2011，4(33)：12-13.