鳳岡鋅硒綠茶中7種兒茶素及咖啡因含量特征

王蘭蘭+向麗萍+李霞+張俊英+馮發(fā)青+王奧

摘要：采用HPLC方法同時(shí)測(cè)定了26個(gè)鳳岡鋅硒綠茶樣品中7種兒茶素兒茶素（+C）、沒(méi)食子兒茶素（GC）、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（GCG）、表兒茶素（EC）、表沒(méi)食子兒茶素（EGC）、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG）、表兒茶素沒(méi)食子酸酯（ECG））和咖啡因（CAF）的含量。結(jié)果表明，鳳岡鋅硒綠茶中兒茶素總含量平均值為20.08%，其中EGCG含量最高；兒茶素平均品質(zhì)指數(shù)為556；咖啡因的含量平均值為3.9%。該研究可為鳳岡鋅硒綠茶品質(zhì)的進(jìn)一步研究提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：鳳岡鋅硒綠茶；兒茶素；咖啡因

中圖分類號(hào)：O657.7+2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）19-4692-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2014.19.048

Contents of Seven Types of Catechins and Caffeine in Zinc

and Selenium Tea of Fenggang

WANG Lan-lan， XIANG Li-ping， LI Xia， ZHANG Jun-ying， FENG Fa-qing， WANG Ao

（Institute of Product Quality Inspection & Testing of Zunyi， Zunyi 563000， Guizhou， China）

Abstract： HPLC method was used in simultaneous determination of seven types of catechin （+C）， （-）-gallocatechin （GC）， （-）-gallocatechin gallate （GCG）， L-epicatechin （EC）， （-）-epigallocatechin （EGC）， epigallocatechin gallate （EGCG）， （-）-epicatechin gallate （ECG）， and caffeine in zinc and selenium tea of Fenggang. The results showed that the percentage of average mean of catechins contents were 20.08% in samples， in which EGCG content was the highest. The percentage of average mean of caffeine content was 3.9%， and the average quality index of catechin was 556. It will provide the basic data for evaluating the quality of zinc and selenium tea of Fenggang.

Key words： zinc and selenium tea of Fenggang； catechins； caffeine

兒茶素類化合物是茶葉中一類含量較豐富的功能性活性成分，在新茶中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（以干葉計(jì)）為10%～20%。兒茶素類化合物具有較強(qiáng)的抗氧化特性，是決定茶葉品質(zhì)的關(guān)鍵因子，也是當(dāng)前食品、醫(yī)藥領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。咖啡因具有適度祛除疲勞、興奮神經(jīng)的作用，一直以來(lái)都備受關(guān)注。

鳳岡鋅硒茶不但口感醇爽、濃厚，產(chǎn)地環(huán)境條件優(yōu)越，是貴州重要的有機(jī)茶葉產(chǎn)品，現(xiàn)有研究已證實(shí)其茶葉產(chǎn)品同時(shí)含有較高的鋅、硒[1，2]。2006年，鳳岡鋅硒茶被國(guó)家質(zhì)檢總局列為貴州第4個(gè)國(guó)家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品。現(xiàn)有研究對(duì)鳳岡鋅硒綠茶中的兒茶素類品質(zhì)成分關(guān)注較少，這不利于地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品-鳳岡鋅硒茶的系統(tǒng)研究。因此，本研究擬通過(guò)高效液相色譜法（HPLC）對(duì)鳳岡鋅硒綠茶的兒茶素類物質(zhì)、咖啡因進(jìn)行分析，以期了解鳳岡鋅硒綠茶中兒茶素等品質(zhì)成分的特征，為茶葉產(chǎn)品的生產(chǎn)加工提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

于2012-2013年，依據(jù)鳳岡富鋅富硒茶地理標(biāo)志產(chǎn)地保護(hù)所界定的地域范圍，在貴州省遵義市鳳岡縣田壩隨機(jī)抽取了26個(gè)鳳岡鋅硒綠茶樣品。所有樣品均為獨(dú)芽、依照鳳岡富鋅富硒茶加工工藝進(jìn)行制作，樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎、過(guò)20目篩后密封備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 依據(jù)GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的測(cè)定方法》對(duì)樣品進(jìn)行處理。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制 將25 mL EDTA溶液（10 g/L）、25 mL抗壞血酸溶液（10 g/L）、50 mL乙腈、以去離子水定容至500 mL，制得混合溶液。

分別準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品適量，以上述混合溶液配制標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，其濃度分別為：0.484 6 mg/mL（GC）、2.450 0 mg/mL（EGC）、1.098 0 mg/mL（+C）、2.014 0 mg/mL（CAF）、2.008 0 mg/mL（EGCG）、1.019 0 mg/mL（EC）、0.441 1 mg/mL（GCG）、2.002 0 mg/mL（ECG）。

取上述儲(chǔ)備液GC、GCG各1.00 mL，EGC、CAF、EC、ECG各0.50 mL，EGCG 0.20 mL，+C 0.35 mL，以混合溶液溶解并定容至10 mL，即得混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.3 檢測(cè)條件 e2695高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司），流動(dòng)相A：90 mL乙腈、20 mL乙酸、2 mL EDTA，以去離子水定容至1 L；流動(dòng)相B：800 mL乙腈、20 mL乙酸、2 mL EDTA，以去離子水定容至1 L。

色譜柱為Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脫條件為：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm；進(jìn)樣體積為10 μL。

1.3 結(jié)果計(jì)算

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Excel 2003作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 總兒茶素含量

如圖1所示，對(duì)26個(gè)樣品的兒茶素含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，樣品中8種兒茶素總含量為12.17%～26.47%，兒茶素總含量平均值為20.08%。

2.2 兒茶素分布情況

鳳岡鋅硒綠茶中各類兒茶素的平均含量范圍及其各自所占比例如表1所示。鳳岡鋅硒綠茶的兒茶素類化合物的含量大小為EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5種兒茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品質(zhì)指數(shù)

根據(jù)阮玉成等[3]提出的“兒茶素品質(zhì)指數(shù)”的經(jīng)驗(yàn)公式：

兒茶素品質(zhì)指數(shù)=■ ×100%

由上式可計(jì)算出，鳳岡鋅硒茶的兒茶素品質(zhì)指數(shù)為400～765，平均值為556。

2.4 咖啡因含量

所測(cè)樣品中最低咖啡因含量為3.3%，最高咖啡因含量為4.5%，平均含量為3.9%。

3 小結(jié)與討論

相關(guān)研究指出，兒茶素類化合物具有抗氧化、抗菌、擴(kuò)張血管等功能，茶葉中兒茶素類化合物含量的高低也是茶葉對(duì)應(yīng)功能特性的體現(xiàn)。有研究表明茶葉中兒茶素含量一般在10%～20%[4]，而鳳岡鋅20%，可見(jiàn)其具有較高的品質(zhì)。但也有部分樣品中的兒茶素總量偏低，這可能與茶葉生產(chǎn)加工以及原料品質(zhì)有關(guān)。

在鳳岡鋅硒綠茶中EGCG、ECG和EGC等3種兒茶素的含量最高，占總兒茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的測(cè)定方法》中未包含的GCG和GC兒茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是綠茶中具有清除自由基和抗氧化能力最強(qiáng)的一種兒茶素，研究表明，EGCG的濃度為0.006 mg/mL時(shí)對(duì)氧自由基消除率為98%，濃度為0.1 mg/mL時(shí)，對(duì)羥自由基清除率為99.9%[4]。EGCG主要是從茶葉中提取、純化獲得。本研究發(fā)現(xiàn)鳳岡鋅硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作為EGCG提取的重要原料，也為鳳岡鋅硒茶的深加工提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉 義，邵樹(shù)勛. 鳳岡富鋅富硒茶園中的鋅及其形態(tài)分析[J]. 地球與環(huán)境，2010，38（3）：328-332.

[2] 劉 義，徐一帆，邵樹(shù)勛.貴州省鳳岡縣田壩村茶園土壤硒的含量及評(píng)價(jià)[J].貴州地質(zhì)，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程啟坤.茶兒茶素的組成與綠茶品質(zhì)的關(guān)系[J].園藝學(xué)報(bào)，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.綠茶提取物兒茶素及EGCG功能和發(fā)展?fàn)顩r[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào)，2010，29（3）：321-325.

色譜柱為Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脫條件為：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm；進(jìn)樣體積為10 μL。

1.3 結(jié)果計(jì)算

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Excel 2003作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 總兒茶素含量

如圖1所示，對(duì)26個(gè)樣品的兒茶素含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，樣品中8種兒茶素總含量為12.17%～26.47%，兒茶素總含量平均值為20.08%。

2.2 兒茶素分布情況

鳳岡鋅硒綠茶中各類兒茶素的平均含量范圍及其各自所占比例如表1所示。鳳岡鋅硒綠茶的兒茶素類化合物的含量大小為EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5種兒茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品質(zhì)指數(shù)

根據(jù)阮玉成等[3]提出的“兒茶素品質(zhì)指數(shù)”的經(jīng)驗(yàn)公式：

兒茶素品質(zhì)指數(shù)=■ ×100%

由上式可計(jì)算出，鳳岡鋅硒茶的兒茶素品質(zhì)指數(shù)為400～765，平均值為556。

2.4 咖啡因含量

所測(cè)樣品中最低咖啡因含量為3.3%，最高咖啡因含量為4.5%，平均含量為3.9%。

3 小結(jié)與討論

相關(guān)研究指出，兒茶素類化合物具有抗氧化、抗菌、擴(kuò)張血管等功能，茶葉中兒茶素類化合物含量的高低也是茶葉對(duì)應(yīng)功能特性的體現(xiàn)。有研究表明茶葉中兒茶素含量一般在10%～20%[4]，而鳳岡鋅20%，可見(jiàn)其具有較高的品質(zhì)。但也有部分樣品中的兒茶素總量偏低，這可能與茶葉生產(chǎn)加工以及原料品質(zhì)有關(guān)。

在鳳岡鋅硒綠茶中EGCG、ECG和EGC等3種兒茶素的含量最高，占總兒茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的測(cè)定方法》中未包含的GCG和GC兒茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是綠茶中具有清除自由基和抗氧化能力最強(qiáng)的一種兒茶素，研究表明，EGCG的濃度為0.006 mg/mL時(shí)對(duì)氧自由基消除率為98%，濃度為0.1 mg/mL時(shí)，對(duì)羥自由基清除率為99.9%[4]。EGCG主要是從茶葉中提取、純化獲得。本研究發(fā)現(xiàn)鳳岡鋅硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作為EGCG提取的重要原料，也為鳳岡鋅硒茶的深加工提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉 義，邵樹(shù)勛. 鳳岡富鋅富硒茶園中的鋅及其形態(tài)分析[J]. 地球與環(huán)境，2010，38（3）：328-332.

[2] 劉 義，徐一帆，邵樹(shù)勛.貴州省鳳岡縣田壩村茶園土壤硒的含量及評(píng)價(jià)[J].貴州地質(zhì)，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程啟坤.茶兒茶素的組成與綠茶品質(zhì)的關(guān)系[J].園藝學(xué)報(bào)，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.綠茶提取物兒茶素及EGCG功能和發(fā)展?fàn)顩r[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào)，2010，29（3）：321-325.

色譜柱為Kromasil 100-5 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），梯度洗脫條件為：0～10 min（100%A），10～32 min，（100%～80% A）；流量為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為278 nm；進(jìn)樣體積為10 μL。

1.3 結(jié)果計(jì)算

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Excel 2003作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 總兒茶素含量

如圖1所示，對(duì)26個(gè)樣品的兒茶素含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，樣品中8種兒茶素總含量為12.17%～26.47%，兒茶素總含量平均值為20.08%。

2.2 兒茶素分布情況

鳳岡鋅硒綠茶中各類兒茶素的平均含量范圍及其各自所占比例如表1所示。鳳岡鋅硒綠茶的兒茶素類化合物的含量大小為EGCG>EGC>ECG>EC>+C>GCG>GC，其中EGCG的含量最高，占65%左右。除了EGC和ECG所占比例在14%左右外，其余5種兒茶素所占的比例都在3%及以下。

2.3 品質(zhì)指數(shù)

根據(jù)阮玉成等[3]提出的“兒茶素品質(zhì)指數(shù)”的經(jīng)驗(yàn)公式：

兒茶素品質(zhì)指數(shù)=■ ×100%

由上式可計(jì)算出，鳳岡鋅硒茶的兒茶素品質(zhì)指數(shù)為400～765，平均值為556。

2.4 咖啡因含量

所測(cè)樣品中最低咖啡因含量為3.3%，最高咖啡因含量為4.5%，平均含量為3.9%。

3 小結(jié)與討論

相關(guān)研究指出，兒茶素類化合物具有抗氧化、抗菌、擴(kuò)張血管等功能，茶葉中兒茶素類化合物含量的高低也是茶葉對(duì)應(yīng)功能特性的體現(xiàn)。有研究表明茶葉中兒茶素含量一般在10%～20%[4]，而鳳岡鋅20%，可見(jiàn)其具有較高的品質(zhì)。但也有部分樣品中的兒茶素總量偏低，這可能與茶葉生產(chǎn)加工以及原料品質(zhì)有關(guān)。

在鳳岡鋅硒綠茶中EGCG、ECG和EGC等3種兒茶素的含量最高，占總兒茶素含量的90%以上，在GB/T 8313-2008《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的測(cè)定方法》中未包含的GCG和GC兒茶素的含量比例均在2%以下。EGCG是綠茶中具有清除自由基和抗氧化能力最強(qiáng)的一種兒茶素，研究表明，EGCG的濃度為0.006 mg/mL時(shí)對(duì)氧自由基消除率為98%，濃度為0.1 mg/mL時(shí)，對(duì)羥自由基清除率為99.9%[4]。EGCG主要是從茶葉中提取、純化獲得。本研究發(fā)現(xiàn)鳳岡鋅硒茶中的EGCG含量平均值在13.46%，可作為EGCG提取的重要原料，也為鳳岡鋅硒茶的深加工提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉 義，邵樹(shù)勛. 鳳岡富鋅富硒茶園中的鋅及其形態(tài)分析[J]. 地球與環(huán)境，2010，38（3）：328-332.

[2] 劉 義，徐一帆，邵樹(shù)勛.貴州省鳳岡縣田壩村茶園土壤硒的含量及評(píng)價(jià)[J].貴州地質(zhì)，2012，29（1）：72-76。

[3] 阮玉成，程啟坤.茶兒茶素的組成與綠茶品質(zhì)的關(guān)系[J].園藝學(xué)報(bào)，1964，3（3）：278-300.

[4] 尤 新.綠茶提取物兒茶素及EGCG功能和發(fā)展?fàn)顩r[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào)，2010，29（3）：321-325.