生物型人工硬腦膜在硬腦膜缺損中的實(shí)驗(yàn)研究

鐘寶，周波，羅赤星 全中平，羅心凱，張銘

（荊門(mén)市第二人民醫(yī)院神經(jīng)外科，湖北 荊門(mén) 448000）

硬腦膜修補(bǔ)術(shù)是神經(jīng)外科手術(shù)中維護(hù)人體解剖學(xué)完整及保護(hù)腦組織的主要手段，其修補(bǔ)過(guò)程中使用的材料主要為人工硬腦膜及自體膜，但由于人工硬腦膜材料均存在一定程度的缺點(diǎn)，臨床上探索新型修補(bǔ)材料方面的研究從未停止［1］。目前，有研究分析指出，一種新型的生物型人工硬腦膜在修復(fù)硬腦膜中有著極為顯著的療效［2］，為分析該種生物型人工硬腦膜與自體膜在硬腦膜修復(fù)術(shù)中的優(yōu)越性，本文選取實(shí)驗(yàn)犬為研究對(duì)象，均給予上述兩種修復(fù)材料行硬腦膜修復(fù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

選取的實(shí)驗(yàn)犬12只均統(tǒng)一由研究機(jī)構(gòu)提供，雌雄不限，依據(jù)實(shí)驗(yàn)犬生長(zhǎng)時(shí)間將其分成四組，每組3只，A組1月齡，B組4月齡，C組12月齡，D組24月齡；4組實(shí)驗(yàn)犬均預(yù)先飼養(yǎng)2周，記錄生活習(xí)性、健康狀況、發(fā)育情況等一般資料后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 方法

對(duì)4組實(shí)驗(yàn)犬均行硫噴妥鈉靜脈復(fù)合麻醉，將犬頭頂毛剃光，于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上，對(duì)手術(shù)操作區(qū)域行常規(guī)消毒、鋪巾，于頭頂正中線(xiàn)位取縱向方向切開(kāi)，充分暴露顱骨，隨后用高速電鉆對(duì)冠狀縫后中線(xiàn)兩側(cè)進(jìn)行鉆磨處理，制造一個(gè)直徑約12mm的骨窗，促使硬腦膜充分暴露，并在雙側(cè)剪出一個(gè)1cm×1.5cm的矩形硬腦膜，創(chuàng)造硬腦膜缺損，隨后將生物型人工硬腦膜修剪成相應(yīng)形狀的修補(bǔ)材料，對(duì)缺損處進(jìn)行修補(bǔ)，保持光滑面朝向腦表面，并縫合周邊肌肉；另外，取右側(cè)手術(shù)操作區(qū)的顱骨骨膜，其大小較右側(cè)硬腦膜缺損面積稍大，將取出膜泡于生理鹽水中備用，應(yīng)用時(shí)同樣保持其光滑面朝向腦表面，其余步驟同生物型人工硬腦膜修補(bǔ)操作相同。

1.3 術(shù)后處理及標(biāo)本取樣

術(shù)后均給予青霉素預(yù)防感染處理，并行常規(guī)飼養(yǎng)；各組實(shí)驗(yàn)犬達(dá)到飼養(yǎng)設(shè)定時(shí)間（8個(gè)月）后，處死，并取樣修補(bǔ)部位組織，觀察修補(bǔ)材料內(nèi)外表面及與周邊組織的關(guān)系，查看是否存在囊腫、硬結(jié)。同時(shí)，對(duì)取樣標(biāo)本行常規(guī)福爾馬林液處理，固定7d后，行石蠟包埋和HE染色。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 動(dòng)物觀察結(jié)果

4組動(dòng)物手術(shù)均成功完成，術(shù)后均表現(xiàn)正常，未出現(xiàn)明顯的運(yùn)動(dòng)障礙。行常規(guī)血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，術(shù)前及處死前四組動(dòng)物白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果對(duì)比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 術(shù)前及處死前白細(xì)胞計(jì)數(shù)對(duì)比 ×109／L

2.2 取樣標(biāo)本觀察

肉眼觀察發(fā)現(xiàn)，生物型人工硬腦膜外表面與頭皮組織粘連程度較輕，僅存在少許血絲，較易剝離；切割取出標(biāo)本后，發(fā)現(xiàn)硬腦膜與修補(bǔ)材料之間愈合較為平整，可觀察部分縫合絲線(xiàn)；而自體膜和頭皮組織粘連程度較生物型人工硬腦膜重，且在界面可觀察到供血組織，較易分離，但滲血嚴(yán)重。

對(duì)各組實(shí)驗(yàn)犬取出的標(biāo)本進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，生物型人工硬腦膜與硬腦膜的生長(zhǎng)極為接近，可在其內(nèi)表面上觀察到明顯新生上皮組織，且?guī)缀跷磁c腦表面發(fā)生粘連跡象；而對(duì)自體膜內(nèi)表面觀察發(fā)現(xiàn)，其與腦表面之間有明顯的粘連跡象，且存在柱狀粘連。

2.3 組織學(xué)觀察

對(duì)各組實(shí)驗(yàn)犬解剖后取樣材料行組織學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，生物型人工硬腦膜材料和犬本身硬腦膜之間排異反應(yīng)不明顯，無(wú)明顯的出血、供血等癥狀，HE染色結(jié)果顯示，生物型人工硬腦膜內(nèi)側(cè)表面出現(xiàn)大量的上皮細(xì)胞組織，可觀察到膠原蛋白增多及纖維母細(xì)胞增生，且在修補(bǔ)材料整體減少，被降解且內(nèi)部長(zhǎng)出細(xì)胞組織夾層。見(jiàn)圖1。

圖1 各組術(shù)后HE染色后組織觀察結(jié)果

3 討論

硬腦膜缺損主要由創(chuàng)傷、手術(shù)操作、腫瘤侵蝕等因素造成，是神經(jīng)外科常常需要面對(duì)和解決的難題，而硬腦膜修補(bǔ)術(shù)能有效修補(bǔ)缺損部位，降低癲癇、顱內(nèi)感染、腦脊液漏等并發(fā)癥發(fā)生率。

臨床上，對(duì)于修復(fù)硬腦膜時(shí)應(yīng)用的修補(bǔ)材料要求較高，不僅需要其具備優(yōu)良的機(jī)械特性，還需要和受體組織有著較為優(yōu)良的組織相容性；同時(shí)還要具備允許組織細(xì)胞能在其內(nèi)部生長(zhǎng)、代謝，并逐漸對(duì)修補(bǔ)材料產(chǎn)生降解和可代謝作用，使得新生成的組織能有效替代修補(bǔ)材料，完成實(shí)際意義上的硬腦膜重建［3］。

本研究顯示，實(shí)驗(yàn)犬在應(yīng)用生物型人工硬腦膜材料行修補(bǔ)術(shù)后，該材料與腦組織的相容性明顯較自體膜優(yōu)良，且產(chǎn)生的上皮細(xì)胞組織表明其能有效被犬自身組織降解、蠶食和代替，并且該材料光滑面不會(huì)與腦皮層組成產(chǎn)生粘連，且未發(fā)現(xiàn)明顯排異反應(yīng)，這說(shuō)明該修補(bǔ)材料不僅效果優(yōu)良性高，且安全性好，能在各年齡組有效達(dá)到硬腦膜重建的治療效果，是一種安全性的修補(bǔ)材料。

［1］李文輝，吳日樂(lè)，岑蓮.人工硬腦膜修補(bǔ)材料的研究及其臨床應(yīng)用［J］.組織工程與重建外科雜志，2013，9（2）：113－115.

［2］陳振軍.硬腦膜替代材料的研究與應(yīng)用［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2008，12（14）：2697－2700.

［3］陶小虎.人工硬腦膜修補(bǔ)材料在神經(jīng)外科的應(yīng)用［J］.中國(guó)組織工程研究，2012，16（12）：2217－2220.