急性腦梗死中醫(yī)證型與血清ET-1、vWF、H-FABP、PAO的相關(guān)性研究＊

李定祥，方學(xué)杰，劉曉丹，李 平，劉文華，文 果，鄧奕輝

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合心腦疾病防治湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞生物學(xué)與分子技術(shù)湖南省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)沙 410208)

急性腦梗死(Acute Cerebral Infarction，ACI)屬于中醫(yī)學(xué)“中風(fēng)”范疇，包含風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證、氣虛證、陰虛陽亢證6個(gè)中醫(yī)證型［1］。借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，探討血清生物學(xué)指標(biāo)與中醫(yī)證型之間的相關(guān)性，能夠使中風(fēng)病中醫(yī)證型的辨證進(jìn)一步客觀化、規(guī)范化;尋找對(duì)不同中醫(yī)證型具有診斷價(jià)值的客觀/微觀指標(biāo)，也是對(duì)“四診客觀化”的進(jìn)一步深化。本研究通過觀察90例急性腦梗死患者急性期內(nèi)血清內(nèi)皮素-1(Endothelin-1，ET-1)、血管假性血友病因子(Von Willebrand Factor，vWF)、心型脂肪酸結(jié)合蛋白(Heart Fatty Acid Binding Protein，H-FABP)和多胺氧化酶(Polyamine Oxidase，PAO)含量的變化，探討急性腦梗死各中醫(yī)證型與相關(guān)血清生物學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，為急性腦梗死辨證客觀化做一些初步的探討。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

1.1.1 一般資料 90例急性腦梗死患者均為2012年10月至2012年12月瀏陽市中醫(yī)醫(yī)院中風(fēng)科與瀏陽市集里醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院患者。其中男52例，女38例，年齡40歲～84歲，平均年齡65.58歲，均為首次中風(fēng)且72 h內(nèi)起病。經(jīng)頭顱CT或核磁共振成像(MRI)檢查，確診為急性腦梗死;風(fēng)證組、火熱證組、痰證組、血瘀證組、氣虛證組、陰虛陽亢證組各15例;另選15例同期健康來院體檢者作為對(duì)照組，對(duì)照組與各組年齡、性別等方面比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 中醫(yī)診斷及證候評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)采用國(guó)家中醫(yī)藥管理局腦病急癥科研組制定的《中風(fēng)病辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)》［1］進(jìn)行診斷及評(píng)分。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了中風(fēng)病風(fēng)證、火證、痰證、瘀證、氣虛證、陰虛陽亢證的證候診斷標(biāo)準(zhǔn)，適用于中風(fēng)病證候辨別。所有病例同時(shí)采用NISSH對(duì)患者的神經(jīng)功能缺失進(jìn)行評(píng)分，均由患者住院負(fù)責(zé)醫(yī)師與上級(jí)醫(yī)師商定于患者住院后24 h內(nèi)完成。

1.1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) 符合以上診斷和辨證標(biāo)準(zhǔn);人院前未用藥或正規(guī)治療。

1.1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) 短暫性腦缺血發(fā)作、腦出血、腦栓塞及蛛網(wǎng)膜下腔出血、溶栓治療患者;經(jīng)檢查證實(shí)由腦腫瘤、腦外傷等引起的卒中患者;有卒中病史且遺留后遺癥者;合并明確感染性疾病的患者;血液病患者、免疫性疾病或腫瘤患者;內(nèi)分泌疾病患者;無心、肝、腎等臟器嚴(yán)重并發(fā)癥者。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集與處理 所有病例均于入院后或第2天清晨空腹12 h后抽取靜脈血2～4 ml，盛于普通管中，采集后3000 r/min離心5 min，分離血清，－80℃冰箱待測(cè)。正常對(duì)照組血清收集同病例組。

1.2.2 指標(biāo)檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，檢測(cè)血清 ET-1、vWF、H-FABP、PAO，ELISA試劑盒由長(zhǎng)沙贏潤(rùn)生物技術(shù)有限公司提供，并嚴(yán)格按說明書操作。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，檢測(cè)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，P＜0.05、P＜0.01為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 急性腦梗死各中醫(yī)證型與對(duì)照組ET-1、vWF、H-FABP、PAO含量比較(±s)

表1 急性腦梗死各中醫(yī)證型與對(duì)照組ET-1、vWF、H-FABP、PAO含量比較(±s)

注:與正常對(duì)照組比較:*P＜0.05;與風(fēng)證組比較:※P＜0.05;與火熱證組比較:#P＜0.05;與痰證組比較:●P＜0.05;與血瘀證組比較:▲P＜0.05;與氣虛證組比較:△P＜0.05;與陰虛陽亢證組比較:◇P＜0.05

組別 例數(shù) ET-1(ng/L)vWF(u/L)H-FABP(ng/L)PAO(u/L)正 常 對(duì) 照 組 15 132.69± 8.73 261.09±14.99 876.47± 51.91 71.08±6.20風(fēng) 證 組 15 153.27±13.68＊△ 275.05±24.27 963.75± 97.89* 90.83±12.76*火 熱 證 組 15 186.15±13.08＊※▲△ 391.00±32.57＊※●▲△ 1167.18±103.86＊※●▲△◇ 137.38±21.00＊※●▲△◇痰 證 組 15 178.28±24.95＊※△ 285.34±21.50*#△ 1005.61± 95.88*#△◇ 97.31±19.28*#血 瘀 證 組 15 158.73±16.26* 279.98±21.01*# 927.86± 90.35#● 85.94±15.74*#氣 虛 證 組 15 133.41± 9.39※●▲ 264.73±23.39#● 892.15± 85.21※#● 81.96±13.55*#●陰 虛 陽 亢 證 組 15 133.84± 7.60※●▲ 262.49±16.78#● 886.99± 81.28※#● 72.31± 8.95#●

3 討論

通過前期的文獻(xiàn)研究［2］，課題組篩選出與急性腦梗死急性期密切相關(guān)的生物學(xué)指標(biāo)作為急性腦梗死各中醫(yī)證型關(guān)聯(lián)性的研究指標(biāo)。

急性腦梗死患者血漿ET-1水平顯著高于健康人［3］，是腦梗死發(fā)病機(jī)制和進(jìn)展過程的重要因素，它可使缺血區(qū)側(cè)支血管產(chǎn)生強(qiáng)烈而持久的收縮，加重缺血中心區(qū)及組織的損傷［4，5］。本實(shí)驗(yàn)研究表明，實(shí)證組(風(fēng)證、火熱證、痰證、血瘀證組)ET-1水平較對(duì)照組和虛證組(氣虛證、陰虛陽亢證組)高，尤以火熱證組最甚，這與中醫(yī)所言“邪實(shí)”有關(guān)，說明實(shí)證型發(fā)病組織器官的功能損害較虛證型更為嚴(yán)重。文龍龍等［6］也做了缺血中風(fēng)急性期ET動(dòng)態(tài)變化及其與證候的相關(guān)性研究，與本研究結(jié)果一致。vWF主要存在于內(nèi)皮細(xì)胞、巨核細(xì)胞及血小板中，在血小板與血管壁的結(jié)合中起著重要的橋梁作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞受損后，vWF合成增加，并大量釋放入血，因此血清vWF水平升高被認(rèn)為是血管內(nèi)皮損傷的標(biāo)志［7，8］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，火熱證組與痰證組血清vWF水平較高。陳鐘杰等［9］研究認(rèn)為，大面積腦梗死組以火熱證發(fā)生率最高，風(fēng)證、痰證次之，中、小面積腦梗死組以血瘀證、氣虛證、陰虛陽亢證偏多。心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)是脂肪酸結(jié)合蛋白(FABPs)超家族中的一種亞型，與急性腦梗死的關(guān)系最為密切，在腦組織中主要表達(dá)于神經(jīng)元，細(xì)胞死亡和損傷可引起H-FABP滲漏，從而導(dǎo)致其血清濃度升高，血清H-FABP含量在揭示腦梗死嚴(yán)重程度及判斷其預(yù)后等方面具有重要的臨床實(shí)用價(jià)值［10～12］。本次結(jié)果也表明，火熱證組與痰證組血清H-FABP含量明顯增高。多胺氧化酶(PAO)對(duì)多胺含量的調(diào)節(jié)起重要作用，它可以催化精胺、精脒轉(zhuǎn)化成為腐胺，而腐胺在急性腦梗死后血腦屏障損傷、血管源性腦水腫形成、再灌注性神經(jīng)元損傷等病理過程中起重要作用［13］。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，血清PAO的含量也以火熱證組最高。火熱證組血清HFABP與PAO增高可能與火熱證組腦缺血損傷程度相對(duì)較重有關(guān)。

綜上所述，急性腦梗死中醫(yī)證候與血清ET-1、vWF、H-FABP、PAO的含量密切相關(guān)，尤以火熱證組、諸實(shí)證組變化較為明顯，以上指標(biāo)可以作為急性腦梗死虛實(shí)證及各相關(guān)證型之間的辨證參考。由于本研究的病例尚少，僅做了一些起步工作。如何將研究進(jìn)行的更深入、更細(xì)化，將研究與臨床密切結(jié)合起來，并將研究成果轉(zhuǎn)化到臨床應(yīng)用方面，尚需進(jìn)行深入探討。

［1］國(guó)家中醫(yī)藥管理局腦病急癥協(xié)作組.中風(fēng)病辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)(試行)［S］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1994，17(3):64-66.

［2］方學(xué)杰，鄧奕輝.急性腦梗死與血漿 ET-1、vWF、H-FABP、PAO相關(guān)性的研究進(jìn)展［J］.甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，29(5):76-79.

［3］王松，郭洪志.血漿內(nèi)皮素-1水平變化在急性腦梗死誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征中的意義［J］.腦與神經(jīng)疾病雜志，2006，14(5):366-368.

［4］杭麗瑋，周建忠，王珍，等.內(nèi)皮素-1基因多態(tài)性與高血壓缺血性卒中的關(guān)系［J］.西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2009，31(1):116-120.

［5］周志斌，余永潔，朱正芳，等.急性腦梗死患者的血漿內(nèi)皮素-1變化及其相關(guān)因素分析［J］.心腦血管病防治，2010，10(2):93-94.

［6］文龍龍，招遠(yuǎn)祺，蔡業(yè)峰，等.缺血中風(fēng)急性期CGRP、ET動(dòng)態(tài)變化及其與證候的相關(guān)性［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2008，29(6):932-934.

［7］謝靖，古麗松，耿玉榮，等.急性腦梗死患者血清E-selection，ICAM-1、vWF的表達(dá)及臨床研究［J］.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17(4):32-33.

［8］顧昊，張穎冬，徐俊，等.凝血相關(guān)因子水平與急性腦梗死相關(guān)性研究［J］.血栓與止血學(xué)，2010，16(6):250-258.

［9］陳鐘杰，李武峰.缺血性中風(fēng)急性期證型分析及辨證體會(huì)［J］.浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，16(4):224.

［10］Onur Akpnar，Srma Geyik，Ay a Akaln，et al.H-FABP in the early diagnosis of stroke［J］.Chinese Journal of Neurology，2009，256(11):1922-1923.

［11］戴世榮，王興山，邱谷，等.急性腦梗死患者血清 H-FABP的動(dòng)態(tài)變化及臨床意義［J］.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，25(3):143-145.

［12］邱晨紅，趙中，王鋒，等.心型脂肪酸結(jié)合蛋白作為急性腦梗死早期診斷的生物學(xué)指標(biāo)的高敏性［J］.國(guó)際腦血管病雜志，2006，l4(9):648-650.

［13］劉宏偉，姜冰，萬新，等.大鼠局灶性腦缺血再灌注后 PAO活性和多胺含量變化及意義［J］.中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2005，30(4):452-455.