ZEB2、E—cad在鱗狀宮頸癌細胞的表達與疾病分期的關系

汪泉

摘 要 目的：探討宮頸癌細胞中E盒結合鋅指蛋白2（ZEB2）、E-鈣黏附蛋白（E-cad）表達和疾病分期的關系。方法：選取2007年6月至2011年11月期間我院病理科確診的鱗狀宮頸癌組織62例，采用免疫組織化學法（IHC）檢測ZEB2、E-cad蛋白的表達情況，回顧性分析患者臨床報告資料，采用單因素和多因素（logistic回歸分析法）對ZEB2、E-cad蛋白表達與疾病分期的關系進行分析。且另選癌旁正常組織10例作為對照。結果：鱗狀宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達陽性率高于癌旁癌黏膜組織，E-cad蛋白表達陽性率低于后者（P<0.05）；單因素結果分析顯示，ZEB2、E-cad蛋白表達與宮頸癌FIGO分期、分化程度及淋巴結轉移均有關（P均<0.05）；logistic回歸分析結果顯示，FIGO分期、淋巴結轉移、E-cad表達及 ZEB2 表達均可作為宮頸癌疾病分期的因素。結論：ZEB2 、E-cad蛋白表達有助于判斷宮頸癌發展、浸潤和轉移情況，利于患者預后方案制定，有望成為宮頸癌疾病分期的指標。

關鍵詞 ZEB2 E-cad 表達 宮頸癌 疾病分期

中圖分類號：R737.33； R730.3 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533（2014）21-0049-04

The expressions of ZEB2 and E-cadand in cervical cancer cells

and their relationship with the stage of disease*

WANG Quan**

（Department of Pathology， The Maternal and Child Care Service Centre of Jiujiang City， Jiujiang 332000， China）

ABSTRACT Objective： To investigate the relationship between the expressions of zinc finger E-box-binding protein 2 （ZEB2） and E-cadherin （E-cad） in cervical cancer cells and the stages of disease. Methods： Sixty-two cases of squamous cervical cancer tissue diagnosed in the department of pathology of our hospital from June 2007 to November 2012 were selected. The expressions of ZEB2 and E-cad were detected by immunohistochemical method. Clinical data were retrospectively analyzed. The relationship between the expressions and the stages of disease was analyzed by single factor and multiple factors （logistic regression analysis）. Ten cases of normal tissue adjacent to carcinoma were selected as a control. Results： The positive rate of ZEB2 expression in the tissues of squamous cervical carcinoma was higher than that in the cancer mucosa tissue adjacent to carcinoma while the positive rate of E-cad expression was lower （P<0.05）. The results of single factor analysis showed that ZEB2 and E-cad expressions were related to cervical cancer FIGO staging， differentiation degree and lymph node metastasis （P<0.05）. The results of logistic regression analysis showed that ZEB2 and E-cad expressions， FIGO staging and lymph node metastasis can be used as the factors for the stages of cervical cancer. Conclusion： ZEB2 and E-cad expressions are of benefit to the determination of the situation of the development， invasion and metastasis of cervical cancer and the development of prognosis program， which can be expected to become the index of staging cervical cancer.

KEY WORDS ZEB2； E-cad； expressions； cervical cancer； disease stage

宮頸癌是我國最常見的婦科惡心腫瘤之一，普遍分為鱗狀癌、腺癌和腺鱗癌，發病呈年輕化趨勢，早期階段無明顯癥狀和體征，易被誤診或漏診，在發展階段會直接浸潤周圍組織和發生淋巴結轉移[1]。近年來宮頸細胞學檢測被廣泛使用，有助于有效預防和治療宮頸癌，E-鈣黏附蛋白（E-cad）普遍存在于體內各種上皮細胞，能有效抑制腫瘤細胞的轉移和浸潤行為，降低腫瘤細胞的危害性[2]。E盒結合鋅指蛋白2（zinc finger E-box-binding protein，ZEB2）與E-cad蛋白啟動子E2盒具有良好的結合性，阻礙E-cad蛋白的合成，加強了腫瘤細胞的轉移和浸潤能力[3]。本實驗采用免疫組織化學法測定ZEB2、E-cad蛋白在宮頸黏膜組織中表達情況，探討ZEB2、E-cad蛋白表達與宮頸癌及其疾病分期的關系，現將結果報道如下。

資料與方法

臨床資料

選取2007年6月至2011年11月期間我院病理科確診并手術切除的宮頸癌組織62例，均經臨床病理確診，且另選癌旁正常組織10例作為對照。患者年齡24～69歲，平均年齡（54.63±6.37）歲，對宮頸癌組織按照國際婦產科聯盟（FIGO）分期標準分為：早期34例、晚期28例；分化程度分為：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴結轉移：發生41例、未發生21例。所有患者術前均未有放療史、化療史，術后切除的癌變組織和癌旁組織均采用常規處理并使用石蠟包埋。術后對所有患者進行為期2年的隨訪，統計并記錄患者各項臨床資料。

方法

對所有組織采用免疫組織化學法（IHC）檢測ZEB2、E-cad蛋白的表達，實驗步驟嚴格按照IHC說明書實行，陽性檢測一抗均按1∶100制成稀釋液，陽性對照檢測均使用已知陽性切片，陰性對照檢測均使用磷酸鹽緩沖液代替一抗。結果評定同時由兩名專業病理醫師鑒定，標準為顏色深淺程度：無色（0分）、淡黃（1分）、棕黃（2分）、棕褐（3分）；陽性細胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），兩項評分相乘結果大于3分為陽性[4]。

統計學數據處理

采用SPSS 16.0統計軟件處理數據，對計數資料比較采用χ2檢驗或確切概率法分析，對宮頸癌患者各項病理特征與預后情況關系采用logistic回歸法分析。

結果

宮頸癌和癌旁黏膜組織中 ZEB2、E-cad蛋白表達情況對比

宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達陽性率高于癌旁黏膜組織，E-cad蛋白表達陽性率低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于細胞質，呈淡黃色至棕褐色顆粒；E-cad蛋白主要定位于細胞膜和細胞質，呈棕褐色顆粒（表1，圖1）。

宮頸癌組織臨床特征中ZEB2、E-cad蛋白陽性表達單因素分析

宮頸癌組織中ZEB2、E-cad蛋白表達與年齡、飲酒無關（P均>0.05），與宮頸癌FIGO分期、分化程度及淋巴結轉移均有關（P均<0.05，表2）。

宮頸癌患者疾病分期影響因素logistic回歸分析

logistic回歸分析結果顯示，FIGO 分期、淋巴結轉移、E-cad、ZEB2 表達水平均可作為宮頸癌疾病分期獨立預測因素（表3）。

討論

E-cad蛋白屬于鈣依賴性跨膜糖蛋白，具有調節和保護上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通過維持上皮細胞的極性和調節間質細胞之間的黏附能力，可降低腫瘤細胞在正常上皮細胞的依附能力，使腫瘤細胞從原發病灶脫落[6]。當E-cad蛋白合成受阻或功能出現異常時，上皮細胞會出現功能障礙，上皮表層極性混亂和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白過度表達會與E-cad蛋白中啟動子E2盒相結合，降低E-cad蛋白對上皮細胞的調節作用和對腫瘤細胞的抑制作用，使腫瘤細胞易形成侵入性繁殖且會發生散發性浸潤和轉移行為，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本實驗結果顯示，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中高表達，在癌旁組織中低表達，癌細胞分化程度越低，ZEB2蛋白表達程度越高，宮頸癌組織中發生淋巴結轉移ZEB2蛋白表達程度高于淋巴結未轉移，晚期宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達程度高于早期宮頸癌組織。logistic回歸分析結果顯示，ZEB2蛋白表達可作為宮頸癌遠期療效的獨立危險因素。E-cad蛋白在宮頸癌組織中低表達，在癌旁組織中高表達，E-cad蛋白表達與宮頸癌組織的FIGO分期、分化程度、淋巴結轉移情況有關聯，表達情況與ZEB2蛋白表達情況相反，說明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回歸分析結果顯示，E-cad蛋白表達可作為宮頸癌疾病分期的獨立因素。ZEB2蛋白在宮頸癌組織中過度表達，通過與E-cad蛋白啟動子結合，減少了患者體內E-cad基因的轉錄，降低了患者體內上皮細胞的功能調節作用，使患者體內細胞與細胞之間、細胞與基質之間的黏附能力下降，促使了腫瘤細胞發展和轉移。因此，醫護人員應當對此有足夠的重視，為患者遠期治療盡早確立合適的治療方案。

綜上所述，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中過度表達，阻礙具有抑制腫瘤細胞浸潤、轉移的E-cad蛋白合成，增加了癌細胞擴散轉移的幾率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表達有望成為宮頸癌惡性程度及疾病分期的重要指標。

參考文獻

王鑾虹， 李俊東， 云徑平， 等. B23和Ki67在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

張夢嵐， 賀菊香， 李菊英. 宮頸鱗癌組織中Snai2和E-cadherin的表達及意義[J]. 山東醫藥， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟躍進， 郭曉峰， 等. 宮頸癌組織中ZEB2和E-cad蛋白的表達[J]. 鄭州大學學報（醫學版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陳帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

張榮榮， 王紅， 張萍. 宮頸癌組織中Twist與E-cadherin蛋白的表達及其意義[J]. 海南醫學， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江慶萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌發生發展中的意義思義[J]. 中國現代醫生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宮頸癌組織SLeX、CD44v6和E-Cad表達及其臨床意義[J]. 青島大學醫學院學報， 2010， 46（1）： 10-12.

吳艷， 傅芬， 周艷芳. Dysadherin、E-cadherin在宮頸癌中的表達及意義[J]. 實用醫學雜志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）

資料與方法

臨床資料

選取2007年6月至2011年11月期間我院病理科確診并手術切除的宮頸癌組織62例，均經臨床病理確診，且另選癌旁正常組織10例作為對照。患者年齡24～69歲，平均年齡（54.63±6.37）歲，對宮頸癌組織按照國際婦產科聯盟（FIGO）分期標準分為：早期34例、晚期28例；分化程度分為：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴結轉移：發生41例、未發生21例。所有患者術前均未有放療史、化療史，術后切除的癌變組織和癌旁組織均采用常規處理并使用石蠟包埋。術后對所有患者進行為期2年的隨訪，統計并記錄患者各項臨床資料。

方法

對所有組織采用免疫組織化學法（IHC）檢測ZEB2、E-cad蛋白的表達，實驗步驟嚴格按照IHC說明書實行，陽性檢測一抗均按1∶100制成稀釋液，陽性對照檢測均使用已知陽性切片，陰性對照檢測均使用磷酸鹽緩沖液代替一抗。結果評定同時由兩名專業病理醫師鑒定，標準為顏色深淺程度：無色（0分）、淡黃（1分）、棕黃（2分）、棕褐（3分）；陽性細胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），兩項評分相乘結果大于3分為陽性[4]。

統計學數據處理

采用SPSS 16.0統計軟件處理數據，對計數資料比較采用χ2檢驗或確切概率法分析，對宮頸癌患者各項病理特征與預后情況關系采用logistic回歸法分析。

結果

宮頸癌和癌旁黏膜組織中 ZEB2、E-cad蛋白表達情況對比

宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達陽性率高于癌旁黏膜組織，E-cad蛋白表達陽性率低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于細胞質，呈淡黃色至棕褐色顆粒；E-cad蛋白主要定位于細胞膜和細胞質，呈棕褐色顆粒（表1，圖1）。

宮頸癌組織臨床特征中ZEB2、E-cad蛋白陽性表達單因素分析

宮頸癌組織中ZEB2、E-cad蛋白表達與年齡、飲酒無關（P均>0.05），與宮頸癌FIGO分期、分化程度及淋巴結轉移均有關（P均<0.05，表2）。

宮頸癌患者疾病分期影響因素logistic回歸分析

logistic回歸分析結果顯示，FIGO 分期、淋巴結轉移、E-cad、ZEB2 表達水平均可作為宮頸癌疾病分期獨立預測因素（表3）。

討論

E-cad蛋白屬于鈣依賴性跨膜糖蛋白，具有調節和保護上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通過維持上皮細胞的極性和調節間質細胞之間的黏附能力，可降低腫瘤細胞在正常上皮細胞的依附能力，使腫瘤細胞從原發病灶脫落[6]。當E-cad蛋白合成受阻或功能出現異常時，上皮細胞會出現功能障礙，上皮表層極性混亂和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白過度表達會與E-cad蛋白中啟動子E2盒相結合，降低E-cad蛋白對上皮細胞的調節作用和對腫瘤細胞的抑制作用，使腫瘤細胞易形成侵入性繁殖且會發生散發性浸潤和轉移行為，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本實驗結果顯示，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中高表達，在癌旁組織中低表達，癌細胞分化程度越低，ZEB2蛋白表達程度越高，宮頸癌組織中發生淋巴結轉移ZEB2蛋白表達程度高于淋巴結未轉移，晚期宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達程度高于早期宮頸癌組織。logistic回歸分析結果顯示，ZEB2蛋白表達可作為宮頸癌遠期療效的獨立危險因素。E-cad蛋白在宮頸癌組織中低表達，在癌旁組織中高表達，E-cad蛋白表達與宮頸癌組織的FIGO分期、分化程度、淋巴結轉移情況有關聯，表達情況與ZEB2蛋白表達情況相反，說明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回歸分析結果顯示，E-cad蛋白表達可作為宮頸癌疾病分期的獨立因素。ZEB2蛋白在宮頸癌組織中過度表達，通過與E-cad蛋白啟動子結合，減少了患者體內E-cad基因的轉錄，降低了患者體內上皮細胞的功能調節作用，使患者體內細胞與細胞之間、細胞與基質之間的黏附能力下降，促使了腫瘤細胞發展和轉移。因此，醫護人員應當對此有足夠的重視，為患者遠期治療盡早確立合適的治療方案。

綜上所述，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中過度表達，阻礙具有抑制腫瘤細胞浸潤、轉移的E-cad蛋白合成，增加了癌細胞擴散轉移的幾率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表達有望成為宮頸癌惡性程度及疾病分期的重要指標。

參考文獻

王鑾虹， 李俊東， 云徑平， 等. B23和Ki67在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

張夢嵐， 賀菊香， 李菊英. 宮頸鱗癌組織中Snai2和E-cadherin的表達及意義[J]. 山東醫藥， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟躍進， 郭曉峰， 等. 宮頸癌組織中ZEB2和E-cad蛋白的表達[J]. 鄭州大學學報（醫學版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陳帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

張榮榮， 王紅， 張萍. 宮頸癌組織中Twist與E-cadherin蛋白的表達及其意義[J]. 海南醫學， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江慶萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌發生發展中的意義思義[J]. 中國現代醫生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宮頸癌組織SLeX、CD44v6和E-Cad表達及其臨床意義[J]. 青島大學醫學院學報， 2010， 46（1）： 10-12.

吳艷， 傅芬， 周艷芳. Dysadherin、E-cadherin在宮頸癌中的表達及意義[J]. 實用醫學雜志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）

資料與方法

臨床資料

選取2007年6月至2011年11月期間我院病理科確診并手術切除的宮頸癌組織62例，均經臨床病理確診，且另選癌旁正常組織10例作為對照。患者年齡24～69歲，平均年齡（54.63±6.37）歲，對宮頸癌組織按照國際婦產科聯盟（FIGO）分期標準分為：早期34例、晚期28例；分化程度分為：已分化15例、分化中28例、未分化19例；淋巴結轉移：發生41例、未發生21例。所有患者術前均未有放療史、化療史，術后切除的癌變組織和癌旁組織均采用常規處理并使用石蠟包埋。術后對所有患者進行為期2年的隨訪，統計并記錄患者各項臨床資料。

方法

對所有組織采用免疫組織化學法（IHC）檢測ZEB2、E-cad蛋白的表達，實驗步驟嚴格按照IHC說明書實行，陽性檢測一抗均按1∶100制成稀釋液，陽性對照檢測均使用已知陽性切片，陰性對照檢測均使用磷酸鹽緩沖液代替一抗。結果評定同時由兩名專業病理醫師鑒定，標準為顏色深淺程度：無色（0分）、淡黃（1分）、棕黃（2分）、棕褐（3分）；陽性細胞百分比：0%（0分）、1%～25%（1分）、25%～50%（2分）、50%～75%（3分），>75%（4分），兩項評分相乘結果大于3分為陽性[4]。

統計學數據處理

采用SPSS 16.0統計軟件處理數據，對計數資料比較采用χ2檢驗或確切概率法分析，對宮頸癌患者各項病理特征與預后情況關系采用logistic回歸法分析。

結果

宮頸癌和癌旁黏膜組織中 ZEB2、E-cad蛋白表達情況對比

宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達陽性率高于癌旁黏膜組織，E-cad蛋白表達陽性率低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。ZEB2 蛋白主要定位于細胞質，呈淡黃色至棕褐色顆粒；E-cad蛋白主要定位于細胞膜和細胞質，呈棕褐色顆粒（表1，圖1）。

宮頸癌組織臨床特征中ZEB2、E-cad蛋白陽性表達單因素分析

宮頸癌組織中ZEB2、E-cad蛋白表達與年齡、飲酒無關（P均>0.05），與宮頸癌FIGO分期、分化程度及淋巴結轉移均有關（P均<0.05，表2）。

宮頸癌患者疾病分期影響因素logistic回歸分析

logistic回歸分析結果顯示，FIGO 分期、淋巴結轉移、E-cad、ZEB2 表達水平均可作為宮頸癌疾病分期獨立預測因素（表3）。

討論

E-cad蛋白屬于鈣依賴性跨膜糖蛋白，具有調節和保護上皮功能完整性、黏附性的作用[5]，通過維持上皮細胞的極性和調節間質細胞之間的黏附能力，可降低腫瘤細胞在正常上皮細胞的依附能力，使腫瘤細胞從原發病灶脫落[6]。當E-cad蛋白合成受阻或功能出現異常時，上皮細胞會出現功能障礙，上皮表層極性混亂和黏附能力下降[7]。ZEB2蛋白過度表達會與E-cad蛋白中啟動子E2盒相結合，降低E-cad蛋白對上皮細胞的調節作用和對腫瘤細胞的抑制作用，使腫瘤細胞易形成侵入性繁殖且會發生散發性浸潤和轉移行為，加重患者的病情和增加患者痛楚[8]。

本實驗結果顯示，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中高表達，在癌旁組織中低表達，癌細胞分化程度越低，ZEB2蛋白表達程度越高，宮頸癌組織中發生淋巴結轉移ZEB2蛋白表達程度高于淋巴結未轉移，晚期宮頸癌組織中ZEB2蛋白表達程度高于早期宮頸癌組織。logistic回歸分析結果顯示，ZEB2蛋白表達可作為宮頸癌遠期療效的獨立危險因素。E-cad蛋白在宮頸癌組織中低表達，在癌旁組織中高表達，E-cad蛋白表達與宮頸癌組織的FIGO分期、分化程度、淋巴結轉移情況有關聯，表達情況與ZEB2蛋白表達情況相反，說明ZEB2蛋白具有抑制E-cad蛋白的作用，logistic回歸分析結果顯示，E-cad蛋白表達可作為宮頸癌疾病分期的獨立因素。ZEB2蛋白在宮頸癌組織中過度表達，通過與E-cad蛋白啟動子結合，減少了患者體內E-cad基因的轉錄，降低了患者體內上皮細胞的功能調節作用，使患者體內細胞與細胞之間、細胞與基質之間的黏附能力下降，促使了腫瘤細胞發展和轉移。因此，醫護人員應當對此有足夠的重視，為患者遠期治療盡早確立合適的治療方案。

綜上所述，ZEB2蛋白在鱗狀宮頸癌組織中過度表達，阻礙具有抑制腫瘤細胞浸潤、轉移的E-cad蛋白合成，增加了癌細胞擴散轉移的幾率，因此，ZEB2、E-cad蛋白表達有望成為宮頸癌惡性程度及疾病分期的重要指標。

參考文獻

王鑾虹， 李俊東， 云徑平， 等. B23和Ki67在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（17）： 2791-2793.

張夢嵐， 賀菊香， 李菊英. 宮頸鱗癌組織中Snai2和E-cadherin的表達及意義[J]. 山東醫藥， 2011， 51（15）： 51-52.

周文娟， 孟躍進， 郭曉峰， 等. 宮頸癌組織中ZEB2和E-cad蛋白的表達[J]. 鄭州大學學報（醫學版）， 2014， 49（2）： 219-222.

朱明玥， 陳帆， 高冬梅， 等. c-IAP1在宮頸癌中的表達及臨床意義[J]. 中國婦幼保健， 2014， 29（14）： 2253-2257.

張榮榮， 王紅， 張萍. 宮頸癌組織中Twist與E-cadherin蛋白的表達及其意義[J]. 海南醫學， 2013， 24（8）： 1105-1107.

熊中堂， 江慶萍， 彭娟， 等. E-cadherin和P120ctn在子宮頸癌發生發展中的意義思義[J]. 中國現代醫生， 2012， 50（1）： 92-93， 98.

谷化平. 宮頸癌組織SLeX、CD44v6和E-Cad表達及其臨床意義[J]. 青島大學醫學院學報， 2010， 46（1）： 10-12.

吳艷， 傅芬， 周艷芳. Dysadherin、E-cadherin在宮頸癌中的表達及意義[J]. 實用醫學雜志， 2013， 29（20）： 3317-3319.

（收稿日期：2014-08-13）