櫻桃CBF基因的克隆及序列分析

張建朋　陳新　徐麗　等

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一種低溫響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子基因，CBF蛋白能夠與很多低溫相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合，使其表達(dá)，從而增強(qiáng)植物抗冷能力。本研究利用已經(jīng)公布的CBF序列的保守區(qū)設(shè)計(jì)特異引物，對(duì)櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，成功獲得CBF的全長(zhǎng)序列。序列分析結(jié)果表明，其開放閱讀框?yàn)?23 bp，編碼240個(gè)氨基酸，具有典型的AP2結(jié)構(gòu)域及CBF特有的兩段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，該CBF與薔薇科植物同源性較高，與其他科屬植物同源性較差。

關(guān)鍵詞：櫻桃；CBF基因；克隆；序列分析

中圖分類號(hào)：S662.503.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2014）10-0012-04

3結(jié)論

植物CBF/DREB類基因在非生物逆境響應(yīng)

過程中具有重要功能。本研究成功克隆了櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)CBF基因的全長(zhǎng)，并對(duì)其進(jìn)行序列和遺傳進(jìn)化分析。該試驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究櫻桃CBF基因的功能及冷誘導(dǎo)途徑奠定了基礎(chǔ)，也為該種櫻桃的抗寒能力研究和抗冷系育種提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孔旭.中國(guó)果樹栽培學(xué)[M]. 北京： 農(nóng)業(yè)出版社，1987： 558-559.

[2]俞德浚.落葉果樹分類學(xué)[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1984：114-125.

[3]于亞軍，代漢萍，李寶江，等. 世界櫻桃育種進(jìn)展[J]. 果樹學(xué)報(bào)，2003，20（2）：135-139.

[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 擬南芥CBF/DREB 途徑的研究進(jìn)展及其在植物基因工程中的應(yīng)用[J]. 生物物理學(xué)報(bào)， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韋正乙，邢少辰，等.轉(zhuǎn)錄激活因子CBF與植物的抗脅迫能力[J].分子植物育種，2006，4（3）：419-424.

[6]陳新，王貴禧，梁麗松，等. 平榛冷適應(yīng)相關(guān)基因CBF的克隆及時(shí)空表達(dá)特性分析[J]. 林業(yè)科學(xué)，2012，48（1）：167-172.

[7]張建朋，張士剛，陳新，等.麻核桃CBF基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，F(xiàn)ebres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，劉立鋒，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遺傳進(jìn)化分析[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一種低溫響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子基因，CBF蛋白能夠與很多低溫相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合，使其表達(dá)，從而增強(qiáng)植物抗冷能力。本研究利用已經(jīng)公布的CBF序列的保守區(qū)設(shè)計(jì)特異引物，對(duì)櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，成功獲得CBF的全長(zhǎng)序列。序列分析結(jié)果表明，其開放閱讀框?yàn)?23 bp，編碼240個(gè)氨基酸，具有典型的AP2結(jié)構(gòu)域及CBF特有的兩段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，該CBF與薔薇科植物同源性較高，與其他科屬植物同源性較差。

關(guān)鍵詞：櫻桃；CBF基因；克隆；序列分析

中圖分類號(hào)：S662.503.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2014）10-0012-04

3結(jié)論

植物CBF/DREB類基因在非生物逆境響應(yīng)

過程中具有重要功能。本研究成功克隆了櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)CBF基因的全長(zhǎng)，并對(duì)其進(jìn)行序列和遺傳進(jìn)化分析。該試驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究櫻桃CBF基因的功能及冷誘導(dǎo)途徑奠定了基礎(chǔ)，也為該種櫻桃的抗寒能力研究和抗冷系育種提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孔旭.中國(guó)果樹栽培學(xué)[M]. 北京： 農(nóng)業(yè)出版社，1987： 558-559.

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[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 擬南芥CBF/DREB 途徑的研究進(jìn)展及其在植物基因工程中的應(yīng)用[J]. 生物物理學(xué)報(bào)， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韋正乙，邢少辰，等.轉(zhuǎn)錄激活因子CBF與植物的抗脅迫能力[J].分子植物育種，2006，4（3）：419-424.

[6]陳新，王貴禧，梁麗松，等. 平榛冷適應(yīng)相關(guān)基因CBF的克隆及時(shí)空表達(dá)特性分析[J]. 林業(yè)科學(xué)，2012，48（1）：167-172.

[7]張建朋，張士剛，陳新，等.麻核桃CBF基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，F(xiàn)ebres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，劉立鋒，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遺傳進(jìn)化分析[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.

摘要：CBF（CRT/DRE-binding factor）基因是一種低溫響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子基因，CBF蛋白能夠與很多低溫相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合，使其表達(dá)，從而增強(qiáng)植物抗冷能力。本研究利用已經(jīng)公布的CBF序列的保守區(qū)設(shè)計(jì)特異引物，對(duì)櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)的cDNA進(jìn)行擴(kuò)增，成功獲得CBF的全長(zhǎng)序列。序列分析結(jié)果表明，其開放閱讀框?yàn)?23 bp，編碼240個(gè)氨基酸，具有典型的AP2結(jié)構(gòu)域及CBF特有的兩段短肽序列。氨基酸序列同源性分析表明，該CBF與薔薇科植物同源性較高，與其他科屬植物同源性較差。

關(guān)鍵詞：櫻桃；CBF基因；克隆；序列分析

中圖分類號(hào)：S662.503.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2014）10-0012-04

3結(jié)論

植物CBF/DREB類基因在非生物逆境響應(yīng)

過程中具有重要功能。本研究成功克隆了櫻桃砧木吉塞拉6號(hào)CBF基因的全長(zhǎng)，并對(duì)其進(jìn)行序列和遺傳進(jìn)化分析。該試驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究櫻桃CBF基因的功能及冷誘導(dǎo)途徑奠定了基礎(chǔ)，也為該種櫻桃的抗寒能力研究和抗冷系育種提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]孔旭.中國(guó)果樹栽培學(xué)[M]. 北京： 農(nóng)業(yè)出版社，1987： 558-559.

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[4]王洋， 胡吉吉， 王崇英. 擬南芥CBF/DREB 途徑的研究進(jìn)展及其在植物基因工程中的應(yīng)用[J]. 生物物理學(xué)報(bào)， 2007，23（2）： 101-108.

[5]郭喜英，韋正乙，邢少辰，等.轉(zhuǎn)錄激活因子CBF與植物的抗脅迫能力[J].分子植物育種，2006，4（3）：419-424.

[6]陳新，王貴禧，梁麗松，等. 平榛冷適應(yīng)相關(guān)基因CBF的克隆及時(shí)空表達(dá)特性分析[J]. 林業(yè)科學(xué)，2012，48（1）：167-172.

[7]張建朋，張士剛，陳新，等.麻核桃CBF基因的克隆與生物信息學(xué)分析[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，45（11）：7-11.

[8]Champ K I，F(xiàn)ebres V J，Moore B D. The role of CBF transcriptional activators in two Citrus species （Poncirus and Citrus） with contrasting levels of freezing tolerance[J]. Physiologia Plantarum，2007，129（3）：529-541.

[9]Benedict C，Skinner J S，Meng R，et al. The CBF1-dependent low temperature signalling pathway，regulon and increase in freeze tolerance are conserved in Populus spp. [J]. Plant Cell Environ.， 2006，29（7）：1259-1272.

[10]Gilmour S J，Zarka D G，Stockinger E J，et al. Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold-induced COR gene expression[J]. The Plant Journal，1998，16（4）：433-442.

[11]Okamuo J K，Caster B，Villarroel R，et al. The AP2 domain of APETALA2 defines a large new family of DNA binding proteins in Arabidopsis[J]. Proc. Natl. Acad. Sci. USA， 1997，94（13）：7076-7081.

[12]李利斌，劉立鋒，王殿峰，等.大白菜CBF4基因的克隆和遺傳進(jìn)化分析[J]. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（4）：1-4.

[13]Jaglo-Ottosen K R，Kleff S，Amundsen K L，et al. Components of the Arabidopsis C-repeat /dehydration -responsive element binding factor cold-response pathway are conserved in Brassica napus and other plant species[J]. Plant Physiology，2001，127（3）：910-917.