大菱鲆“紅嘴病”組織病理學研究

宮春光

大菱鲆（Scophthalmus maximus）是一種優質的冷水性海水養殖魚類，自1992年引入我國以來，其養殖規模不斷增加，目前已成為我國北方海水養殖的支柱產業之一。隨著大菱鲆養殖時間的延長，各種問題也隨之出現，例如種質退化、管理混亂、病害頻發等，其中病害問題是制約產業健康發展的關鍵因素。在大菱鲆的各種病害中，紅嘴病是對大菱鲆養殖危害最嚴重的疾病之一。該病在河北省各養殖場頻發，尤其在每年的6-10月養殖水溫超過18 ℃時更易發生。該病具有極強的傳染性，一旦出現個別魚發病，如未采取有效防控措施，疾病會迅速傳播，造成全池甚至整個養殖車間的魚在短時間內發病；同時該病的死亡率非常高，如果控制不力，日死亡率可達0.1%～02%，累計死亡率可達20%以上，給養殖戶帶來極大損失。

目前對該病研究報道不多，河北省海洋與水產科學研究院的高曉田研究認為，該病的病原菌為希瓦氏菌屬的種類；華南理工大學的陳麗蕓研究了利用蛭弧菌預防該病。但是對于紅嘴病的組織病理學研究尚未見報道，本項研究力求通過對具有典型紅嘴病外觀癥狀的病魚組織器官進行病理學研究，闡明該病的致病機理，為尋找該病的致病因子和制定相關防控措施提供依據。

1材料和方法

1.1病魚樣品

研究用大菱鲆于2013年8月—2014年8月分批采自位于河北秦皇島（秦皇島市和昌黎縣）、唐山、滄州、天津漢沽和遼寧興城等地的六家大菱鲆養殖場。每家取病魚5尾，病魚體長在21.4～29.7 cm范圍內，聚乙烯薄膜袋盛水并充氧運輸至秦皇島河北農大海洋學院實驗室。

1.2病魚檢查

觀察病魚的外觀癥狀并拍照，解剖觀察并拍照；取病魚體表粘液、鰓絲及粘液、內臟各器官組織，制成水浸片，于光學顯微鏡下觀察。

1.3組織制片

每個養殖場取病魚3條進行解剖， 分別取其骨骼肌、鰓、心臟、腎臟、脾臟、肝臟和消化道等組織，Bouin氏液固定24 h，自來水沖洗24 h，酒精梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋切片（5～6 μm），蘇木精-伊紅（H.E）染色，顯微鏡觀察、拍照。

2結果

2.1病魚的臨床癥狀及水浸片檢查結果

病魚的主要癥狀為吻端及上下頜充血、發紅，故名“紅嘴病”；部分病魚眼部腫大突出；病魚鰓蓋內表面充血發紅，鰓絲呈粉紅色，有明顯貧血癥狀，部分病魚鰓絲末端潰爛（圖1）；病魚腎臟顏色明顯變淡（圖2），有貧血癥狀；病魚腸道有線狀充血且無食物（圖3），腸道末端有少量粘稠液體（圖3）；肝臟色澤暗淡（圖3）；脾臟腫大發紅（圖3）。

對病魚體表、鰓和內臟各器官組織進行水浸片顯微觀察，未發現有致病性寄生蟲，僅在個別病魚鰓上見到極少量車輪蟲；暗視野顯微觀察，在潰爛鰓絲、肝臟及腎臟等組織處發現大量細菌游動，種類未知。

2.2病魚組織病理變化

2.2.1鰓組織病理變化從鰓絲切片上可見，部分鰓絲鰓小片上皮組織出現明顯增生；病變嚴重位置，鰓絲潰爛，鰓小片崩解、分離（圖4）。

2.2.2骨骼肌組織病理變化骨骼肌組織沒有明顯病理變化，肌纖維完整，肌束之間結締組織正常（圖5）。

2.2.3心臟組織病理變化病魚心臟沒有明顯病理變化，心肌纖維完整，肌束之間結締組織正常。

2.2.4肝臟組織病理變化肝細胞發生腫大、界限模糊，肝臟出現廣泛脂肪變性（圖6）。

2.2.5腎臟組織病理變化腎小管上皮細胞出現明顯的顆粒變性，上皮細胞間隙不清，部分胞核不清晰，出現廣泛的紅染；腎小球囊腔間隙明顯變大，毛細血管有萎縮現象；腎間質明顯壞死（圖7）。

2.2.6脾臟組織病理變化脾臟整體結構完整，略微有萎縮現象；但有明顯溶血現象（圖8）。

2.2.7消化道組織病理變化胃組織結構非常完整，黏膜層（包括其上的胃小凹）、黏膜下層以及肌肉層都未出現任何組織結構異常（圖9）；中后腸基本結構完整，部分粘膜下層出現脫離現象（圖10）。

3討論

本研究發現大菱鲆紅嘴病病魚的腎臟和鰓組織病變最為嚴重，推測該病可能是致病菌侵染腎臟，進而影響鰓部；也可能是病原菌由鰓進入，導致腎臟病變，其具體發病原因還需進一步研究。從腎臟變化看，該病對魚的腎臟，尤其是腎間質有極明顯影響，從而對造血功能有一定影響，引起魚體貧血；同時，腎小管變性、腎小體血管萎縮會導致魚的體液循環障礙，但在解剖病魚的過程中，沒有發現病魚腹腔有大量腹水的情況，由此見該病為急性型，魚染病后會迅速死亡，體液尚未在體內大量聚集，這也是該病死亡率高，不易治療的一個原因。從肝臟的組織切片中發現，肝臟存在廣泛的脂肪變性，這會影響魚的肝臟脂肪代謝能力，造成餌料中脂類利用率下降及脂肪在體內的堆積，進一步會影響魚的解毒功能；因此建議在大菱鲆患此病時，盡量少投喂脂肪含量高的冰鮮餌料（如玉筋魚、鯷魚等），可用脂肪含量較低的冰鮮餌料（如云鳚，蝦鯱魚等）替代，以緩解病魚對脂肪的代謝壓力；如投喂配合餌料的養殖場，因飼料成分無法改變，應適當減少投喂量。由于紅嘴病對病魚鰓的影響較大，會引起魚鰓局部潰爛和增生，同時對腎間質的破壞會造成魚體貧血，這些病理變化均會降低魚體的氧交換能力，造成魚體缺氧，更進一步導致魚體質下降，加速病魚死亡。因此在發現此病時，應注意魚池的增氧，提高水體的溶氧量。大菱鲆紅嘴病與消化系統關聯不高，消化道未發現明顯病變，因此病由口入的可能性較小，同時可以間接判斷該病不是通過餌料進行傳播的；再進一步推測，該病應該主要通過養殖用水進行傳播。因此，對養殖用水及養殖設施進行嚴格消毒是防控此病的關鍵；當然也有可能該病發病極為迅速，尚未對消化系統產生影響就已經死亡。現場觀察發現，發病大菱鲆會明顯減少攝食或不攝食，這對治療疾病時給藥造成一定難度，因此該病應以預防為主并積極尋找其他的給藥治療方式。

（ 收稿日期：2014-08-06）

大菱鲆（Scophthalmus maximus）是一種優質的冷水性海水養殖魚類，自1992年引入我國以來，其養殖規模不斷增加，目前已成為我國北方海水養殖的支柱產業之一。隨著大菱鲆養殖時間的延長，各種問題也隨之出現，例如種質退化、管理混亂、病害頻發等，其中病害問題是制約產業健康發展的關鍵因素。在大菱鲆的各種病害中，紅嘴病是對大菱鲆養殖危害最嚴重的疾病之一。該病在河北省各養殖場頻發，尤其在每年的6-10月養殖水溫超過18 ℃時更易發生。該病具有極強的傳染性，一旦出現個別魚發病，如未采取有效防控措施，疾病會迅速傳播，造成全池甚至整個養殖車間的魚在短時間內發病；同時該病的死亡率非常高，如果控制不力，日死亡率可達0.1%～02%，累計死亡率可達20%以上，給養殖戶帶來極大損失。

目前對該病研究報道不多，河北省海洋與水產科學研究院的高曉田研究認為，該病的病原菌為希瓦氏菌屬的種類；華南理工大學的陳麗蕓研究了利用蛭弧菌預防該病。但是對于紅嘴病的組織病理學研究尚未見報道，本項研究力求通過對具有典型紅嘴病外觀癥狀的病魚組織器官進行病理學研究，闡明該病的致病機理，為尋找該病的致病因子和制定相關防控措施提供依據。

1材料和方法

1.1病魚樣品

研究用大菱鲆于2013年8月—2014年8月分批采自位于河北秦皇島（秦皇島市和昌黎縣）、唐山、滄州、天津漢沽和遼寧興城等地的六家大菱鲆養殖場。每家取病魚5尾，病魚體長在21.4～29.7 cm范圍內，聚乙烯薄膜袋盛水并充氧運輸至秦皇島河北農大海洋學院實驗室。

1.2病魚檢查

觀察病魚的外觀癥狀并拍照，解剖觀察并拍照；取病魚體表粘液、鰓絲及粘液、內臟各器官組織，制成水浸片，于光學顯微鏡下觀察。

1.3組織制片

每個養殖場取病魚3條進行解剖， 分別取其骨骼肌、鰓、心臟、腎臟、脾臟、肝臟和消化道等組織，Bouin氏液固定24 h，自來水沖洗24 h，酒精梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋切片（5～6 μm），蘇木精-伊紅（H.E）染色，顯微鏡觀察、拍照。

2結果

2.1病魚的臨床癥狀及水浸片檢查結果

病魚的主要癥狀為吻端及上下頜充血、發紅，故名“紅嘴病”；部分病魚眼部腫大突出；病魚鰓蓋內表面充血發紅，鰓絲呈粉紅色，有明顯貧血癥狀，部分病魚鰓絲末端潰爛（圖1）；病魚腎臟顏色明顯變淡（圖2），有貧血癥狀；病魚腸道有線狀充血且無食物（圖3），腸道末端有少量粘稠液體（圖3）；肝臟色澤暗淡（圖3）；脾臟腫大發紅（圖3）。

對病魚體表、鰓和內臟各器官組織進行水浸片顯微觀察，未發現有致病性寄生蟲，僅在個別病魚鰓上見到極少量車輪蟲；暗視野顯微觀察，在潰爛鰓絲、肝臟及腎臟等組織處發現大量細菌游動，種類未知。

2.2病魚組織病理變化

2.2.1鰓組織病理變化從鰓絲切片上可見，部分鰓絲鰓小片上皮組織出現明顯增生；病變嚴重位置，鰓絲潰爛，鰓小片崩解、分離（圖4）。

2.2.2骨骼肌組織病理變化骨骼肌組織沒有明顯病理變化，肌纖維完整，肌束之間結締組織正常（圖5）。

2.2.3心臟組織病理變化病魚心臟沒有明顯病理變化，心肌纖維完整，肌束之間結締組織正常。

2.2.4肝臟組織病理變化肝細胞發生腫大、界限模糊，肝臟出現廣泛脂肪變性（圖6）。

2.2.5腎臟組織病理變化腎小管上皮細胞出現明顯的顆粒變性，上皮細胞間隙不清，部分胞核不清晰，出現廣泛的紅染；腎小球囊腔間隙明顯變大，毛細血管有萎縮現象；腎間質明顯壞死（圖7）。

2.2.6脾臟組織病理變化脾臟整體結構完整，略微有萎縮現象；但有明顯溶血現象（圖8）。

2.2.7消化道組織病理變化胃組織結構非常完整，黏膜層（包括其上的胃小凹）、黏膜下層以及肌肉層都未出現任何組織結構異常（圖9）；中后腸基本結構完整，部分粘膜下層出現脫離現象（圖10）。

3討論

本研究發現大菱鲆紅嘴病病魚的腎臟和鰓組織病變最為嚴重，推測該病可能是致病菌侵染腎臟，進而影響鰓部；也可能是病原菌由鰓進入，導致腎臟病變，其具體發病原因還需進一步研究。從腎臟變化看，該病對魚的腎臟，尤其是腎間質有極明顯影響，從而對造血功能有一定影響，引起魚體貧血；同時，腎小管變性、腎小體血管萎縮會導致魚的體液循環障礙，但在解剖病魚的過程中，沒有發現病魚腹腔有大量腹水的情況，由此見該病為急性型，魚染病后會迅速死亡，體液尚未在體內大量聚集，這也是該病死亡率高，不易治療的一個原因。從肝臟的組織切片中發現，肝臟存在廣泛的脂肪變性，這會影響魚的肝臟脂肪代謝能力，造成餌料中脂類利用率下降及脂肪在體內的堆積，進一步會影響魚的解毒功能；因此建議在大菱鲆患此病時，盡量少投喂脂肪含量高的冰鮮餌料（如玉筋魚、鯷魚等），可用脂肪含量較低的冰鮮餌料（如云鳚，蝦鯱魚等）替代，以緩解病魚對脂肪的代謝壓力；如投喂配合餌料的養殖場，因飼料成分無法改變，應適當減少投喂量。由于紅嘴病對病魚鰓的影響較大，會引起魚鰓局部潰爛和增生，同時對腎間質的破壞會造成魚體貧血，這些病理變化均會降低魚體的氧交換能力，造成魚體缺氧，更進一步導致魚體質下降，加速病魚死亡。因此在發現此病時，應注意魚池的增氧，提高水體的溶氧量。大菱鲆紅嘴病與消化系統關聯不高，消化道未發現明顯病變，因此病由口入的可能性較小，同時可以間接判斷該病不是通過餌料進行傳播的；再進一步推測，該病應該主要通過養殖用水進行傳播。因此，對養殖用水及養殖設施進行嚴格消毒是防控此病的關鍵；當然也有可能該病發病極為迅速，尚未對消化系統產生影響就已經死亡。現場觀察發現，發病大菱鲆會明顯減少攝食或不攝食，這對治療疾病時給藥造成一定難度，因此該病應以預防為主并積極尋找其他的給藥治療方式。

（ 收稿日期：2014-08-06）

大菱鲆（Scophthalmus maximus）是一種優質的冷水性海水養殖魚類，自1992年引入我國以來，其養殖規模不斷增加，目前已成為我國北方海水養殖的支柱產業之一。隨著大菱鲆養殖時間的延長，各種問題也隨之出現，例如種質退化、管理混亂、病害頻發等，其中病害問題是制約產業健康發展的關鍵因素。在大菱鲆的各種病害中，紅嘴病是對大菱鲆養殖危害最嚴重的疾病之一。該病在河北省各養殖場頻發，尤其在每年的6-10月養殖水溫超過18 ℃時更易發生。該病具有極強的傳染性，一旦出現個別魚發病，如未采取有效防控措施，疾病會迅速傳播，造成全池甚至整個養殖車間的魚在短時間內發病；同時該病的死亡率非常高，如果控制不力，日死亡率可達0.1%～02%，累計死亡率可達20%以上，給養殖戶帶來極大損失。

目前對該病研究報道不多，河北省海洋與水產科學研究院的高曉田研究認為，該病的病原菌為希瓦氏菌屬的種類；華南理工大學的陳麗蕓研究了利用蛭弧菌預防該病。但是對于紅嘴病的組織病理學研究尚未見報道，本項研究力求通過對具有典型紅嘴病外觀癥狀的病魚組織器官進行病理學研究，闡明該病的致病機理，為尋找該病的致病因子和制定相關防控措施提供依據。

1材料和方法

1.1病魚樣品

研究用大菱鲆于2013年8月—2014年8月分批采自位于河北秦皇島（秦皇島市和昌黎縣）、唐山、滄州、天津漢沽和遼寧興城等地的六家大菱鲆養殖場。每家取病魚5尾，病魚體長在21.4～29.7 cm范圍內，聚乙烯薄膜袋盛水并充氧運輸至秦皇島河北農大海洋學院實驗室。

1.2病魚檢查

觀察病魚的外觀癥狀并拍照，解剖觀察并拍照；取病魚體表粘液、鰓絲及粘液、內臟各器官組織，制成水浸片，于光學顯微鏡下觀察。

1.3組織制片

每個養殖場取病魚3條進行解剖， 分別取其骨骼肌、鰓、心臟、腎臟、脾臟、肝臟和消化道等組織，Bouin氏液固定24 h，自來水沖洗24 h，酒精梯度脫水，二甲苯透明，石蠟包埋切片（5～6 μm），蘇木精-伊紅（H.E）染色，顯微鏡觀察、拍照。

2結果

2.1病魚的臨床癥狀及水浸片檢查結果

病魚的主要癥狀為吻端及上下頜充血、發紅，故名“紅嘴病”；部分病魚眼部腫大突出；病魚鰓蓋內表面充血發紅，鰓絲呈粉紅色，有明顯貧血癥狀，部分病魚鰓絲末端潰爛（圖1）；病魚腎臟顏色明顯變淡（圖2），有貧血癥狀；病魚腸道有線狀充血且無食物（圖3），腸道末端有少量粘稠液體（圖3）；肝臟色澤暗淡（圖3）；脾臟腫大發紅（圖3）。

對病魚體表、鰓和內臟各器官組織進行水浸片顯微觀察，未發現有致病性寄生蟲，僅在個別病魚鰓上見到極少量車輪蟲；暗視野顯微觀察，在潰爛鰓絲、肝臟及腎臟等組織處發現大量細菌游動，種類未知。

2.2病魚組織病理變化

2.2.1鰓組織病理變化從鰓絲切片上可見，部分鰓絲鰓小片上皮組織出現明顯增生；病變嚴重位置，鰓絲潰爛，鰓小片崩解、分離（圖4）。

2.2.2骨骼肌組織病理變化骨骼肌組織沒有明顯病理變化，肌纖維完整，肌束之間結締組織正常（圖5）。

2.2.3心臟組織病理變化病魚心臟沒有明顯病理變化，心肌纖維完整，肌束之間結締組織正常。

2.2.4肝臟組織病理變化肝細胞發生腫大、界限模糊，肝臟出現廣泛脂肪變性（圖6）。

2.2.5腎臟組織病理變化腎小管上皮細胞出現明顯的顆粒變性，上皮細胞間隙不清，部分胞核不清晰，出現廣泛的紅染；腎小球囊腔間隙明顯變大，毛細血管有萎縮現象；腎間質明顯壞死（圖7）。

2.2.6脾臟組織病理變化脾臟整體結構完整，略微有萎縮現象；但有明顯溶血現象（圖8）。

2.2.7消化道組織病理變化胃組織結構非常完整，黏膜層（包括其上的胃小凹）、黏膜下層以及肌肉層都未出現任何組織結構異常（圖9）；中后腸基本結構完整，部分粘膜下層出現脫離現象（圖10）。

3討論

本研究發現大菱鲆紅嘴病病魚的腎臟和鰓組織病變最為嚴重，推測該病可能是致病菌侵染腎臟，進而影響鰓部；也可能是病原菌由鰓進入，導致腎臟病變，其具體發病原因還需進一步研究。從腎臟變化看，該病對魚的腎臟，尤其是腎間質有極明顯影響，從而對造血功能有一定影響，引起魚體貧血；同時，腎小管變性、腎小體血管萎縮會導致魚的體液循環障礙，但在解剖病魚的過程中，沒有發現病魚腹腔有大量腹水的情況，由此見該病為急性型，魚染病后會迅速死亡，體液尚未在體內大量聚集，這也是該病死亡率高，不易治療的一個原因。從肝臟的組織切片中發現，肝臟存在廣泛的脂肪變性，這會影響魚的肝臟脂肪代謝能力，造成餌料中脂類利用率下降及脂肪在體內的堆積，進一步會影響魚的解毒功能；因此建議在大菱鲆患此病時，盡量少投喂脂肪含量高的冰鮮餌料（如玉筋魚、鯷魚等），可用脂肪含量較低的冰鮮餌料（如云鳚，蝦鯱魚等）替代，以緩解病魚對脂肪的代謝壓力；如投喂配合餌料的養殖場，因飼料成分無法改變，應適當減少投喂量。由于紅嘴病對病魚鰓的影響較大，會引起魚鰓局部潰爛和增生，同時對腎間質的破壞會造成魚體貧血，這些病理變化均會降低魚體的氧交換能力，造成魚體缺氧，更進一步導致魚體質下降，加速病魚死亡。因此在發現此病時，應注意魚池的增氧，提高水體的溶氧量。大菱鲆紅嘴病與消化系統關聯不高，消化道未發現明顯病變，因此病由口入的可能性較小，同時可以間接判斷該病不是通過餌料進行傳播的；再進一步推測，該病應該主要通過養殖用水進行傳播。因此，對養殖用水及養殖設施進行嚴格消毒是防控此病的關鍵；當然也有可能該病發病極為迅速，尚未對消化系統產生影響就已經死亡。現場觀察發現，發病大菱鲆會明顯減少攝食或不攝食，這對治療疾病時給藥造成一定難度，因此該病應以預防為主并積極尋找其他的給藥治療方式。

（ 收稿日期：2014-08-06）