西寧地區健康人群血清總膽紅素參考區間的調查

劉淑敏，黎明

(1、青海紅十字醫院檢驗科，青海 西寧810000；2、青海省人民醫院檢驗科，青海 西寧810002)

生物參考區間是解釋檢驗結果、分析檢驗信息的一個基本尺度和依據[1]。臨床檢驗對象由于性別、年齡、居住地區、季節、種族等不同，其生物參考區間存在差異[2]。實驗室為臨床提供檢驗項目可靠的生物參考區間，才能使臨床對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[3]。根據ISO15189《醫學實驗室-質量和能力的專用要求》[4]的要求，建立或引用適合本實驗室的生物參考區間，為臨床提供準確的診斷依據。為了解本地區健康人群的總膽紅素水平，并建立適合本地區的參考區間，現對230例體檢者進行調查如下。

1 材料與方法

1.1 隨機抽取2012年6月-12月在本院進行體檢的健康者380例，年齡 14～75歲，平均 36.5歲，選擇其中240例，其調查問卷內容符合要求，相關檢查均無疾病。

1.2 儀器和試劑 (1)儀器：OLYMPUS AU-2700全自動生化分析儀。(2)試劑：奧林巴斯原裝試劑，試劑批號：BIL-D10511標準品：BECKMAN COULTER SYSTEM CALIBRATOR 批 號 ：BIL-T10511 BIL-D10511質控品：中值 BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 1批號：0029A-2013/4/1高值：BECKMAN COULTER CONTROL SERUM 2批號：0030A-2013/5/1。

1.3 方法 (1)早晨空腹采靜脈血于血清管。嚴格按照本室SOP上機操作。選擇健康個體的具體條件[5]：沒有任何影響檢測結果的生理特征；未服用藥物或進行飲食治療；發育、精神正常，無心血管、肺腎肝膽胰等器質性疾??；三個月內無輸血史和手術史；一月內未患任何疾??；婦女不在月經期、妊娠期和哺乳期；無酗酒史。

1.4 統計學方法 使用統計軟件SPSS13.0進行運算和統計分析。

2 結果

2.1 240例健康參考個體總膽紅素測定結果。見表1。按照NCCLSC28-A2文件推薦方法,取20例健康參考個體對 《全國臨床檢驗操作規程》(第三版)推薦的總膽紅素參考區間 3.4～17.1μmol/L進行驗證,參考區間驗證不通過，需建立適應本實驗室的生物參考區間。同時,查閱資料文獻顯示,總膽紅素存在性別生物差異,按照NCCLSC28-A2文件要求,建立區間時分組,每組收集120健康參考個體.數據從小到大排列,判斷剔除離群值,實驗數據不成高斯分布，采用百分位法確定2.5%和97.5%位數的參考限確定參考區間。

2.2 離群值結果判斷 剔除異常值和錯誤數值，回收有效問卷380份,選擇其中240例(男120例女120例)健康人群進行分析。離群值的處理：數據從小到大排列后判斷是否有離群點：數據中疑似離群點可通過1/3規則進行判斷，D是一個極端觀測值(大的或小的值)和緊接著的極端觀測值(第二大或第二小的值)之間的絕對差值，R是所有觀測值的全距，即最大極值和最小極值的差值。差值D和數據全距R相除。求D/R比值，D/R=1/3為臨界值，如果某個觀測值的D值等于或大于1/3R值，則該極端值應予刪除。男性：(26.09～25.9)/(26.09～6.2)=0.010，D/R≤1/3。 女性：(23.74～23.40)/(23.74～4.30)=0.017，D/R≤1/3，2組數據不存在離群點，所以保留所有數據。

2.3 作Z檢驗，確定檢驗項目是否存在生物差異，存在差異進行分組。將數據代入Z檢驗公式得Z=4.097。Z*=3(naverage/120)1/2=3[(n1+n2)/240]1/2=3[(120+120)/240]1/2=3。計算Z判斷限值判斷是否需要分組：Z=4.097>Z*=3,所以總膽紅素要按性別分組分別統計。

2.4 總膽紅素生物參考區間的確定 分析兩組實驗數據，若呈高斯正態分布可按x±1.96s表示95%數據分布范圍，若數據不呈高斯正態分布則用百分位數法確定2.5%和97.5%位數的參考限，以此確定參考區間。兩組實驗數據分布都不成高斯正態分布，可按用百分位數法確定2.5%～97.5%位數的參考限，以確定參考區間。本研究總膽紅素生物參考區間為男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。

表1 240例健康參考個體總膽紅素測定結果

3 討論

本調查結果顯示，西寧地區健康人群血清總膽紅素參考區間比《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)[6]推薦的高。膽紅素在體內有兩個來源，一是衰老紅細胞，被肝、脾、骨髓的單核-巨噬細胞分解，釋放血紅蛋白，后者在限速酶血紅素氧合酶-1的催化下分解為膽綠素、一氧化碳、二價鐵離子，膽綠素在膽綠素轉化酶作用下還原為膽紅素，這種方式生成占膽紅素的80%以上，稱主流膽紅素。另外20%的膽紅素來源于骨髓幼稚細胞的血紅蛋白(無效造血)和體內含有亞鐵血紅素的蛋白質(如過氧化氫酶、過氧化物酶及細胞色素氧化酶與肌紅蛋白等)，稱分流膽紅素。由此可知，血清膽紅素與血紅蛋白存在一定的相關性，提示西寧地區血清總膽紅素較平原地區高，原因可能是地處高原，造成缺氧，Hb相對升高，進而膽紅素的來源也相對升高，導致本地區總膽紅素偏高。

因此，我們應建立適合本地區總膽紅素的生物參考區間。國際化學委員會提出的方法[7]，每個實驗室均應建立適用于本實驗室的臨床檢測項目的生物參考區間，在引用試劑說明書或其它書刊文獻提供的或轉移其它實驗室的生物參考區間之前，必須對其進行驗證，以確保適用于本實驗室。西寧地區為高原地區，《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)推薦的血清總膽紅素的參考區間經驗證不適用本地區，我們通過對健康體檢人群的調查分析，采用適合本地區的血清總膽紅素的參考區間，為臨床提供可靠的參考區間。實驗室為臨床提供檢驗項目可靠的生物參考區間，才能使臨床對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。

本文通過收集240例健康參考個體，建立本地區總膽紅素生物參考區間，考慮存在性別差異，需分組建立。實驗數據經Z檢驗，Z=4.097，Z*=3，Z>Z*,分組后的均值間差異有統計學意義，需分2組統計，分別確定總本地區總膽紅素生物參考區間為男性 6.6～25.7μmol/L、女性 4.9～22.5μmol/L。且男性高于女性，與國內文獻報道[8，9]相符。可能與男、女的內分泌水平、勞動強度等存在差異有關。

檢測項目因不同的實驗方法等因素，參考區間存在差異。建立的參考區間應定期邀請臨床醫師參加實驗室生物參考區間的評審可以彌補信息開源的不足，獲取本地區人群生命體變化的資料、疾病診治的新進展，以保證生物參考區間的適用性。

[1]魏有仁.參考值的幾個基本問題[J].中國實驗診斷學，1997，1(1)：44-46.

[2]海濱,張巖,徐玉秀,等.阜新地區健康人群血清總膽紅素和直接膽紅素參考范圍調查[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(6):610.

[3]馮仁峰.臨床檢驗質量管理技術基礎[M].上海：上?？萍嘉墨I出版社，2004：136.

[4]Medical laboratories particular requirements for quality and competence[S].ISO15189,2007.

[5]王治國.臨床檢驗方法確認與性能驗證[M].北京:人民衛生出版社,2009:259.

[6]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:121-141.

[7]Solberg HE,Stamm D. International Federation of Clinical Chemistry IFCC.IFCCrecommendation-theroy of reference values.Part 4.Control of analytical variation in the production,transfer and application of reference values[J].Clin Chim Acta,1991,202(122):S5-S11.

[8]Dufour DR.Diagnosis and monitoring of hepatic injury[J].Clin Chem,2000,46(12):2027-2049.

[9]施志農.蕪湖地區部分人群肝功血清酶兩項參考值調查[J].檢驗醫學與臨床，2007,5(1)：29-49.