Sysmex XE-2100血液分析儀臨床應用評價

陳曉玲，武錦彪，王文娟

(浙江大學醫學院附屬第一醫院檢驗科，浙江 杭州310003)

血液分析儀是檢驗科常用的分析儀器，其檢測結果的準確性影響臨床對疾病的診斷和治療[1]。為了解我科室日本Sysmex公司生產的XE-2100五分類全自動血液分析儀的性能，我們參照美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)、國際血液學標準化委員會(ICSH)的相關文件進行臨床應用評價。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 XE-2100(序列號 A4099)、XT-1800i(序列號18477)由日本Sysmex公司生產，LH780(序列號 AK14004)由于美國Beckman Coulter公司生產；Olympus CX-31光學顯微鏡由日本Olympus公司生產；EDTA-K2真空抗凝管(3ml)由美國BD公司生產。

1.1.2 試劑 所有儀器均使用配套的試劑 (稀釋液G2433、鞘液 G2018、溶血劑 A2014 等)、校準品(批號 12910525)、 質控品 (批號 QC-22800810、QC-22820811、QC-22800812)。

1.1.3 標本 所有標本采自本院體檢人群和住院病人。

1.2 方法

1.2.1 儀器校準及質量控制：校準按照《血液分析儀的校準指南》[2]進行。 XE-2100、XT-1800i血液分析儀使用配套校準品SCS-1000進行校準，LH780血液分析儀使用配套校準品S-Cal 4773進行校準。儀器每日開機后，進行本底和質控檢測，在控后方可進行標本檢測。

1.2.2 精密度 參照CLSI EP-15A[3]文件內容進行儀器精密度評價。

1.2.2.1 批內精密度 使用配套高、中、低值3份定值質控品，每份連續測定11次，棄去第1次，統計后10次CBC(全血細胞計數)各項目的變異系數(CV)值。

1.2.2.2 批間精密度 使用配套高、中、低3份定值質控品連續測定20d，計算CBC各項目的CV值。

1.2.3 攜帶污染率 參考ICSH[4]的文件程序，取高濃度血液樣本，混勻后連續測定3次，測定值分別為 H1、H2、H3；再取低濃度的血液樣本，混勻連續測定3次，測定值分別為L1、L2、L3；通過下列公式進行計算：攜帶污染率=[｜L1-L3｜/(H3-L3)]×100%。

1.2.4 穩定性 采集10份抗凝全血標本，5份為一組，分別貯存在室溫(25℃)和 4℃，并在 0、0.5、2、4、8、12、24、48h 測試。以百分率-時間作圖，觀察細胞計數和分類結果的變化。

1.2.5 線性 參照CLSI EP-6A[5]定量分析方法的線性評價指南進行線性評價。使用高濃度或濃縮樣本， 按100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進行稀釋，每個稀釋度的標本進行隨機兩次重復測定，并判斷測定結果的有效性，計算均值。對測定均值與理論值作回歸分析，計算回歸方程：y=bx+a，驗證線性范圍。要求相關系數r≥0.975，a值在1±0.05范圍內。

1.2.6 不同進樣模式結果可比性 使用20份正常人新鮮血標本，分別在開蓋模式與封閉模式下進行檢測，計算該20份標本在不同模式下相同檢測項目的均值，以開蓋模式的均值為靶值，封閉模式的均值為測定值，計算偏差。偏差=[(測定值-靶值)/靶值]×100%。

1.2.7 不同儀器間全血細胞計數結果可比性 參照CLSI EP9-A2[6]文件，在5個工作日內，每日選擇8份樣本，檢測參數濃度滿足文件要求，標本采集2小時內，在室溫下分別在 XE-2100、XT-1800i、LH780血液分析儀按文件要求測定順序進行測定，判斷檢測結果有效性后，進行相關分析。

1.2.8 白細胞分類相關性 參照CLSI H20-A[7]文件內容進行白細胞分類相關性評價。以人工分類為參考方法，取40份患者EDTA-K2抗凝靜脈血標本，在XE-2100進行測定，每份標本重復測定2次，計算其均值；同進將該40份患者標本每份標本制作3張血涂片，由2名經驗豐富的主管技師職稱以上技術人員采用雙盲法各自分類計數200個白細胞，取均值，與XE-2100分析儀進行相關性分析。

1.2.9 正確度：對具有溯源性的定值校準品 (批號12910525)混勻后連續測定5次，計算其均值與該校準品定值的偏移。偏移(Bias)=(均值-定值)/定值×100%。

2 結果

2.1 精密度 批內、批間精密度測定結果見表1。

表1 精密度檢測結果(使用高、中、低值3個水平質控品)

2.2 攜帶污染率 WBC、RBC、HGB、HCT、PLT 分別為 0.58%、0.00%、0.00%、0.18%、0.09%均小于儀器要求1.00%、1.00%、1.00%、1.00%、1.00%。

2.3 穩定性 全血細胞計數 (CBC)與白細胞分類(DIFF)在室溫(25℃)與4℃下的穩定性結果見圖1和圖2。標本貯存在4℃的條件下全血細胞計數與白細胞分類結果的較穩定。

2.4 線性 WBC、RBC、HGB、PLT的線性結果見表2。

2.5 不同進樣模式結果可比性 結果見表3。開蓋模式與封閉模式的20份標本均值偏差均小于1%。

圖1 白細胞分類穩定性比較

圖2 白細胞計數穩定性比較

2.6 不同儀器間全血細胞計數結果可比性 結果見表4。XE-2100與LH780、XT-1800i全血細胞計數有較好的可比性。

2.7 白細胞分類相關性 結果見表5。中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞的相關系數較高，單核細胞、嗜堿性粒細胞的相關系數較低。

2.8 正確度 WBC、RBC、HGB、HCT、PLT 的偏倚為0.1%、-0.5%、0.2%、-0.2%、-0.3%均小于 1/4CLIA’88TEa。

表2 XE-2100線性測定結果

表3 XE-2100不同進樣模式結果可比性

表4 XE-2100與LH780、XT-1800i血液分析儀CBC測定結果可比性(n=80)

表5 XE-2100與人工白細胞分類結果相關性(n=40)

3 討論

實驗室在開展某一檢測項目前，需提供并保留相關的方法學驗證數據，即某一檢測項目在正式用來檢測患者標本、發出檢驗報告前，實驗室需對其相關方法學性能予以驗證，對廠商提供的評價資料中的主要性能予以確認；新儀器在安裝后，或每次維修后，必須對儀器的性能進行測試、評價，這對保證檢驗質量起著重要作用[8，9]。XE-2100是由日本Sysmex公司生產的五分類全自動血液分析儀，該儀器使用流式細胞術、熒光技術對細胞進行計數和分類，可為臨床提供32個檢測參數，每小時可檢測150份標本，是一臺具有檢測精度高、速度快、功能強等優點的全自動五分類血液分析儀。臨床性能評價：WBC、RBC、HGB、HCT、PLT 的高、中、低三個濃度水平的批內、批間精密度的CV值均達到了儀器技術指標，儀器的精密度高；各指標的攜帶污染率均低于1%，均達到了儀器技術指標要求；標本貯存在4℃時全血細胞計數與分類的穩定性要好于室溫貯存[10]；WBC、RBC、HGB、PLT四個參數的線性范圍較寬，基本覆蓋了臨床樣本的濃度范圍；全血細胞計數與LH780、XT-1800i血液分析儀分析結果具有較好的可比性，各參數相關系數r=0.9800～0.9995；儀器對白細胞分類與人工鏡檢相比，中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸細胞相關性較好，單核、嗜堿細胞相關性較差[11]，原因可能是全血中該類細胞數量少，人工計數細胞較少，血片中細胞分布不均有關；通過測定具有溯源性的定值校準品計算偏移進行正確度評價，WBC、RBC、HGB、HCT、PLT 的偏移結果均小于 1/4CLIA”88允許總誤差，正確度可接受。綜上所述，XE-2100五分類全自動血液分析儀各方面的性能較好，是適合醫院檢驗科使用的理想儀器。

[1]彭黎明，叢玉隆．我國血細胞自動分析中存在的問題及對策[J]．中華檢驗醫學雜志，2005，28(9)：885－887．

[2]WS/T347－2011.血液分析儀的校準指南[S]．2011.

[3]CLSI EP15-A．Clinicaland Laboratory Standards Institute．User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy；Approved Guideline[S]．CLSI，2001．

[4]International Council for Standardization in Haematology(ICSH)．Protocol for evaluation of automated hematology analyzer[S]．ICSH，Clin Lab Heamotal，1984；6：69．

[5]CLSI EP6-A．Clinicaland Laboratory Standards Institute．Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures：A Statistical Approach；Approved Guideline[S]．CLSI，2003．

[6]CLSI EP9-A2．Clinicaland Laboratory Standards Institute．Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples；Approved Guideline－Second Edition[S]．CLSI，2002．

[7]CLSI H20-A．Clinicaland Laboratory Standards Institute．Reference Leukocyte Differential Count(Proportional)and Evaluation of Instrumental Methods；Approved Standard[S]．CLSI，1992．

[8]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：58-73.

[9]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎[M].第4版.北京：人民衛生出版社，2007：115-123.

[10]Tsuda I，Hino M，Takubo T，et al．First basic performance evaluation of the XE-2100 haematology analyzer[J]．J Autom Methods Manag Chem，1999,21(4):127-133．

[11]Nakul-Aquaronne D，Sudaka-Sammarcelli I，Ferrero-Vacher C，et al．Evaluation of the Sysmex XE-2100 hematology analyzer in hospital use[J]．JClin Lab Anal，2003,17(4):113－123．