獸用滅活疫苗設(shè)計(jì)淺析

王勤

摘 要：用微生物（細(xì)菌、病毒、衣原體、鉤端螺旋體等）、微生物代謝產(chǎn)物、原蟲、動(dòng)物血液和組織等，經(jīng)加工制成，作為預(yù)防、治療、診斷特定傳染病或其他有關(guān)疾病的免疫制劑稱之為獸用疫苗。因某些疫苗活性會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生有害影響，用物理方法或化學(xué)方法將其滅活后制成的疫苗稱之為滅活疫苗。

關(guān)鍵詞：獸用疫苗 滅活 工藝 設(shè)備選型計(jì)算

中圖分類號(hào)：S852 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2014）04（b）-0225-01

1 滅活苗簡(jiǎn)述

疫苗：凡是具有良好免疫原性的病原微生物，經(jīng)繁殖和處理后制成的制品，用以接種動(dòng)物能產(chǎn)生相應(yīng)的免疫力者。除一般活菌（毒）疫苗、滅活疫苗外，還包括類毒素、類毒素與菌體混合疫苗、亞單位組份苗、基因缺失疫苗、活載體疫苗、人工合成疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗等。

滅活疫苗：用物理方法或化學(xué)方法將其滅活后制成的疫苗。

2 各種動(dòng)物疫苗工藝流程示例

（1）滅活苗生產(chǎn)工藝過程簡(jiǎn)述

滅活雞胚苗：采用國(guó)內(nèi)成熟的雞胚培養(yǎng)病毒的技術(shù)。將種毒接種于9～11日齡非免疫雞胚，接種后的雞胚放在孵化箱中繼續(xù)孵化，棄去接種后24 h內(nèi)死亡的雞胚，培養(yǎng)好的雞胚取出，放在2～8 ℃冷庫(kù)中冷藏，之后收獲雞胚尿囊液等。收獲的雞胚尿囊液等加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的雞胚尿囊液等置2～8 ℃冷庫(kù)冷藏備用。

（2）滅活細(xì)胞苗：將配制好的細(xì)胞培養(yǎng)液加入轉(zhuǎn)瓶，將轉(zhuǎn)瓶置于溫室中培養(yǎng)，待轉(zhuǎn)瓶?jī)?nèi)長(zhǎng)成單層細(xì)胞后，將毒種接種入轉(zhuǎn)瓶中，之后在溫室中繼續(xù)培養(yǎng)，收獲病毒原液。收獲的病毒原液加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的病毒原液置2～8 ℃冷庫(kù)冷藏備用。

（3）滅活細(xì)菌苗：采用發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)細(xì)菌和固體培養(yǎng)細(xì)菌兩種技術(shù)。將菌種接種于培養(yǎng)液中，經(jīng)發(fā)酵罐培養(yǎng)或接種在瓊脂平板上培養(yǎng)，收獲菌液（苔）。收獲的細(xì)菌加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的菌液置2～8 ℃冷庫(kù)或儲(chǔ)液罐中冷藏備用。

（4）乳化配滅活苗：在乳化罐中加入佐劑，滅菌冷卻后，按配比加入從冷庫(kù)中取出的抗原液，經(jīng)乳化后分裝入疫苗瓶，分裝后的產(chǎn)品待檢驗(yàn)合格后，包裝入庫(kù)。

3 滅活疫苗工藝設(shè)備計(jì)算示例

滅活疫苗車間的計(jì)算

A.前孵化箱計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，若年產(chǎn)雞胚滅活疫苗10000萬mL，疫苗水相與油相的配比為25%：75%，折合水相（病毒原液）2500萬mL。

每枚非免疫雞胚可生產(chǎn)病毒原液10 mL，雞胚前孵化成功率為90%，后孵化成功率為90%，疫苗分裝成品率為90%，則年需雞胚量為：

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%÷90%≈342.9萬胚/年

雞胚前孵化10天計(jì)，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化30批。

每批需孵化雞胚

342.9萬胚/年÷30批/年≈11.4萬胚/批

前孵化采用6臺(tái)19200蛋位的孵化箱可滿足生產(chǎn)的需要。

B.后孵化箱計(jì)算

本項(xiàng)目雞胚接毒后采用孵化箱繼續(xù)孵化，年孵化量為

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%≈308.6萬胚/年

雞胚后孵化時(shí)間以3天計(jì)，每年生產(chǎn)日數(shù)為300天，則全年可孵化100批。

每批需孵化雞胚

308.6萬胚/年÷100批/年≈3.09萬胚/批

本項(xiàng)目配置3臺(tái)19200蛋位的孵化箱作為后孵化箱，可以滿足生產(chǎn)的需要。

C.轉(zhuǎn)瓶機(jī)計(jì)算

年產(chǎn)細(xì)胞滅活苗2000萬ml，

滅活苗水相（病毒原液）：油相=25%：75%

則年需病毒原液

2000萬ml/年×25%=500萬ml/年

采用容積為3000ml的轉(zhuǎn)瓶，轉(zhuǎn)瓶的裝量為轉(zhuǎn)瓶容積的10%，即300ml/轉(zhuǎn)瓶，細(xì)胞培養(yǎng)的成功率為90%，病毒培養(yǎng)的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。

全年需培養(yǎng)細(xì)胞：

500萬mL/年÷90%÷90%÷90%≈685.9萬mL/年

細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)間為4天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天每批需培養(yǎng)細(xì)胞：

685.9萬mL/年÷75批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈305轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機(jī)

305轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺(tái)≈8臺(tái)

全年需培養(yǎng)病毒：

500萬mL/年÷90%÷90%≈617.3萬mL/年

病毒培養(yǎng)時(shí)間為2天，全年生產(chǎn)日數(shù)為300天，每批需培養(yǎng)病毒：

617.3萬mL/年÷150批/年÷300mL/轉(zhuǎn)瓶≈137轉(zhuǎn)瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉(zhuǎn)瓶機(jī)

137轉(zhuǎn)瓶/批÷40瓶/臺(tái)≈4臺(tái)

D.發(fā)酵罐計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，年產(chǎn)細(xì)菌滅活疫苗650萬mL，滅活苗水相（細(xì)菌原液）：油相=25%：75%

則年需細(xì)菌原液

650萬mL/年×25%=162.5萬mL/年

年工作日按300天計(jì)，細(xì)菌液每5天可培養(yǎng)一批，全年可培養(yǎng)60批，每批需培養(yǎng)細(xì)菌原液（細(xì)菌培養(yǎng)的成功率為90%，細(xì)菌液的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。）

162.5萬mL/年÷60批/年÷90%÷ 90%÷90%≈3.7萬mL/批

細(xì)菌發(fā)酵罐裝量為罐容積的70%，則發(fā)酵罐的容積為：

3.7萬mL÷70%≈5.3萬mL=53L

故配置100L發(fā)酵罐一套，可滿足生產(chǎn)的要求，并預(yù)留一定的生產(chǎn)能力以滿足擴(kuò)產(chǎn)的需要。

E.乳化分裝工序設(shè)備計(jì)算

根據(jù)生產(chǎn)大綱，滅活疫苗年產(chǎn)量為12650萬mL，共分為120批進(jìn)行配苗乳化，則每批需配苗

12650萬mL/年÷120批/年≈100萬mL/批

配置一套1500L的乳化設(shè)備（含油佐劑制備罐1臺(tái)，乳化罐1臺(tái)，儲(chǔ)液罐1臺(tái)，高壓勻漿泵1臺(tái)），可滿足生產(chǎn)的需要。

液體灌裝機(jī)：

每批疫苗需分裝的瓶數(shù)為

100萬mL/批÷100mL/瓶=10000瓶/批（以100mL/瓶計(jì)）

選用2臺(tái)ZD-Ⅱ型全自動(dòng)液體灌裝機(jī)，該機(jī)灌裝速度為60瓶/min，每小時(shí)可灌裝3600瓶，2 h可完成全部灌裝量，滿足生產(chǎn)的需要。

軋蓋機(jī)、貼簽機(jī)、熱風(fēng)循環(huán)烘箱、脈動(dòng)真空蒸汽滅菌器、細(xì)胞瓶洗瓶機(jī)等設(shè)備按生產(chǎn)能力配套設(shè)置。

參考文獻(xiàn)

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