獸用滅活疫苗設計淺析

王勤

摘 要：用微生物（細菌、病毒、衣原體、鉤端螺旋體等）、微生物代謝產物、原蟲、動物血液和組織等，經加工制成，作為預防、治療、診斷特定傳染病或其他有關疾病的免疫制劑稱之為獸用疫苗。因某些疫苗活性會對人體產生有害影響，用物理方法或化學方法將其滅活后制成的疫苗稱之為滅活疫苗。

關鍵詞：獸用疫苗 滅活 工藝 設備選型計算

中圖分類號：S852 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2014）04（b）-0225-01

1 滅活苗簡述

疫苗：凡是具有良好免疫原性的病原微生物，經繁殖和處理后制成的制品，用以接種動物能產生相應的免疫力者。除一般活菌（毒）疫苗、滅活疫苗外，還包括類毒素、類毒素與菌體混合疫苗、亞單位組份苗、基因缺失疫苗、活載體疫苗、人工合成疫苗、抗獨特型抗體疫苗等。

滅活疫苗：用物理方法或化學方法將其滅活后制成的疫苗。

2 各種動物疫苗工藝流程示例

（1）滅活苗生產工藝過程簡述

滅活雞胚苗：采用國內成熟的雞胚培養病毒的技術。將種毒接種于9～11日齡非免疫雞胚，接種后的雞胚放在孵化箱中繼續孵化，棄去接種后24 h內死亡的雞胚，培養好的雞胚取出，放在2～8 ℃冷庫中冷藏，之后收獲雞胚尿囊液等。收獲的雞胚尿囊液等加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的雞胚尿囊液等置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（2）滅活細胞苗：將配制好的細胞培養液加入轉瓶，將轉瓶置于溫室中培養，待轉瓶內長成單層細胞后，將毒種接種入轉瓶中，之后在溫室中繼續培養，收獲病毒原液。收獲的病毒原液加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的病毒原液置2～8 ℃冷庫冷藏備用。

（3）滅活細菌苗：采用發酵罐發酵培養細菌和固體培養細菌兩種技術。將菌種接種于培養液中，經發酵罐培養或接種在瓊脂平板上培養，收獲菌液（苔）。收獲的細菌加入甲醛等滅活劑滅活，滅活后的菌液置2～8 ℃冷庫或儲液罐中冷藏備用。

（4）乳化配滅活苗：在乳化罐中加入佐劑，滅菌冷卻后，按配比加入從冷庫中取出的抗原液，經乳化后分裝入疫苗瓶，分裝后的產品待檢驗合格后，包裝入庫。

3 滅活疫苗工藝設備計算示例

滅活疫苗車間的計算

A.前孵化箱計算

根據生產大綱，若年產雞胚滅活疫苗10000萬mL，疫苗水相與油相的配比為25%：75%，折合水相（病毒原液）2500萬mL。

每枚非免疫雞胚可生產病毒原液10 mL，雞胚前孵化成功率為90%，后孵化成功率為90%，疫苗分裝成品率為90%，則年需雞胚量為：

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%÷90%≈342.9萬胚/年

雞胚前孵化10天計，每年生產日數為300天，則全年可孵化30批。

每批需孵化雞胚

342.9萬胚/年÷30批/年≈11.4萬胚/批

前孵化采用6臺19200蛋位的孵化箱可滿足生產的需要。

B.后孵化箱計算

本項目雞胚接毒后采用孵化箱繼續孵化，年孵化量為

2500萬mL/年÷10mL/胚÷90%÷90%≈308.6萬胚/年

雞胚后孵化時間以3天計，每年生產日數為300天，則全年可孵化100批。

每批需孵化雞胚

308.6萬胚/年÷100批/年≈3.09萬胚/批

本項目配置3臺19200蛋位的孵化箱作為后孵化箱，可以滿足生產的需要。

C.轉瓶機計算

年產細胞滅活苗2000萬ml，

滅活苗水相（病毒原液）：油相=25%：75%

則年需病毒原液

2000萬ml/年×25%=500萬ml/年

采用容積為3000ml的轉瓶，轉瓶的裝量為轉瓶容積的10%，即300ml/轉瓶，細胞培養的成功率為90%，病毒培養的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。

全年需培養細胞：

500萬mL/年÷90%÷90%÷90%≈685.9萬mL/年

細胞培養的時間為4天，全年生產日數為300天每批需培養細胞：

685.9萬mL/年÷75批/年÷300mL/轉瓶≈305轉瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉瓶機

305轉瓶/批÷40瓶/臺≈8臺

全年需培養病毒：

500萬mL/年÷90%÷90%≈617.3萬mL/年

病毒培養時間為2天，全年生產日數為300天，每批需培養病毒：

617.3萬mL/年÷150批/年÷300mL/轉瓶≈137轉瓶/批

需配置3000mL、40瓶位轉瓶機

137轉瓶/批÷40瓶/臺≈4臺

D.發酵罐計算

根據生產大綱，年產細菌滅活疫苗650萬mL，滅活苗水相（細菌原液）：油相=25%：75%

則年需細菌原液

650萬mL/年×25%=162.5萬mL/年

年工作日按300天計，細菌液每5天可培養一批，全年可培養60批，每批需培養細菌原液（細菌培養的成功率為90%，細菌液的收獲率為90%，疫苗分裝成品率為90%。）

162.5萬mL/年÷60批/年÷90%÷ 90%÷90%≈3.7萬mL/批

細菌發酵罐裝量為罐容積的70%，則發酵罐的容積為：

3.7萬mL÷70%≈5.3萬mL=53L

故配置100L發酵罐一套，可滿足生產的要求，并預留一定的生產能力以滿足擴產的需要。

E.乳化分裝工序設備計算

根據生產大綱，滅活疫苗年產量為12650萬mL，共分為120批進行配苗乳化，則每批需配苗

12650萬mL/年÷120批/年≈100萬mL/批

配置一套1500L的乳化設備（含油佐劑制備罐1臺，乳化罐1臺，儲液罐1臺，高壓勻漿泵1臺），可滿足生產的需要。

液體灌裝機：

每批疫苗需分裝的瓶數為

100萬mL/批÷100mL/瓶=10000瓶/批（以100mL/瓶計）

選用2臺ZD-Ⅱ型全自動液體灌裝機，該機灌裝速度為60瓶/min，每小時可灌裝3600瓶，2 h可完成全部灌裝量，滿足生產的需要。

軋蓋機、貼簽機、熱風循環烘箱、脈動真空蒸汽滅菌器、細胞瓶洗瓶機等設備按生產能力配套設置。

參考文獻

[1] 中國獸藥典委員會.中國獸藥典[M].中國農業出版社，2010.

[2] 中國建筑科學研究院.生物安全實驗室建筑技術規范[M].中國建筑工業出版社，2004.

[3] 潔凈廠房設計規范[M].中國計劃出版社，2001.endprint