咪唑斯汀治療尋常型銀屑病前后血清及皮損中可溶性細胞間粘附分子-1含量的變化

劉琬椿，熊心猜，段 茜，劉 婷，張 浩

(川北醫院學院附屬醫院皮膚科，四川 南充 637000)

銀屑病是以表皮角質形成細胞過度增殖，白細胞局部浸潤為特征的慢性炎癥性皮膚病。細胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成員之一，在炎癥反應部位的血管內皮有強表達，同時在角質形成細胞也有表達。已有較多研究對銀屑病患者血清及皮損中ICAM-1進行了研究，顯示其與銀屑病的炎癥、活動性及嚴重度有關，可作為判斷藥物治療有效性的綜合指標之一［1～5］。2012年3～7月，我們采用酶聯免疫吸附法(ELISA)及免疫組化染色檢測了56例尋常型銀屑病患者咪唑斯汀治療前后血清sICAM-1及皮損中ICAM-1的變化情況，使用銀屑病疾病活動嚴重指數(PASI)評價治療效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年3～月在我科就診的56例銀屑病患者，男38例，女 18例，年齡17～60歲［(31.52±9.75)歲］，病程 10 月至 16 年［(10.18±2.27)年］。所有病例均符合尋常型銀屑病(皮損面積占體表面積20% ～50%)診斷標準并知情同意，簽署知情同意書，入選前1月未服用抗組胺藥、免疫調節劑或糖皮質激素，排除患有扁平苔癬、慢性濕疹、變態反應性疾病及皮膚腫瘤。使用隨機數字表法隨機分為試驗組和對照組各28例。兩組年齡、性別、病情分級差異均無統計學意義(P＞0.05)。兩組均給予鹵米松軟膏外擦，每日2次。試驗組在此基礎上給予咪唑斯汀10 mg，每日一次。療程6周。使用PASI評價療效。

1.2 標本采集及方法 分別在治療前及治療6周后抽取患者肘靜脈血2 ml，離心收集血清，－80℃下保存。采用雙抗體夾心ELISA法，嚴格按sICAM-1試劑盒(medgenix diagnostics，belgium)操作步驟進行。采用常規活檢方法，對治療前及治療6周后的同一患者，選取皮損內緣進行取材，立即置于－80℃下保存，進行SP免疫組化染色。鼠抗人ICAM-1單克隆抗體及過氧化酶標記的鏈霉卵白素(SP)試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司(Zymed，USA)。恒冷箱切片機制成6～8 μm厚冰凍切片，冷丙酮固定后以5%山羊血清封閉10分鐘，吸去血清，滴加ICAM-1一抗(每次均設陰性對照)，40 ℃過夜，滴加1%BSA-PBS 1︰300稀釋的二抗，37℃孵育30分鐘，37℃下DAB-H2O2顯色15～30分鐘，自來水沖洗，蘇木素復染，中性樹膠封片。以上各步驟間均用pH 7.4的PBS液沖片3次。置顯微鏡下觀察，在胞漿或胞膜處有棕黃色或棕紅色顆粒狀物質沉積為陽性細胞。參照文獻［1］的方法進行染色、判斷。

1.3 統計學方法 所有數據應用SPSS 13.0軟件包處理。計量數據檢測結果呈正態分布，以均數±標準差表示，組間比較采用t檢驗;等級資料比較采用秩和檢驗;相關性分析采用Spearman秩相關。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 治療前后血清sICAM-1比較 治療6周后，兩組患者血清sICAM-1均有明顯下降，且試驗組下降幅度更明顯，與治療前比較差異有統計學意義(P＜0.05);兩組比較，差異有統計學意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組患者血清sICAM-1及皮損ICAM-1染色結果比較

2.2 治療前后皮損ICAM-1比較 在真皮血管內皮細胞及角質形成細胞上均可見ICAM-1表達。治療6周后，兩組患者皮損處的ICAM-1原位表達均下調，且試驗組下調更明顯(試驗組:Z=4.83，P＜0001;對照組:Z=3.29，P ＜0.001)，組間比較差異有統計學意義(Z=1.9，P＜0.05)，見表1。

2.3 血清sICAM-1及皮損ICAM-1與疾病活動指數(PASI)的相關性 血清 sICAM-1水平、皮損ICAM-1水平與PASI指數的相關系數分別為0.658和0.692(P＜0.05)，說明血清 sICAM-1及皮損ICAM-1均與PASI呈正相關。

2.4 不良反應 所有患者均未發生嚴重不良反應。可能與藥物有關的不良事件:試驗組出現3例嗜睡、1例口干，占14.29%;對照組出現3例皮膚紅斑、瘙癢加重，均1周后消失。

3 討論

ICAM-1又稱CD54，是淋巴細胞功能相關抗原特異的配體，屬于免疫球蛋白超家族的一種粘附分子，通過與淋巴細胞功能相關抗原(LFA-1)相結合，可介導一系列炎癥反應，特別是起著相互間傳遞信息和調節細胞功能的作用，對炎癥細胞向炎癥部位的浸潤起著非常重要的作用。它在很多疾病的發病及預后中均起重要作用，如腫瘤、自身免疫性疾病(甲亢、銀屑病、皮膚黏膜淋巴結綜合癥、1型糖尿病、過敏性紫癜、系統性紅斑狼瘡等等)。咪唑斯汀是一種H1受體拮抗劑，為既有抗組織胺又有抗過敏性炎癥作用的第二代新型抗組織胺藥，其抗過敏機制包括［6～8］:①強效、高選擇性組胺H1受體拮抗作用;②抑制活化的肥大細胞釋放組胺及炎癥細胞的趨化作用;③抑制變態反應時細胞間粘附分子的釋放。目前已有觀察咪唑斯汀治療尋常型銀屑病的報道［9，10］，但是罕有對其治療銀屑病的機制方面的研究。我們在已確定ICAM-1與銀屑病炎癥活動性和嚴重度有關的基礎上，應用PASI評分對咪唑斯汀應用于銀屑病治療進行觀察，并從血清和皮損中ICAM-1水平變化分析其可能作用機制。結果表明，口服咪唑斯汀配合外用鹵米松軟膏較單用外用制劑在減輕瘙癢、改善皮損紅斑、浸潤程度等方面更為有效，對應的反映炎癥的指標(ICAM-1)也下降的更低，說明咪唑斯汀可用于尋常型銀屑病的治療，可降低PASI評分和緩解瘙癢等。其作用機制可能為降低血管內皮細胞及皮損處角質細胞中ICAM-1水平，進而或同時抑制白三烯、TNF-α以及中性粒細胞游走等，從而減輕炎癥反應。

［1］張建中.銀屑病的流行病學與危險因素［J］.實用醫院臨床雜志，2013，10(1):4-6.

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［3］顏敏.尋常型銀屑病患者血清，皮損組織中ICAM-1的表達變化及意義［J］.山東醫藥，2011，51(22):90-91.

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［10］龐曉文，趙廣，田燕.咪唑斯汀治療尋常型銀屑病療效觀察［J］.中國麻風皮膚病雜志，2007，23(4):345.