非小細胞肺癌患者K-ras基因突變與預后的相關性分析

劉暉群，劉敏知，熊林楷

江西省腫瘤醫(yī)院 內(nèi)二科，江西 南昌 330029

非小細胞肺癌（non small cell lung cancer，NSCLC）是目前臨床上最常見的肺癌類型。諸多研究表面，分子生物學因素如癌基因、抑癌基因、腫瘤細胞DNA含量、腫瘤黏附分子、腫瘤血管生成等，對NSCLC的生物學行為可以產(chǎn)生巨大的影響，從而決定著NSCLC的形態(tài)特征、生長方式、惡性程度、轉(zhuǎn)移、復發(fā)等，并進一步影響著患者的預后[1-3]。本研究即旨在探討NSCLC患者K-ras基因突變與預后的相關性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2006年3月～2008年7月江西省腫瘤醫(yī)院收治的92例患者。納入標準：①經(jīng)病理檢查確診為NSCLC；②臨床資料完整，相關檢查得到完善。排除標準：①隨訪丟失的患者；②治療方案不規(guī)范的患者。包括男性61例、女性31例；年齡42～75歲，平均（59.9±8.1）歲；病理分型腺癌79例、鱗癌8例、其他類型5例；有吸煙史患者62例，從未有過吸煙史患者30例。

1.2 治療方案

嚴格按照美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡（NCCN）提供的NSCLC治療指南給予研究對象綜合治療。92例患者中，34例采用以手術為主的綜合治療，余58例因喪失手術機會而采用以化療為主的綜合治療。

1.3 K-ras基因突變檢測

采用蝎形探針擴增阻遏突變系統(tǒng)（amplifica?tion refractory mutation system，ARMS）法對研究對象組織學標本行K-ras基因突變檢測，試劑盒由英國Delivering Pharmacogenomics公司生產(chǎn)，檢測K-ras基因第12、13位密碼子的7種突變，包括Gly12Cys（GGT＞TGT）突 變 、Gly12Val（GGT＞GTT）突 變 、Gly12Ala（GGT＞GCT）突變、Gly12Arg（GGT＞CGT）突變 、Gly12Asp（GGT＞GAT）突 變 、Gly12Ser（GGT＞AGT）突變、Gly13Asp（GGC＞GAC）突變。

1.4 隨訪方式

對所有研究對象進行隨訪，隨訪方式包括門診就診、電話、電子郵件等方式，記錄每個患者的生存情況。本研究中末次隨訪時間為2014年2月，所有研究對象均得到有效隨訪。

1.5 統(tǒng)計學分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件，計量資料用x±s表示，計量資料比較采用成組設計t檢驗，計數(shù)資料百分率比較采用四格表χ2檢驗，生存分析采用Log rank檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 NSCLC患者K-ras基因突變率及其突變類型

92例NSCLC患者中有11例K-ras基因突變陽性，陽性率為11.96%。突變類型包括Gly12Cys（GGT＞TGT）突變 3例、Gly12Val（GGT＞GTT）突變 2例、Gly12Ala（GGT＞GCT）突變 2例、Gly12Arg（GGT＞CGT）突 變 2 例 、Gly12Cys（GGT＞TGT）突 變 與Gly12Val（GGT＞GTT）突變并存1例、Gly12Cys（GGT＞TGT）突變與Gly12Ala（GGT＞GCT）突變并存1例。

2.2 K-ras基因突變陽性組與陰性組之間臨床病理特征的比較

K-ras基因突變陽性組與陰性組之間的患者性別、年齡、病理類型、吸煙史相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

2.3 K-ras基因突變陽性組與陰性組之間中位生存期的比較

K-ras基因突變陽性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者2例，總生存時間17～24個月；Ⅲa～Ⅳ期患者9例，總生存時間6～35個月，中位生存期10個月。K-ras基因突變陰性組包括Ⅰa～Ⅱb期患者22例，總生存時間15～67個月，中位生存期25個月；Ⅲa～Ⅳ期患者59例，總生存時間7～28個月，中位生存期19個月。Log rank檢驗顯示K-ras基因突變陽性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期顯著低于K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3 討論

20世紀80年代以來，諸多研究者對肺癌，尤其是NSCLC的病因、診斷、治療、預后進行了大量分子生物學研究，從而認識到NSCLC的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、侵襲、多藥耐藥等生物學行為與機體內(nèi)細胞基因功能或結構異常有關，如抑癌基因的突變與失活、原癌基因的突變與失活、端粒酶相關的細胞永生性激活、宿主抗腫瘤免疫基因的破壞、基因不穩(wěn)定性、轉(zhuǎn)移抑制相關基因異常、旁分泌與自分泌生長因子的激活、腫瘤血管生長因子的激活等[4-5]。隨著研究的深入，目前已初步形成了NSCLC分子診斷、分子分期、分子治療、分子預后等新的理論[6]，各種NSCLC分子生物學標志物逐步應用于臨床。

K-ras基因?qū)儆谠┗颍ㄎ挥谌巳旧w12p12.1，編碼一種定位于細胞膜上的p21-ras偶聯(lián)蛋白，其功能主要是將細胞生長、分化信號從激活受體傳導至蛋白激酶。K-ras基因突變后，其編碼的蛋白會喪失滅活的功能，從而刺激細胞自發(fā)性生長、分化，在各種惡性腫瘤如NSCLC、胰腺癌、結直腸癌、乳腺癌等的發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[7]。目前國內(nèi)外有關K-ras基因突變與NSCLC的研究報道較多。Meng等[1]報道，20%～30%的NSCLC患者K-ras基因突變陽性，其中以腺癌最為常見，K-ras基因突變可以縮短NSCLC患者尤其是早期腺癌患者的總生存期。Garassino等[8]報道，NSCLC患者的藥物敏感性、腫瘤生物學行為受K-ras基因突變類型的影響。

表1 K-ras基因突變陽性組與陰性組之間臨床病理特征的比較

在本研究中，我們對92例NSCLC患者進行了K-ras基因突變檢測，有11例患者K-ras基因突變陽性，其中9例為單位點突變，2例為多位點突變，K-ras基因突變陽性率為11.96%，略低于前述20%～30%的比例，這可能是由于地域差異、抽樣誤差等因素所致。其次，通過分析K-ras基因突變與NSCLC患者臨床病理特征的關系可知，K-ras基因突變與NSCLC患者的性別、年齡、病理類型、吸煙史等臨床資料無關，這與Baykara等[9]報道一致，說明K-ras基因突變不受NSCLC患者的一般臨床病理特征所影響。最后，我們還分析了K-ras基因突變對NSCLC患者中位生存期的影響，由于K-ras基因突變陽性組Ⅰa～Ⅱb期患者病例數(shù)過少，無法求出中位生存期，因此僅對K-ras基因突變陽性組Ⅲa～Ⅳ期患者與K-ras基因突變陰性組Ⅲa～Ⅳ期患者中位生存期做了比較，結果顯示前者中位生存期顯著低于后者，說明K-ras基因突變對NSCLC患者預后可以產(chǎn)生負性影響。綜上所述，在NSCLC患者的臨床診治過程中，K-ras基因突變檢測具有一定的臨床應用價值。

[1]Meng D,Yuan M,Li X,et al.Prognostic value of K-RAS mutations in patients with non-small cell lung cancer:a sys?tematic review with meta-analysis[J].Lung Cancer,2013,81(1):1-10.

[2]Li H,Xie L,Lai R S.Association of EGFR mutations with low BRCA1 gene expression in non-small cell lung cancer[J].Mol Clin Oncol,2013,1(1):195-199.

[3]Bi Jian-Wei,Mao Yi-Min,Sun Yu-Xia,et al.Expression lev?els of ERCC1 and RRM1 mRNA and clinical outcome of ad?vanced non-small cell lung cancer[J].Pak J Med Sci,2013,29(5):1158-1161.

[4]Oak C H,Wilson D,Lee H J,et al.Potential molecular ap?proaches for the early diagnosis of lung cancer(review)[J].Mol Med Rep,2012,6(5):931-936.

[5]Perlikos F,Harrington K J,Syrigos K N.Key molecular mech?anisms in lung cancer invasion and metastasis:a comprehen?sive review[J].Crit Rev Oncol Hematol,2013,87(1):1-11.

[6]Pendharkar D,Ausekar B V,Gupta S.Molecular biology of lung cancer-a review[J].Indian J Surg Oncol,2013,4(2):120-124.

[7]Ishida M,Igarashi T,Teramoto K,et al.Mucinous bronchio?loalveolar carcinoma with K-ras mutation arising in type 1 congenitalcystic adenomatoid malformation:a case report with review of the literature[J].Int J Clin Exp Pathol,2013,6(11):2597-2602.

[8]GarassinoM C,MarabeseM,RusconiP,etal.Different types of K-Ras mutations could affect drug sensitivity and tu?mour behaviour in non-small-cell lung cancer[J].Ann Oncol,2011,22(1):235-237.

[9]Baykara O,Tansarikaya M,Demirkaya A,et al.Association ofepidermalgrowth factorreceptorand K-Rasmutations with smoking history in non-small cell lung cancer patients[J].Exp Ther Med,2013,5(2):495-498.