血清TK1對肺癌患者的診斷和復發評估價值的研究

朱 明 韓衛衛 齊秋鋒 包燕青 張亞平 劉永萍

蘇州大學附屬常州市腫瘤醫院 1 腫瘤科 2 胸外科，江蘇省常州市 213002

細胞質胸苷激酶1（TK1）是一種嘧啶補救途徑的激酶，與DNA的合成和細胞周期密切相關，而癌癥正是由于正常細胞中某些基因突變而造成與細胞生長相關的酶和蛋白質調節失控，從而導致細胞無限增殖的一種惡性腫瘤。因此，健康人血清TK1含量極微或檢測不到，但惡性腫瘤患者血清TK1水平伴隨著細胞的急劇增殖而升高。近年來，血清TK1作為一種新的腫瘤標志物，在腫瘤的早期篩查、治療監控以及預后與復發評估中顯示著越來越重要的作用［1～3］。為探討血清TK1在肺癌診斷、術后監測及預后評估中的作用，本文采用免疫印跡增強化學發光法檢測了28例肺癌患者手術前、后血清TK1水平的變化情況，現分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 收集2011年5月－2012年5月份在常州市第四人民醫院行肺葉切除術的非小細胞肺癌患者28例（所有患者術前未經放化療，術后1個月開始行輔助性化療），其中男16例，女12例，年齡48～77歲，中位年齡66歲。所有患者均收集術前、術后1周、術后1個月各3份血清，共計114份血清樣本，進行血清TK1含量測定。同時選取30例本院體檢健康者（無心、肝、肺、腎等重要臟器疾患，無腫瘤家族史）的血清作為正常對照。上述標本收集均經醫學倫理委員會同意。

1.2 血清TK－1檢測 于清晨空腹采集靜脈血2ml，3h內以4 000rpm／min離心8～10min分離血清，分裝于2個Eppendorf管（1管用于檢測、另1管用于復檢）中，－80℃冰箱保存，備用。標本收集完成后進行血清TK1值測定。TK1細胞周期檢測試劑盒和CIS－1型化學發光數字成像分析儀由深圳市華瑞同康生物技術有限公司提供。全過程實行嚴格的雙盲法操作，測定步驟參照試劑盒說明書。檢測結果以TK1測定值2.0pM／L為標準域值，＞2.0pM／L為異常。

1.3 血清TK1的臨床評估標準 參考文獻［4］，當血清TK1值達到以下標準，評估為治療有效或部分緩解（PR）：（1）術后1個月，TK1水平下降為術前水平的50%；（2）術前及術后1個月均維持在正常水平（＜2.0pM）。穩定（SD）：治療后 TK1水平下降不足50%。進展（PD）：血清TK1水平升高。

2 結果

2.1 肺癌組患者與正常對照組血清TK1濃度比較

28例肺癌患者中有21例（75%）血清TK1高于參考值（2.0pM），平均濃度為（2.916±0.192）pM，顯著高于正常對照組（1.063±0.163）pM（P＜0.001），詳見表1。

表1 肺癌組、正常對照組血清TK1濃度比較（±s）

表1 肺癌組、正常對照組血清TK1濃度比較（±s）

組別 例數 TK1濃度（pM）P值肺癌組 28 2.954±0.176 ＜1.063±0.163 0.001正常對照組 30

2.2 肺癌患者手術前、后血清TK1水平比較 肺癌患者術后1周復查血清TK1水平較術前有所上升（3.588±0.341 7）pM，但差異不顯著，而術后1個月的TK1濃度較術前顯著下降（1.801±0.176）pM（P＜0.001），詳見圖1。

圖1 肺癌患者手術前、后血清TK1水平變化

2.3 血清TK1水平變化與患者預后的關系 Kaplan－Meier生存分析顯示，血清TK1水平的動態變化與患者的無復發生存率顯著相關，且術后TK1水平評估為PR組的患者中位無復發生存率（RFS）為16個月，而SD＋PD組為8個月，差異具有統計學意義（圖2，P＜0.05）。

圖2 TK1水平與肺癌患者無復發生存率（RFS）的關系

3 討論

肺癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，28個發達國家公布的調查統計資料顯示肺癌已成為惡性腫瘤中最常見的死亡原因。在我國，肺癌粗死亡率為40.98%，在城市腫瘤死因順位中排第1位，占城市全部惡性腫瘤死亡的27.29%，并呈逐年上升的趨勢［5］。目前，雖然治療方案不斷改進，但療效仍不甚理想。合理使用腫瘤標記物在肺癌的早期診斷、早期治療、預后和轉歸及治療療效的監測等方面具有重要的臨床意義。

TK1是DNA合成的關鍵酶，與細胞的增殖分裂密切相關。伴隨惡性腫瘤的細胞異常增殖，細胞內TK1合成顯著增加，并隨著腫瘤的快速生長、壞死，TK1可釋放至外周血。因此腫瘤組織中或患者外周血中TK1濃度與腫瘤的生長、增殖程度密切相關［6］。本研究對28例非小細胞肺癌患者、30例健康體檢者的血清測定發現，21例（75%）患者的血清TK1水平呈陽性，顯著高于正常對照組（P＜0.001）。提示TK1可作為肺癌早期診斷的一項新的生物指標。有文獻報道［7］，TK1水平與炎癥呈正相關。本研究發現，肺癌患者術后1周復查血清TK1水平較術前有所上升，而術后1個月TK1濃度顯著下降（P＜0.001），這可能由于術后1周手術并發感染未完全恢復所致，提示選擇術后1個月TK1值作為復查指標更為合理。大量文獻指出［8，9］，TK1水平的高低可作為預測腫瘤患者預后的一項重要指標。本研究生存分析顯示，術后TK1水平與患者的無復發生存率（RFS）顯著相關，且評估為PR組的患者無復發生存率明顯高于SD＋PD組（P＜0.05），證實了TK1還可作為復發評估的一項新的生物指標。

綜上所述，TK1作為一項新的生物學檢測指標，在腫瘤的早期診斷、療效評價以及復發評估中有著潛在的應用價值。

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