李得瑞,羅映虹,周冀衡,張一揚,陸 坤,盧 鑫
(1. 湖南農業大學煙草研究院,湖南 長沙410128;2. 文山州煙草公司硯山縣分公司,云南 文山州663100)
煙草是中國的一種重要經濟作物[1],而施肥是煙草栽培中的一項重要的技術。在目前的栽培技術中,施肥技術對烤煙的影響最大,其中氮是影響煙葉品質的主要元素,直接關系到烤煙的產量和質量[2-5]。烤煙是喜硝態氮的植物,國外的烤煙生產中一般提倡使用無機氮肥,并且要求硝態氮的比例超過50%[6]。國內研究也表明,烤煙的產量和品質隨硝態氮使用比例的增加而增加[7-8]。左天覺[6]報道,施用硝態氮比施用銨態氮能獲得更加高產、優質的烤煙。但也有研究認為,與硝態氮相比,有機氮和銨態氮是更好的氮源[9],隨著銨態氮比例的增加,烤煙產量、產值和含糖量都有所增加[10],總氮、生物堿、有機酸和酚類物質含量減少[11]。李貴生等[12]認為,銨態氮有利于增加氨基酸含量,但這一作用在100%供應銨態氮時反而下降。朱祝軍等[13]研究認為強光照時,硝態氮處理的葉綠素含量要顯著高于銨態氮處理,弱光照下則相反。不同的研究結果得出的結論有一些矛盾之處,試驗研究施用不同氮肥形態,考察烤煙前期的主要生理指標的變化和鉀肥的利用率,以期為生產上提高煙葉品質,特別是上部葉鉀含量提供理論支持。
用深21.2 cm、內徑14.7 cm、容積約為3.5 L 的圓柱形陶瓷桶盛放營養液。以Hoagland 全素營養液為基礎改進營養液,各元素質量濃度為(mg/L):N 100 mg/L,P 50 mg/L,K 200 mg/L,Ca 150 mg/L,Mg 40 mg/L,Fe 5 mg/L,Mn 0.5 mg/L,Cu 0.02 mg/L,Zn 0.05 mg/L,Mo 0.05 mg/L,B 0.5 mg/L,Cl 0.27 mg/L。供試烤煙品種為云87,經搓種后浸種24 h,露白的種子轉入經15%次氯酸鈉溶液消毒并已填充基質的育苗盤中,上覆少許基質,采用漂浮育苗技術育苗。選取健壯的6~7 葉齡的烤煙幼苗進行移栽,團棵期以前(移栽后30 d 左右)每7 d 更換一次營養液,每隔2 d 用稀硫酸或稀氫氧化鈉溶液調節pH值到6.5;團棵期后每5 d 更換一次營養液,每隔1 d 調節一次pH 值,全生育期每天用空氣泵通氣約1 h。團棵前全部采用氮素質量濃度為100 mg/L 的營養液配方,硝銨比為7∶3;團棵后選取長勢基本一致的健壯煙株,設5個處理,采用硝銨比分別為T1(2∶8)、T2(3.5∶6.5)、T3(5∶5)、T4(6.5∶3.5)、T5(8∶2)的營養液繼續進行水培,3 次重復。除氮以外的其他元素質量濃度及栽培管理措施同團棵前。試驗在溫室大棚進行,煙草生長期溫度和光照與自然條件一致。
于團棵期處理后的第7、14、21、28、35 天取一個鮮煙葉測葉綠素、硝酸還原酶、根系活力;另取一個樣殺青測鉀。根系活力采用TTC 浸提比色法測定[14]。葉綠素含量的測定:取新鮮煙株葉片,洗凈去掉中脈。然后稱取0.1 g 樣品,用丙酮與無水酒精1∶1 混合溶液浸泡,定容至10 mL,置于無光恒溫30℃條件下,直至葉片變白。用721 分光光度計分別測定645、663 nm 處的吸光值,以混合液為空白對照[14]。硝酸還原酶活性的測定采用活體法,最后用分光光度計測定520 nm 處吸光值,具體方法參照文獻[15]。全鉀采用火焰光度計測定。
采用Microsoft Excel 2010 和SPSS 20.0 軟件統計分析。
通過對處理后各時期的葉綠素的檢測發現(表1),隨著硝態氮比例的增大,試驗前期(7 d 內)高硝比例的處理(80%)葉綠素a 低于其他處理,葉綠素b 含量差異不顯著;試驗中期(14~21 d),各處理間葉綠素a 差異不顯著,但隨硝銨比增加,葉綠素b 的含量先增加后降低;試驗后期(35 d),隨硝銨比增加,葉綠素a 和葉綠素b 的含量都先增加后降低,其中硝銨比為6.5:3.5 處理的葉綠素a 和葉綠素b 的含量均最高。

表1 氮肥形態對不同時期煙葉葉綠素含量的影響 (mg/g)
對各個時期鮮煙葉的硝酸還原酶(NR)活性檢測發現(表2),試驗前期硝酸還原酶活性差異不顯著,但中后期差異逐漸增大,以T3(硝銨比5∶5)和T4(硝銨比6.5∶3.5)處理的硝酸還原酶活性最高,35 d 時,T5(硝銨比8∶2)的硝酸還原酶活性顯著高于T1(硝銨比2∶8)。

表2 氮肥形態對不同時期煙葉硝酸還原酶活性的影響
對各個時期鮮根系的根系活力進行檢測(表3),發現各個時期的根系活力均以T3(硝銨比5∶5)和T4(硝銨比6.5∶3.5)處理的較高,高銨處理(T1,硝銨比2:8)和高硝處理(T5,硝銨比8∶2)都會導致根系活力的下降,但高硝處理(T5)根系活力要高于高銨處理(T1);硝銨比為5∶5 的T3 處理根系活力與硝銨比為6.5∶3.5 的T4處理在7~28 d 期間差異不顯著,35 d 時T4 處理的根系活力顯著高于T3 處理的。

表3 氮肥形態對不同時期烤煙根系活力(TTF)的影響[μg/(g·h)]
對各個時期殺青樣的鉀含量測定后發現(表4),低硝態氮比例的處理(硝銨比2∶8)鉀含量始終低于其他處理,其他4個處理間差異不顯著。可以發現,除T1 外,其他幾個處理都能達到提鉀的效果。

表4 氮肥形態對不同時期煙葉鉀含量的影響 (%)
對各個時期殺青樣的氯含量檢測發現(表5),7 d 時各處理間差異不顯著,14 d、21 d 時T3、T4 處理的氯含量顯著低于T1 處理,28 d 時T4、T5 處理的氯含量顯著低于T1、T2 處理;35 d 時T4 處理氯含量顯著低于其他各個處理。

表5 各時期氯含量 (%)
對煙葉葉綠素含量的分析發現,隨著硝銨比增高,葉綠色a 和葉綠素b 含量在7~14 d 期間各處理沒有顯著差異,但在第21 天時,葉綠素b 呈現上升趨勢,葉綠素a 各處理差異不顯著,在28~35 d 期間,葉綠素a 和葉綠素b 呈先上升,后下降的趨勢,說明硝態氮比例高的處理葉綠素含量高于銨態氮比例高的處理,這與朱祝軍等[13]的研究部分相似,即強光的時候,硝態氮處理的葉綠素含量要顯著高于銨態氮處理,可能是試驗所處的環境光照較強的緣故。對硝酸還原酶的分析發現,硝酸還原酶變化趨勢與葉綠素含量相同,說明硝銨比越高,氮代謝和碳代謝同時增強,但銨態氮減少,反而對煙株生長不利,這與李貴生等[12]的研究相似,即銨態氮對煙草生長有利,煙草生長不能缺少銨態氮。同樣,根系活力與葉綠素、硝酸還原酶變化趨勢相同。這幾項指標越高,煙株的吸收氮代謝、碳代謝能力越強,吸收水分及礦質營養元素能力越強。
鉀素是烤煙的品質元素,對烤煙的燃燒性、安全性有著至關重要的影響。對殺青后煙葉中的鉀以及氯的檢測發現,鉀的變化趨勢與葉綠素、硝酸還原酶、根系活力的變化趨勢相同,與氯含量的變化相反,可能是由于礦質離子所帶電荷的原因造成的,硝酸根離子吸收的越多,帶相同電荷的氯離子吸收受到抑制,而促進鉀離子的吸收。
煙草喜硝態氮而不喜銨態氮,但銨態氮又是煙草生長必需的氮肥,硝銨比在6.5∶3.5 時能促進煙葉的碳氮代謝,提高煙葉產量;促進鉀素的吸收,控制氯的含量,能夠提高煙葉質量,這可為中國煙葉鉀含量普遍偏低的問題提供一種解決思路。
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