重癥蛛網膜下腔出血患者腦脊液細胞因子與預后的相關性研究

閆傳真　關靖宇

[摘 要] 目的：總結重癥動脈瘤性蛛網膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預后的相關性。方法：收集檢測26例hunt4-5級重癥蛛網膜下腔出血患者腦脊液標本 40份，ElISA法檢測腦脊液IL-11濃度。統計分析死亡組與生存組腦脊液IL-11檢測結果。結果：生存組16例，死亡組10例。死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL）。結論：重癥蛛網膜下腔出血患者腦脊液IL-11水平可以作為判斷預后的有效指標。

[關鍵詞] 蛛網膜下腔出血； 腦脊液； 細胞因子

中圖分類號：R743.35 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2014）05-060-03

盡管近年來神經影像學技術、顯微外科和血管內介入治療技術已有長足進步，但重癥蛛網膜下腔出血（ SAH ） 的病死率和致殘率仍很高，尤其是臨床分級不良患者，依然是神經外科治療的一個難點[1]。

患者的格拉斯哥（GCS）評分、蛛網膜下腔的fisher評分、年齡、出血量均提示病情的嚴重程度及預后不良程度[2]。但實驗室生物指標還是缺乏。研究發現在高血壓自發腦出血的患者的血清中 IL-6 水平與腦損傷的程度（包括血腫量與占位效應）相關，腦出血后局部與系統的驗證反應隨疾病的嚴重程度變化[3]。血清IL-11 的水平與腦出血的預后也密切相關，提示IL-11 的水平是腦損傷的有效生物標記。 但腦脊液IL-11 的水平是否與重癥蛛網膜下腔出血預后相關，尚無報道。本項研究收集檢測重癥蛛網膜下腔出血患者腦脊液標本檢測腦脊液IL-11濃度。統計分析死亡組與生存組腦脊液IL-11結果。研究總結重癥動脈瘤性蛛網膜下腔出血患者腦脊液的IL-11與預后的相關性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

26例患者，男11例，女15例。年齡22-84歲，平均（54.3±12.0）歲。hunt-hess分級4級20例，5級6例。患者出現腦疝的選擇開顱手術。未出現腦疝的選擇腦室外引流術。

12例行腦室外引流：均在局麻下進行，選擇額角穿刺點，局部麻醉，切開頭皮約0.5cm，顱錐鉆孔，引流管穿刺約5cm，見血性腦脊液流出后，固定引流管，接通引流系統，最高點置于外耳道連線上15cm。

14例行開顱動脈瘤夾閉：均在全麻下進行，均取翼點入路，切開頭皮，皮瓣懸吊，骨窗成型約5×5cm，“Y”切開硬膜，分離蛛網膜，暴露載瘤動脈及動脈瘤頸，夾閉動脈瘤，減張縫合硬膜，棄骨瓣，置硬膜外引流，縫合頭皮。其中四例患者因腦室積血同時行腦室外引流術。

1.2 研究方法

腦脊液通過腦室外引流管及術中抽取腦池中腦脊液獲得，腦脊液標本離心20min，取上清-80℃保存。ELISA法檢測（制劑購于R&D 公司）：用0.05M PH9.碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/mL。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1mL，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3min。加一定稀釋的待檢樣品0.1mL于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1h，然后洗滌。同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔。于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1mL。37℃孵育0.5～1h，洗滌。于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1mL，37℃，10～30min。于各反應孔中加入2M硫酸0.05mL。到酶標儀上讀數（OPD為底物是讀數波長為490nm，TMB為底物時波長為450nm）。

計劃收集所有患者前三天腦脊液標本[3]，因為在高血壓腦出血的研究中，發病前三天的腦脊液炎癥反應程度與預后密切相關。

1.3 統計學方法

采用SPSS13.0軟件進行數據處理，數據間比較采用χ2檢驗與fisher精確概率法，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 腦脊液收集

26例患者共收集標本40例（計劃收集所有患者前三天腦脊液標本，但開顱手術患者未行腦室外引流的僅能術中收集一次。10例死亡患者僅能收集到死亡前一天。）。

收集方式：通過腦室外引流管12例，開顱術中獲得14例，其中4例開顱合并腦室外引流。

收集時間分布：40份腦脊液標本，發病第一天收集20份（10例發病當天開顱手術者+4例開顱手術合并腦室外引流者+6例當天行腦室外引流者），第二天14份（6例發病第二天行腦室外引流者+4例第一天行腦室外引流生存者+4例開顱手術合并腦海外引流生存者），第三天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術合并腦海外引流生存者），第四天8份（6例腦室外引流管生存者+2例開顱手術合并腦海外引流生存者）。

2.2 生存組16例，死亡組10例

死亡組腦脊液IL-11（185.2±84.5 pg/mL）明顯高于生存組（101.2±65.6pg/mL），P<0.05，（本組患者病例數較少，僅能應用fisher精確概率法）。

3 討論

中樞神經系統是一個相對封閉且由其自身內部動態調節平衡的系統，正常生理情況下，血腦屏障可以限制各種致病因子侵犯 。一旦病原體侵入，誘發局部的炎癥反應，同時由于血腦屏障受損、通透性的增加，各種炎性細胞及因子侵入，產生免疫病理過程。

腦損傷早期，腦組織破壞，產生了大量刺激免疫系統的抗原，血腦屏障破壞、血管通透性增高，大量炎性細胞浸潤和激活。小膠質細胞活躍，星形膠質細胞增生，氧自由基和興奮性氨基酸增多。同時傷后腦水腫，組織缺血、缺氧，產生二次繼發腦損害引起強烈的免疫應答過程[3]。

另外，動物實驗研究表明，不管是在顱腦損傷的臨床還是動物實驗中。急性顱腦損傷的病理過程與炎性細胞因子關系密切[4]。

在眾多的細胞因子中，IL-11是一種負有多種生物活性的多潛能細胞因子，同時具有抗炎作用。可以抑制破骨細胞活性，改變神經分型，刺激組織纖維化，調節軟骨細胞及B細胞功能[5-8]。健康人血清中的IL-11參考值不超過30 pg/mL，IL-11的半衰期很短，經肝腎迅速代謝。僅有尿中可檢測到少量IL-11，因為腎小管的重吸收作用[9]。中樞神經系統的神經元體外增殖中發現有 IL-11。體外實驗中IL-11刺激神經干細胞的增殖并是神經發育的重要調節因子[10]。臨床上發現IL-11參與哮喘患者氣道粘膜下纖維化與慢性重建并與疾病嚴重程度正相關[11]。

本項研究提示腦脊液中IL-11水平明顯與蛛網膜下腔出血患者的嚴重程度相關。結果說明隨著腦組織損傷的嚴重程度加大，釋放到腦脊液中的炎癥因子明顯增多。同時因為IL-11的半衰期短，使其可成為腦損傷的實時標記，反映腦損傷的嚴重程度并預測預后。為重度蛛網膜下腔出血的預后提供實驗室依據。

另外，本項研究雖然沒有腦積水患者，仍需要討論腦積水，因為腦積水的發生是影響腦出血預后的重要因素[12]。而蛛網膜下腔出血是誘發腦積水的重要原因，因而IL-11的升高無疑間接證明了其發生的原因。血清IL-11水平與腦積水也明顯相關。分析原因可能是IL-11刺激中腦導水管內膜下纖維增生。

本項研究中腦室外引流應用12例，其中部分引流目的不是因為腦積水，而是引流蛛網膜下腔積血，特別是腦室內積血，因而未就是否有腦積水及其與IL-11關系做以分析。

總之，本項研究顯示，對于重癥蛛網膜下腔出血的患者，腦脊液的IL-11水平可以反映疾病的嚴重程度，預測預后。但導致IL-11增高釋放入中樞神經系統的機制以及影響受損腦組織IL-11的因素需要進一步研究，另外，由于標本數目有限，關于IL-11在發病后時間推移后的變化需要進一步研究。

參 考 文 獻

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