標本溶血對生化檢驗結果的干擾和影響及對策研究

羅祖軍，鄒德學，王 強，蔡仲仁，薛燕芬，林棋榮

（1.深圳市龍崗區橫崗人民醫院檢驗科，廣東深圳518115；2.北京大學深圳醫院檢驗科，廣東深圳518036）

血液標本是比較難以保存不變質的液體標本，在采集、運送以及儲藏的過程中常常會造成血紅細胞破裂，細胞中的血紅蛋白（Hb）釋放到血清或者血漿中，導致血液標本的溶血現象，對血液檢驗結果造成一定的影響。一般血液標本在生化檢驗之前先要檢查檢驗標本是否發生溶血，方法是檢測血清或者血漿中蛋白是否超過300mg／L［1］。血液標本中組分的改變會直接影響到臨床診斷，診斷出現誤差就會對患者的疾病治療造成不良影響，耽誤治療最佳時機，嚴重時可能危及患者的生命［2］。作者針對溶血前、后的生化檢驗進行臨床試驗研究，現將結果總結報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年6～8月來橫崗人民醫院體檢者58例作為研究對象。其中，男30例，女28例，年齡28～42歲，平均（35.78±6.23）歲。排除患有嚴重的血液類疾病、心腦血管疾病以及免疫類疾病患者。

1.2 方法 溶血制備：患者空腹情況下靜脈抽血5mL左右，分別注入2支肝素抗凝真空采血管，一支試管按照常規負壓將血液慢慢加入，另外一支試管去除試管帽后用力擠壓注入試管，多次操作，循環10次導致溶血。2種溶液在4 000r／min離心8～10min，后作為溶血管和正常管。選用BECKMANDXC－800全自動生化分析儀、貝克曼專用試劑、定標液以及德國朗道RAN－DOX測定K＋、Na＋、總蛋白質（TP）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK－MB）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、α－羥基丁酸脫氫酶（HBDH）、清蛋白（ALB）、高密度脂蛋白（HDL）以及三酰甘油（TG）等生化指標。采用速率法測定AST和LDH；用雙縮脲法測定TP；用溴鉀酚綠法測定ALB；用離子選擇電極法測定K＋和Na＋，用終點法測定TG；CK、CK－MB以及HBDH采用重氮鹽法測定。然后根據測定結果進行回歸分析，采用血清Hb濃度校對分析。

1.3 觀察指標 觀察溶血前、后測定的K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH、HBDH、ALB、HDL 以及 TG 等生化指標，分析哪些指標與溶血相關，并統計分析血清Hb濃度校對情況。

1.4 統計學處理 采用SPSS10.0統計軟件，計數資料采用t檢驗，血清Hb濃度變化值（X）與配對資料差異有意義的項目溶血變化值（Y）采用多元回歸分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 溶血前、后血液標本生化指標的檢驗情況 溶血前、后測定的各項生化指標中 K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH以及HBDH等比較差異有統計學意義（P＜0.05）；溶血前、后測定的各項生化指標中ALB、HDL以及TG等比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 溶血前、后血液標本生化指標檢驗結果±s，n＝58）

表1 溶血前、后血液標本生化指標檢驗結果±s，n＝58）

0.05 AST（g／L） 72.5±3.8 79.3±4.6 7.371 ＜0.05 CK（IU／mL） 127.6±68.5 168.9±78.6 6.002 ＜0.05 CK－MB（IU／mL） 6.5±1.2 84.6±16.5 87.109 ＜0.05 HBDH（IU／mL） 144.2±62.2 356.5±140.4 102.764 ＜0.05 LDH（IU／mL） 172.2±54.5 401.9±82.4 130.112 ＜0.05 K＋（mmol／L） 3.9±1.1 6.3±2.1 8.421 ＜0.05 Na＋（mmol／L） 142.2±5.6 123.1±6.7 5.388 ＜0.05 ALB（g／L） 41.6±1.8 41.6±1.7 0.123 ＞0.05 TG（mmol／L） 1.5±0.5 1.5±0.8 0.209 ＞0.05 HDL（mmol／L） 1.4±0.4 1.4±0.6 0.178 ＞0.05 t P TP（IU／mL） 37.1±23.2 60.8±19.5 20.398 ＜生化指標 溶血前 溶血后

2.2 血清Hb濃度變化值與相應溶血項目變化值比較 血清Hb濃度變化值與相應溶血項目變化值存在一定相關性。見表2。

表2 血清Hb濃度變化值與相應溶血項目變化值統計結果

續表2 血清Hb濃度變化值與相應溶血項目變化值統計結果

2.3 生化指標的回歸分析 K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH以及HBDH等指標與溶血相關性較大，相關系數（r）分別是0.998、－0.990、0.960、0.985、0.977、0.989、0.991以及0.992。回歸方程分別為YTP＝0.266 X－1.822、YAST＝0.747 X－0.628、YCK＝0.109 X－0.019、YCK－MB＝0.081 X－1.837、YHBDH＝0.001 X－0.121、YLDH＝0.018 X－0.257、YK＋＝1.860 X－0.186以及YNa＋＝－0.228 X－0.257。

3 討 論

臨床生化指標檢驗中溶血是比較常見的干擾因素，溶血前、后生化指標出現偏差的原因包括溶血對檢測試驗本身的影響以及紅細胞中的物質進入血清或者血漿中［3－4］。LDH和AST在紅細胞內的濃度遠遠大于在血清中的濃度，當血液標本發生溶血后，紅細胞中的LDH和AST就會轉移到血清中，使得生化指標中的AST和LDH血清中的指標偏高，影響臨床診斷治療。CK在正常的紅細胞中的含量為0，血液標本發生溶血后會有腺苷酸激酶（AK）釋放到血清中，AK會轉化為肌酸和ATP，使得CK的含量測定值偏高［5］。CK－MB的含量隨著CK的升高而升高，在血液標本溶血后同樣受到AK的影響而偏高。而HBDH的含量與AST的變化原理基本相似，溶血后會釋放到血清中使得檢驗結果偏高。TP含量溶血后升高的原因在于大量血紅蛋白中的珠蛋白釋放到血清中。韋小榮［6］曾對標本溶血對生化檢驗結果的影響進行研究，研究結論與以上理論基本相似。劉亞普［7］和楊洪芬等［8］對溶血后的生化指標偏差進行校對，效果比較理想，本院依照其采取的方法進行研究發現，K＋、Na＋、TP、CK、CK－MB、AST、LDH 以及HBDH等指標與溶血的相關系數分別是0.998、－0.990、0.960、0.985、0.977、0.989、0.991以及0.992。回歸方程分別為YTP＝0.266 X－1.822、YAST＝0.747 X－0.628、YCK＝0.109 X－0.019、YCK－MB＝0.081 X－1.837、YHBDH＝0.001 X－0.121、YLDH＝0.018 X－0.257、YK＋ ＝1.860X－0.186以及YNa＋＝－0.228X－0.257。Frank曾研究報道的Hb濃度為208 g／L時溶血標本中的△LDH為268IU／L，本文的研究結論與其相似。各項指標可以根據其回歸方程進行校正，對輕、中度的溶血效果較好，嚴重溶血的最好重新采集，不能重新采集的Hb濃度校正對于受Hb濃度影響的指標同樣具有一定的臨床價值。

總之，雖然Hb濃度校正具有一定的作用，但是，在血液標本的檢驗中要十分注意保證血液標本最好不發生溶血情況，減少檢驗診斷中的誤差［9－12］。采血器具要保持清潔和干凈，不可以用乙醇消毒，因為乙醇會導致紅細胞發生溶血［13－15］。采血過程中胳膊不宜扎太緊，抽血的速度不宜過快，以免造成紅細胞破裂發生溶血。防止其他物質以及消毒液進入血液標本中，以免影響標本的檢驗結果。

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