利奈唑胺注射液含量測定方法驗證

重慶華邦制藥有限公司，重慶 北部新區(qū) 401121

利奈唑胺注射液含量測定方法驗證

張婷

重慶華邦制藥有限公司，重慶 北部新區(qū) 401121

目的考察利奈唑胺注射液的含量檢驗方法是否能準確、可靠,并獲得客觀實際的數(shù)據(jù)或結(jié)果。方法按照利奈唑胺注射液質(zhì)量標準及中國藥典的要求對利奈唑胺注射液含量檢驗方法進行驗證，本次驗證的項目包括系統(tǒng)適用性、專屬性、線性、準確度、重復(fù)性及范圍、耐用性。結(jié)論從分析的結(jié)果看，使用高效液相色譜法檢測利奈唑胺注射液的含量具有很高的準確性，值得推廣。

利奈唑胺注射液；方法學(xué)考察;含量測定

利奈唑胺為惡唑烷酮類的合成抗生素，利奈唑胺注射液用于治療由特定微生物敏感株引起的下列感染：耐萬古霉素的屎腸球菌引起的感染，包括并發(fā)的菌血癥；獲得性肺炎，致病菌為金黃色葡萄球菌(甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株)或肺炎鏈球菌(包括多藥耐藥的菌株MDRSP)；復(fù)雜性皮膚和皮膚軟組織感染，包括未并發(fā)骨髓炎的糖尿病足部感染，由金黃色葡萄球菌(甲氧西林敏感或耐甲氧西林的菌株)、化膿鏈球菌或無乳鏈球菌引起[1-2]。因注射劑質(zhì)量標準的嚴格要求，需按照規(guī)定的標準對其含量測定方法進行驗證。

進行多道焊時，應(yīng)當控制層間溫度，層間溫度過大會導(dǎo)致熱量積累，受熱區(qū)域增大，熱影響區(qū)變寬，同時導(dǎo)致晶粒粗大，降低強度與韌性，需控制焊道層間溫度不超過58℃。

1 儀器與材料

1.1 儀器 高效液相色譜儀、容量瓶、電子天平、移液管。

CNN的輸出Y(標簽值)為下一時間片內(nèi)多節(jié)點間組成區(qū)域內(nèi)各節(jié)點間連接狀態(tài)的組合,每種組合對應(yīng)唯一一個狀態(tài)編號,如式(3)所示.

1.2 試藥與試劑 利奈唑胺對照品；利奈唑胺注射液；三氟乙酸；乙腈、正己烷、異丙醇為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.2.2 方法專屬性 精密量取溶劑、空白輔料溶液、對照品溶液、樣品溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；要求溶劑、空白輔料不干擾利奈唑胺含量的測定，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與利奈唑胺對照品一致。實驗結(jié)果見表2。

2.2.3 線性 精密稱取利奈唑胺對照品0.05064g，置50ml容量瓶中，加10%乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。分別精密量取對照品貯備液2.5、4.0、5.0、6.0、7.5ml置50ml量瓶中，加10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度分別為50、80、100、120、150μg/ml的溶液，相當于供試品含量測定濃度線性范圍的50%～150%的溶液。實驗結(jié)果見表3。

2.2.4 精密度 精密稱取利奈唑胺對照品0.10048g，置100ml量瓶中，加10%乙腈超聲溶解并定容搖勻，作為對照品貯備液；稱取與處方量相應(yīng)比例的輔料，置50ml容量瓶中，然后分別加入對照品貯備液4.0、5.0、6.0ml(每個濃度制備三份)，加10%乙腈溶液適量，超聲并稀釋至刻度，搖勻，過濾，作為供試品溶液(相當于含量測試濃度的80%，100%，120%)。精密量取對照品貯備液5.0ml置50ml量瓶中，用10%乙腈稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密量取上述供試品溶液和對照品溶液各10μl注入色譜儀，記錄色譜圖。實驗結(jié)果見表4。

2.1 方法[3]用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流動相A為三氟醋酸水溶液(取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml水中)，流動相B為三氟醋酸乙腈溶液(取10%三氟醋酸溶液10ml加入到1000ml乙腈中)，按表1進行線性梯度洗脫；檢測波長為254nm。精密量取本品5ml，置100ml量瓶中，加10%乙腈溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取利奈唑胺對照品10mg，精密稱定，用10%乙腈溶液制成每1ml中約含利奈唑胺0.1mg的溶液，作為對照品溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。

表2 專屬性實驗結(jié)果

2.2 結(jié)果

第一，數(shù)據(jù)定義功能。該功能特指數(shù)據(jù)庫管理系統(tǒng)須準確提供數(shù)據(jù)定義語言，方便用戶準確定義數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)對象。

表3 線性實驗結(jié)果

結(jié)論：樣品峰面積與濃度的相關(guān)系數(shù)均大于0.999；樣品峰面積與濃度作圖為一條直線。

2.2.1 系統(tǒng)適用性試驗 取系統(tǒng)適應(yīng)性溶液10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。出峰順序依次為5-羥甲基糠醛、雜質(zhì)A、Z4d、雜質(zhì)B和利奈唑胺，利奈唑胺與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

表4 精密度實驗結(jié)果

2.2.5 重復(fù)性及范圍 取本品同一批樣品9份，(約相當于含量供試品濃度的80%，100%，120%各3份)，依含量測定方法進行測定。

左旋多巴對照品（上海Alfa Aesar公司，批號：10102261，純度：98%）；酪氨酸酶（美國Worthingto Biochemical公司，批號：33K14431，活性：1 050 U/mg）；冰醋酸（分析純）、甲醇（色譜純）均購自天津市大茂化學(xué)試劑廠；水為杭州娃哈哈集團有限公司純凈水。

表5 精重復(fù)性實驗結(jié)果

2.2.6 耐用性 取含量測定項下的對照品溶液和供試品溶液置容量瓶中，室溫放置，分別于0、2、4、8、24h取樣，按上述色譜條件進樣10μl，記錄色譜圖。結(jié)果見表6。

表6 耐用性實驗結(jié)果

3 討論

通過系統(tǒng)適用性試驗、方法專屬性、線性、準確度、重復(fù)性及范圍和耐用性等六個方面對利奈唑胺注射液含量測定方法進行了研究。從驗證結(jié)果來看，利奈唑胺與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求，檢驗方法的專屬性良好。在50～150μg/ml濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系(r=0.9999)，在測試濃度的80%～120%范圍內(nèi)平均回收率為100%，基本完全回收。樣品溶液在室溫條件下放置24h穩(wěn)定。綜上證明：在我們的實驗室條件下能達到方法規(guī)定的系統(tǒng)適用性要求；該方法對我公司生產(chǎn)的利奈唑胺注射液產(chǎn)品含量檢測具有良好的專屬性；我們實驗條件下的能滿足檢測要求，對產(chǎn)品質(zhì)量進行控制。

[1] 王建國，陳建．臨床治療中利奈唑胺的藥效學(xué)和藥動學(xué)研究進展[J]．中國抗生素雜志，2013，38(10)：730-736．

[2] 崔向麗，趙志剛．新型噁唑烷酮類抗生素利奈唑胺[J]．中國新藥雜志，2008，17(6)：530-533．

[3] 蔡劍秋．中華人民共和國藥典[M]．北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1995．

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1007-8517(2014)24-0017-02

2014.09.12)